高鱼油饮食对肝脏炎症、补体系统及肠道菌群的影响

发布时间：2018-05-04 21:27

本文选题：鱼油 + n-3多不饱和脂肪酸　；参考：《江苏大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:众多的研究表明,高摄入饱和脂肪酸,尤其是n-6不饱和脂肪酸可促进慢性炎症及相关疾病的发生,如心血管疾病。有报道表明鱼油中富含大量的n-3多不饱和脂肪酸,该n-3多不饱和脂肪酸有明显的抑炎效应,在一定程度上可以预防高脂饮食引起的心血管等慢性疾病的发生、发展。但这大都源自较低水平摄入n-3不饱和脂肪酸的研究结果,而高摄入n-3不饱和脂肪酸对于机体的影响,尤其是对于肝脏、补体及肠道菌群等的影响尚不清楚。本文利用小鼠为模型研究了高鱼油摄入对以上所述补体等的影响,以期探讨高摄入n-3不饱和脂肪酸对机体的影响。方法:(1)将适龄C57BL/6小鼠随机分成两组:低脂正常饮食组(LFD)和高n-3PUFAs鱼油饮食组(FO)。每组小鼠分别给予4周的低脂正常饮食或高n-3PUFAs鱼油饮食。为期4周不同饮食后,用分析天平分别称取各组小鼠体重、脾脏重量以及肝脏重量,同时观察小鼠肠系膜淋巴结的肉眼变化,并拍照。(2)采用流式细胞术分析两组小鼠肝脏中CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD11b+Gr-1+细胞比例变化。肝脏组织切片进行HE染色观察。小鼠肝脏中IL-1β、IL-6和MCP-1等炎症相关因子的变化,采用荧光定量PCR的方法测定。(3)收集小鼠肝脏及血清,采用ELISA的方法测定总补体活性(CH50)、膜攻击复合物(MAC)以及补体C3的含量。荧光定量PCR法测定了补体激活经典途径(CP)、旁路途径(AP)以及MBL途径中重要补体分子的表达量,比如C3、C4b、C1qb、CFB、CFH、MASP1等。两组小鼠肠系膜淋巴结、脾脏、肝脏、外周血中补体受体CR3、CR4的表达水平,利用流式细胞术探究。(4)4周不同饮食后,收集小鼠粪便,利用高通量Miseq测序技术以及相关统计学分析方法,定量分析肠道内微生物结构特征,包括OTUs聚类分析和样品复杂度分析。结果:(1)高鱼油饮食后,小鼠的体重并没有发现明显的变化,但脾脏重量明显增大,并且呈现肉眼可见的充血肿胀变大。肝脏重量虽然没有大的变化,但肉眼观察也呈现出充血性改变。同时,高鱼油组小鼠的肠系膜淋巴结与低脂组小鼠白色、光滑、透明的肠系膜淋巴结相比,变黄、变粘连、变得有油腻感。(2)在高鱼油饮食后,经流式分析显示,CD4+T细胞比例增加,CD4+T细胞和CD8+T细胞比例发生了倒置。高鱼油饮食组小鼠肝脏中,不管是CD11b+Gr-1hi细胞还是CD11b+Gr-1int细胞都发生了明显增加。这一结果也在肝脏组织切片中得以验证,肝脏组织切片中呈现出更多的炎性细胞。同样炎症相关因子IL-1β、IL-6和MCP-1的m RNA转录水平也明显增高。(3)经ELISA分析,在高鱼油组小鼠中,总补体活性(CH50)、膜攻击复合物(MAC)以及补体C3含量明显增加。荧光定量PCR结果显示,补体C3、C4b、C1qb、CFB m RNA水平增加,CFH表达量下降,MASP1表达量没有明显变化。同时,高鱼油饮食后,补体受体CR3在肠系膜淋巴结和脾脏中高表达,在肝脏和外周血中变化不明显。而补体受体CR4表达水平没有发生明显的变化。(4)Miseq测序结果显示,高鱼油组小鼠肠道内菌群多样性较低脂饮食组降低,同时Bacteroidetes(拟杆菌门)明显下降,出现了新的优势菌群Akkermansia菌属。结论:高鱼油饮食促进肝脏炎症的发生,并且激活了补体系统,同时也影响了肠道内微生物的种群结构,改变了肠道菌群的种类多样性。
[Abstract]:Objective : To study the effects of high intake of n - 3 unsaturated fatty acids on human body , especially for liver , complement and intestinal flora . Results : ( 1 ) After diet of high fish oil , there was no obvious change in the body weight of mice , but the ratio of CD4 + T cells and CD8 + T cells increased significantly . ( 4 ) Miseq sequencing showed that the diversity of intestinal flora in high fish oil group was lower than that in low fat diet group , while Bacteroidetes ( bacteroidetes ) decreased significantly , and new dominant flora Akkermansia was found . Conclusion : The high fish oil diet promotes the occurrence of liver inflammation and activates the complement system , and also affects the population structure of microorganism in intestinal tract , and changes the species diversity of intestinal flora .

【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R151

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