硫化氢对大鼠海马神经元缺氧复氧损伤后的作用及其机制

发布时间：2018-03-21 21:49

  本文选题：硫化氢　切入点：氧糖缺失/恢复　出处：《华中科技大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的研究外源性硫化氢（hydrogensulfide，H_2S）对大鼠海马神经元氧糖缺失/恢复（oxygen-glucosedeprivationandrecovery,OGD/R)损伤后的作用，并探讨海马神经元OGD/R损伤后缺氧诱导因子-1α（hypoxia-induciblefactor-1α,HIF-la）的变化及H_2S的干预作用。 方法孕16-18d胎鼠海马神经元原代培养，培养7d后神经元特异性烯醇化酶（neuron-specificenolase，NSE）免疫组化法作神经元鉴定，培养第8天时OGD1h/R24h造成缺氧/复氧损伤，缺氧同时给予硫氢化钠（sodiumhydrosulfide,NaHS）干预。将大鼠海马神经元随机分为3组：正常培养组（Ⅰ组）、OGD/R组（Ⅱ组）、OGD/R+NaHS组（Ⅲ组），Ⅲ组又根据NaHS浓度分为Ⅲ1-5亚组；NaHS浓度分别为25、50、100、200、400μmol/L。MTT法测定各组细胞活力，比色法检测各组培养液中乳酸脱氢酶（lactatedehydrogenase,LDH）活性，流式法检测各组细胞凋亡，RT-PCR法检测各组细胞Caspase-3mRNA,HIF-1mRNA表达。 结果（1）与正常组相比较，模型组细胞活力明显降低，培养液中LDH漏出增多，凋亡加重，Caspase-3mRNA、HIF-1αmRNA表达增高（P＜0.01）；（2）与模型组相比较，Ⅲ1组细胞活力、培养液中LDH漏出、凋亡、Caspase-3mRNA、HIF-1αmRNA表达的差异无统计学意义（P＞0.05）；（3）与模型组相比较，Ⅲ2-4组细胞活力明显增高，培养液中LDH漏出减轻，凋亡减轻，Caspase-3mRNA表达降低，HIF-1αmRNA表达明显增高（P＜0.01）；(4）与模型组相比较，Ⅲ5组细胞活力明显降低，，培养液中LDH漏出增多，凋亡加重，Caspase-3mRNA表达增高，HIF-1αmRNA表达明显降低（P＜0.01）。 结论低浓度H_2S（25μmol/L）对海马神经元OGD/R损伤无明显影响，中浓度H_2S（50-200μmol/L）可以减轻海马神经元OGD/R损伤，增加细胞活力，减轻细胞凋亡，但高浓度H_2S（400μmol/L）则可加重其损伤；海马神经元OGD/R损伤后HIF-1αmRNA表达增强，适当浓度H_2S（50-200μmol/L）可能通过上调HIF-lα的表达发挥保护作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of exogenous hydrogen sulfide (H2S) on oxygen-glucose privacy and recovery of oxygen-glucose privacy and recovery after oxygen-glucose deprivation and recovery of hypoxic-inducible factor-1 伪 hypoxia-inducible factor-1 伪 (HIF-laA) in hippocampal neurons after OGD/R injury in rats and to explore the effect of H2S on HIF-la-la-induced by hypoxia inducible factor 1 伪 hypoxia-inducible factor-1 伪 (HIF-laa) in hippocampal neurons after injury of hypoxia inducible factor 1 伪 hypoxia-inducible factor-1 伪 (HIF-laa). Methods Neuron specific enolase neuron-specific enolase (NSE) immunohistochemical method was used to identify the neurons in hippocampal neurons of fetal rats on the 16th to 18th day of gestation. Hypoxia / reoxygenation injury was induced by OGD1h/R24h on the 8th day of culture. The hippocampal neurons of rats were randomly divided into three groups: normal culture group (group 鈪

本文编号：1645701