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乳源酪蛋白糖巨肽作用人结肠癌细胞HT-29调控炎症活力研究

发布时间:2018-04-01 05:03

  本文选题:酪蛋白糖巨肽 切入点:结肠癌细胞HT- 出处:《食品科学》2017年15期


【摘要】:为进一步阐释乳源酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)的抗炎及修复肠道炎症的功效,本研究在确定了乳源CGMP对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的结肠癌细胞HT-29NF-κB亚单位p65蛋白的影响和乳源CGMP调控核转录因子(nuclear factor,NF)-κB信号通路的基础上,通过构建表达乳源CGMP和NF-κB必需调节蛋白(NF-κB essential modulator,NEMO)的质粒,共转HT-29细胞,免疫共沉淀测定两个蛋白的相互作用。最后采用线粒体膜电位法测定乳源CGMP对HT-29细胞的促凋亡作用。结果表明,乳源CGMP与NEMO(NF-κB essential modulator)30 h共转HT-29细胞中,乳源CGMP与NEMO蛋白均表达,且表现出二者的相互作用。乳源CGMP可与NEMO相互作用影响NF-κB信号通路;同时乳源CGMP还促进HT-29细胞凋亡,呈时间依赖性,其中0.1μg/m L的CGMP作用效果最好。乳源CGMP与NEMO相互作用是间接作用于IκB激酶(IκB kinase,IKK)而作用于?IκB,进而影响NF-κB信号通路。研究揭示了乳源CGMP调控NF-κB信号通路的另一种途径,也充分说明乳源CGMP可通过作用多种抗炎途径发挥其调控作用。
[Abstract]:In order to further elucidate the anti-inflammatory effect of casein glycomacropeptidec CGMPs and the effect of repairing intestinal inflammation, In this study, we determined the effect of milk source CGMP on the p65 protein of human colon cancer cell line HT-29NF- 魏 B induced by lipopolysaccharide polysaccharide (LPSs) and the regulation of nuclear transcription factor nuclear factor nuclear factor- 魏 B signaling pathway by milk source CGMP. CGMP and NF- 魏 B essential regulatory proteins (NF- 魏 B essential modulator Nemo) were constructed and co-transformed into HT-29 cells. The interaction of two proteins was assayed by immunoprecipitation. Finally, the apoptotic effect of CGMP on HT-29 cells was determined by mitochondrial membrane potential method. The results showed that the expression of CGMP and NEMO protein in breast derived CGMP and NEMONF- 魏 B essential modulator)30 h cotransfected HT-29 cells were detected. Milk source CGMP could interact with NEMO to influence NF- 魏 B signaling pathway, and milk source CGMP could promote HT-29 cell apoptosis in a time dependent manner. The effect of 0.1 渭 g / mL CGMP was the best. The interaction of milk source CGMP and NEMO was mediated by I 魏 B kinase I 魏 B kinase (Ike). I 魏 B, which in turn affects NF- 魏 B signaling pathway. This study revealed another pathway of regulation of NF- 魏 B signaling pathway by CGMP, and fully demonstrated that milk source CGMP can play its regulatory role by acting on a variety of anti-inflammatory pathways.
【作者单位】: 天津商业大学生物技术与食品科学学院天津市食品生物技术重点实验室;
【基金】:国家自然科学基金面上项目(31071522) 天津商业大学国家基金培育项目(160120)
【分类号】:R151;TS252.1

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本文编号:1694070


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