宫内多环芳烃暴露对胎儿基因甲基化的影响及与DNA加合物关系研究

发布时间：2018-05-13 19:15

  本文选题：多环芳烃 + 宫内暴露　； 参考：《中国疾病预防控制中心》2014年博士论文

【摘要】：目的： 研究北方某市母婴多环芳烃(PAHs)负荷水平及其影响因素以及宫内多环芳烃暴露与脐带血生成BPDE-DNA加合物关系的研究；探讨宫内暴露PAHs对胎儿基因组甲基化的影响；研究宫内PAHs暴露水平对胎儿特异基因甲基化的影响；了解宫内暴露对基因甲基化与生成DNA加合物的关系。 方法： 1.应用现场流行病学的调查方法,对所选择的待产孕妇先进行流行病学调查,并采集孕妇的外周静脉血和新生儿脐带血： 2.用高效液相色谱-荧光色谱法测定孕妇静脉血和脐带血血清AnT、FluA、Pyr、 BaA、BbF、BkF、BaP、DBahA和BghiP共9种PAHs的浓度； 3.采用毛细管电泳-激光诱导荧光检测部分脐血中的BPDE-DNA加合物的浓度； 4.利用LC-MS/MS建立的全基因组甲基化水平分析方法测定相应的脐带血DNA基因组甲基化水平,利用单因素及多元回归的统计方法分析评价宫内暴露对胎儿全基因组甲基化水平的影响； 5.用焦磷酸测序法测定P53、P16特定基因位点甲基化,先后用单因素分析和多元逐步回归的方法分析影响基因甲基化的主要因素； 6.分别用单因素及多元逐步回归模型分析BPDE-DNA加合物与基因组甲基化水平及特异基因P16、P53位点甲基化的关系。 结果： 1.母、脐血清中Pyr的检出率在9种多环芳烃中是最高,其检出率分别是98.9%和95.2%。其余几种PAHs的检出率也多在60%以上,其中BaP的血清负荷水平在母、脐中分别为47.3%和49.7%,检出浓度中位数分别为0.035(P25：0.020,P75:0.072) ng/ml和0.035(P25:0.020,P75:0.095ng/ml)平均浓度分别约为(0.053±0.044) ng/ml和(0.062±0.053) ng/ml.经秩和配对检验,显示脐带血中AnT、Pyr、BaA、BkF、BaP和BghiP的含量均高于相应母血,差异有统计学意义。 2.家庭住宅距离交通主干道比较近的孕妇血清BaP含量比较高(P0.05)。 3.胎儿脐带血中的BPDE-DNA加合物的检出率是86.1%,但脐带血中的BPDE-DNA加合物与孕妇、脐带血血清BaP水平无明显相关。 4.单因素分析结果显示,不同PAHs的种类及不同负荷水平对基因组甲基化的影响各不相同。对于血清BaP和BaA来说,随着血清负荷水平增加,结果表明相应的全基因组甲基化水平受到了影响,呈现减低趋势。对于血清BkF和血清FluA,结果显示其负荷水平与相应的全基因组甲基化呈正相关。另外其他三种PAHs没有发现其负荷水平对甲基化有明显的影响。在排除了其他干扰后的多元回归分析表明,血清BaP和血清BkF仍然能进入回归模型,说明PAHs暴露是基因组甲基化水平发生改变的主要影响因素。 5.单因素分析,发现新生儿的性别和母亲孕期服用叶酸可能会对两种基因的甲基化水平有影响。经对脐带血清AnT、FluA、Pyr、BaA、BbF、BkF、BaP、DBahA和BghiP对基因甲基化水平影响的单因素分析,发现血清BaP水平可能影响P53和P16基因的甲基化水平,负荷组显示的甲基化水平比低负荷组要低,差别有统计学意义。血清BbF和BkF的水平则正好相反,结果显示有增加基因甲基化水平的可能。而血清BghiP、BaA、FluA则在不同的基因、相同基因的不同位点都影响不同。通过多元回归模型的分析,在排除了其他干扰因素后,仍有不同种类的PAHs进入模型。说明PAHs的暴露是影响P53和P16基因甲基化水平改变的主要影响因素。 6.经单因素分析可知,BPDE-DNA加合物与基因组甲基化及P53、P16的位点甲基化水平均有关系。多元逐步回归分析结果显示,基因组甲基化水平与可检测到的BPDE-DNA加合物呈正相关,而P16的位点基因甲基化水平与BPDE-DNA加合物水平呈负相关关系。 7.结果显示,PAHs暴露后,DNA甲基化水平比BPDE-DNA加合物更容易检测的到。 结论： 1.本研究中的孕期妇女体内有一定的PAHs负荷水平,家庭离交通主干道的距离是体内PAHs负荷水平的主要影响因素。室外空气污染可能在PAHs的暴露中起主要作用。 2.母婴体内PAHs负荷存在着相关性,血清BaP可以作为评价PAHs暴露水平的代表物质。 3.证实了PAHs的跨胎盘暴露已造成发育中的胎儿DNA的早期损伤。 4.宫内PAHs的暴露影响了胎儿基因组甲基化状态的改变,不同PAHs对胎儿基因组甲基化状态的影响方式不同。 5.环境低水平的的宫内多环芳烃暴露也会对影响到胎儿P53、P16抑癌基因的甲基化。这种改变有可能会促进基因的其他损伤行为发生而增加胎儿出生以后的患病风险。 6.基因组甲基化与特异位点的甲基化水平均与可检测到的加合物有关。DNA的甲基化与BPDE-DNA加合物的形成之间存在相互促进或抑制作用的可能。
[Abstract]:Objective:
To study the relationship between maternal and infant polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) load levels and the relationship between intrauterine polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) exposure and umbilical cord blood BPDE-DNA adducts, the influence of intrauterine exposure to PAHs on fetal genome methylation, and the influence of intrauterine PAHs exposure on fetal specific gene methylation; and understanding of intrauterine intrauterine methylation The relationship between gene methylation and DNA adducts was revealed.
Method锛，

本文编号：1884451