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纳米二氧化硅对HaCaT细胞中p53基因表达及其启动子甲基化的影响

发布时间:2018-04-22 20:41

  本文选题:纳米二氧化硅 + p ; 参考:《毒理学杂志》2015年04期


【摘要】:目的研究纳米二氧化硅(nm-SiO2)对人皮肤表皮细胞(HaCaT)中p53基因的表达及基因启动子区甲基化的影响。方法分别以2.5、5、10μg/ml的nm-SiO2溶液和10μg/ml的微米级SiO2(micro-SiO2)处理HaCaT24h;以3μmol/LDNA甲基化转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷(DAC)处理48h的10μg/mlnm-SiO2组为阳性对照,并设立溶剂对照组。应用荧光定量PCR检测p53基因mRNA水平的表达,Western-blot法检测其蛋白水平的变化,应用甲基化特异性PCR(MSP)检测p53基因启动子区CpG岛的甲基化状态。结果nm-SiO2作用24h后,HaCaT细胞中p53基因表达呈上调趋势并且p53启动子区未检测出甲基化状态。结论nm-SiO2暴露可以上调HaCaT细胞中p53基因的表达,尚未发现这种上调与p53基因启动子区CpG岛的甲基化水平改变有关。
[Abstract]:Objective to study the effect of nano-silica nm-SiO2 on p53 gene expression and promoter methylation in human skin epidermal cells (HaCaT). Methods HaCaT was treated with 2.5 渭 mol/LDNA 5 渭 g/ml nm-SiO2 solution and 10 渭 g/ml micron sio _ 2 micro-SiO _ 2 solution for 24 h, and 10 渭 g/mlnm-SiO2 group treated with 3 渭 mol/LDNA methyltransferase inhibitor 5-deoxyazacytidine for 48 h as positive control group, and solvent control group was set up. The expression of p53 gene mRNA was detected by fluorescence quantitative PCR and the methylation status of CpG island in the promoter region of p53 gene was detected by methylation specific PCR- MSPs. Results the expression of p53 gene was up-regulated in HaCaT cells treated with nm-SiO2 for 24 h, and no methylation was detected in p53 promoter region. Conclusion nm-SiO2 exposure can up-regulate the expression of p53 gene in HaCaT cells, which has not been found to be related to the change of methylation level of CpG island in the promoter region of p53 gene.
【作者单位】: 深圳市慢性病防治中心分子生物室;深圳市疾病预防控制中心;
【基金】:国家自然科学基金项目(81202239) 深圳市科技计划项目(201401070)
【分类号】:R114

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号:1788862

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