维生素E和元素Zn对手机辐射暴露损伤的妊娠期大鼠和子代的干预作用及其机理研究

发布时间：2018-05-19 01:37

本文选题：维生素E + 锌　；参考：《山东大学》2012年硕士论文

【摘要】：[目的] 近年来,随着无线电通讯事业的迅猛发展,手机的使用率不断升高,手机电磁辐射问题正日益引起政府和社会各界的广泛关注,成为重大的公共卫生问题。手机通讯时会发射一定波长的电磁波,部分被人体吸收,从而引起一定的机体损伤,尤其孕期的个体及其胎儿处于特殊的时期,对外界有害因素的刺激往往较为敏感,引起母体及胎儿某些生理方面的改变和异常；而适量的维生素E和元素Zn对维持机体正常的生理功能和生长发育具有重要的作用。本研究以孕鼠为模型,通过测量干预组、非干预组孕鼠和新生鼠脑组织中丙二醛(Malondialdehyde MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase SOD)、过氧化物酶(PeroxidasePOD)、乙酰胆碱酯酶(Acetylcholine esterase AChE)、四种氨基酸类神经递质[天冬氨酸(Aspartate Asp)、谷氨酸(Glutamate Glu)、甘氨酸(Glycine Gly)、Y-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid GABA)]、血清中补体C3、补体C4、元素Zn、Fe、Cu的含量,探讨维生素E和元素Zn对手机辐射暴露损伤的妊娠期机体和子代的干预作用及其机理。 [方法] 1.建立动物模型清洁级Wistar大鼠妊娠第0d孕鼠60只,体重270g-310g,购自山东大学实验动物中心。按体重均衡的原则将受孕大鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、VitE低剂量组、VitE中剂量组、VitE高剂量组、VitE+Zn联合干预组,每组10只,单笼饲养。自妊娠第1d起每天上午阴性对照组和阳性对照组孕鼠用不含VitE的花生油1ml/kg灌胃,VitE低、中、高剂量组分别用5mg/ml、15mg/ml、30mg/ml的VitE花生油溶液按lml/kg的剂量灌胃(灌胃之前不空腹),联合干预组用15mg／ml的VitE花生油溶液和10mg/ml的硫酸锌水溶液按1ml/kg的剂量分别灌胃,各组孕鼠灌胃直至自然分娩；灌胃后,将孕鼠自妊娠第1d开始辐射,每次辐射60min,每天辐射3次,直至孕鼠自然分娩,阴性对照组处理同其他各组,只是不将移动电话接通。 2.观察维生素E和元素Zn的干预效果每日观察和记录各组妊娠期大鼠的精神状态、进食多少、排泄、皮毛、活动等情况,每日灌胃前称量记录孕鼠体重。孕鼠正常分娩后,详细记录每只孕鼠分娩的新生鼠个数,观察24h内新生鼠生存状态,检查每只新生鼠早期生长发育状况,包括其尾长、身长以及体重等指标。孕鼠分娩后各实验组随机选取5只孕鼠断头处死取血,并迅速剥离全脑后制成浓度为10%的组织匀浆,每个实验组各随机选取25只24h新生鼠断头处死取血,并迅速剥离全脑组织,制成10%组织匀浆,用试剂盒测定各组孕鼠和新生鼠脑组织中MDA、SOD、POD、AChE的含量；将血液离心后得到血清,测定血清中补体C3、C4的含量；在每组新生鼠中各随机选取25只,连同剩余大鼠断头处死取血,并迅速剥离全脑组织,经适当处理后测定天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、Y-氨基丁酸含量；将血液离心后得到血清,用原子吸收分光光度法测定血清中微量元素(Zn、Fe、Cu)的含量。 [结果] 1.孕鼠和新生鼠生长发育情况肉眼观察孕鼠精神状态良好,进食正常、性情温柔顺从；新生鼠无畸形,皮肤嫩滑粉红,精神状况良好；各组孕鼠在不同孕期的体重比较均无统计学差异(P＞0.05),各组新生鼠个数、新生鼠平均体重、脑重、身长、尾长之间的差异均无统计学意义(P0.05)。 2.维生素E和元素Zn对手机辐射暴露孕鼠和新生鼠脑组织中MDA、SOD、POD和.AChE的干预作用阳性对照组与阴性对照组比较,孕鼠脑组织丙二醛(MDA)含量差异无统计学意义(P0.05),表明手机辐射未能引起孕鼠脑组织MDA含量的增高；VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组比较,孕鼠脑组织丙二醛(MDA)含量显著性降低,差异均有统计学意义(P0.05)。阳性对照组与阴性对照组比较,新生鼠脑组织MDA含量升高,差异有统计学意义(P0.05)；VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组比较,新生鼠脑组织丙二醛(MDA)含量显著性降低,差异均有统计学意义(P0.05);VitE+Zn联合组与VitE中剂量组比较,新生鼠脑组织中MDA含量降低,差异有统计学意义(P0.05)。说明高剂量VitE能抑制由于手机辐射引起的新生鼠脑组织中MDA的升高,以及降低孕鼠脑组织中MDA含量,而且VitE与锌联合应用能增强这种抑制作用,特别对新生鼠效果更为明显。阳性对照组与阴性对照组比较,孕鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力差异无统计学意义(P0.05)；VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组比较,孕鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力显著性较高,差异均有统计学意义(P0.05)。阳性对照组与阴性对照组比较,新生鼠脑组织SOD活力降低,差异有统计学意义(P0.05)；VitE低剂量组、VitE中剂量组、VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组比较,新生鼠脑组织中SOD活力升高,差异均有统计学意义(P0.05)；VitE+Zn联合组与VitE中剂量组比较,孕鼠、新生鼠脑组织中SOD活力升高,差异有统计学意义(P0.05),说明VitE与Zn协同对SOD活力的恢复作用高于单一VitE的作用。阳性对照组与阴性对照组比较,孕鼠脑组织过氧化物酶(POD)活力降低,差异有统计学意义(P0.05),VitE低剂量组、VitE中剂量组、VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与与阳性对照组比较,孕鼠脑组织过氧化物酶(POD)活力升高,差异均有统计学意义(P0.05)。阳性丝对照组与阴性对照组比较,新生鼠脑组织过氧化物酶(POD)活力降低,差异有统计学意义(P0.05),VitE低剂量组、VitE中剂量组、VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与与阳性对照组比较,新生鼠脑组织过氧化物酶(POD)活力升高,差异均有统计学意义(P0.05)。说明低、中、高剂量VitE均能抑制由于手机辐射引起的孕鼠、新生鼠脑组织中过氧化物酶(POD)活力的降低,而VitE与锌联合应用不能增强这种抑制作用。各组孕鼠脑组织中AChE活力比较,差异均无统计学意义(P0.05),表明手机辐射未能引起孕鼠脑组织AChE活力的改变。阳性对照组与阴性对照组比较,新生鼠脑组织中AChE活力升高,差异有统计学意义(P0.05)；VitE中剂量组、VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组比较,新生鼠脑组织AChE活力降低,差异均有统计学意义(P0.05)；VitE中剂量组与VitE+Zn联合组比较,差异无统计学意义(P0.05),说明中、高剂量VitE均能抑制由于手机辐射引起的新生鼠脑组织中AChE活力的升高,而与锌联合应用不能增强这种抑制作用。 3.大鼠脑组织中天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)四种氨基酸类神经递质测定的方法学研究在给定的条件下,大鼠脑组织中四种氨基酸类在10min内分离完全且分离良好,保留时间分别为Asp (3.65min)、Glu (4.34min)、Gly(8.22min)、GABA(9.67min);四种氨基酸类类神经递质在0.1-1μg/ml范围内,线性关系良好(r0.9950)。AsP：Y=1.9122E7X-3.4354E5(r=0.9966),检出限为5.8750×10-10μg/ml,加标回收率为105.6%、100.4%和97.35%,日内精密度RSD日内为3.0%、3.0%和3.9%,日间精密度RSD日间为5.3%、6.4%和5.1%；Glu：Y=1.9122E7X-3.4353E5(r=0.9951),检出限为2.8274×10-10μg/ml,加标回收率为95.36%、97.53%和95.19%,日内精密度RSD日内为1.0%、2.8%和2.9%,日间精密度RSD日间为2.5%、7.0%和5.1%;Gly：Y=2.7782E7X+2.8747E5(r=0.9977),检出限为9.4497×10-10-10μg/ml,加标回收率为95.36%、97.53%和95.19%,日内精密度RSD日内为4.3%、0.9%和1.5%,日间精密度RSD日间为6.7%、5.4%和5.7%;GABA:Y=1.9366X+4.4847E5(r=0.9962),检出限为2.2896×10-10μg/ml,加标回收率为104.7%、107.4%和103.9%,日内精密度RSD日内为3.9%、2.8%和3.8%,日间精密度RSD日间为5.4%、4.3%和6.6%。 4.维生素E和元素Zn对手机辐射暴露孕鼠和新生鼠脑组织中天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(G1y)、γ-氨基丁酸(GABA)四种氨基酸类神经递质含量的干预作用孕鼠脑组织中Asp、Gly、GABA含量各组之间比较均无统计学差异(P＞0.05),表明手机辐射未能引起孕鼠脑组织中3种神经递质含量增高。阳性对照组与阴性对照组比较,孕鼠脑组织Glu含量降低,差异有统计学意义(P0.05);VitE中剂量组、VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组相比,孕鼠脑组织中Glu含量升高,差异均有统计学意义(P0.05),说明VitE对手机辐射引起的Glu降低有拮抗作用,但VitE+Zn联合组与VitE中剂量组未有显著性差异,协同作用不明显。新生鼠脑组织中Asp、Gly、GABA含量各组之间比较均无统计学差异(P0.05),表明手机辐射未能引起新生鼠脑组织中3种神经递质含量的改变；阳性对照组新生鼠脑组织中Glu与阴性对照组比较,含量降低,差异有统计学意义(P0.05)；VitE(?)氐剂量组、VitE中剂量组、VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组比较,新生鼠脑组织中Glu含量升高,差异均有统计学意义(P0.05)。本实验结果与上述孕鼠结果较一致,不同的是低剂量VitE的拮抗作用同样也有显著性。 5.维生素E和元素Zn对手机辐射暴露孕鼠和新生鼠血清补体C3、C4含量的干预作用阳性对照组与阴性对照组相比,孕鼠血清C3含量降低,差异有统计学意义(P0.05)；VitE中剂量组、VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组比较,孕鼠血清C3含量升高,差异均有统计学意义(P0.05)。阳性对照组与阴性对照组相比,孕鼠血清C4含量降低,差异有统计学意义(P0.05);VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组比较,孕鼠血清C4含量升高,差异均有统计学意义(P0.05);VitE+Zn联合组与VitE中剂量组比较,孕鼠血清C4含量升高,差异有统计学意义(P0.05)。说明手机辐射可引起孕鼠血清中C3、C4显著降低,补充中、高剂量VitE后可以使C3、C4含量显著恢复,并且VitE与锌有协同作用。阳性对照组与阴性对照组相比,新生鼠血清C3含量降低,差异有统计学意义(P0.05)；VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组比较,新生鼠血清C3含量升高,差异均有统计学意义(P0.05)；VitE+Zn联合组与VitE中剂量组比较,新生鼠血清C3含量升高,差异有统计学意义(P0.05),实验结果与孕鼠血清中补体的实验结果基本一致。 6.维生素E和元素Zn对手机辐射暴露孕鼠和新生鼠血清Zn、Fe、Cu含量的干预作用阳性对照组与阴性对照组相比,孕鼠与新生鼠血清中Zn含量降低,差异有统计学意义(P0.05)；VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组比较,孕鼠、新生鼠血清中Zn含量升高,差异均有统计学意义(P0.05);VitE+Zn与VitE中剂量组联合组比较,孕鼠、新生鼠血清中Zn含量升高,差异有统计学意义(P0.05)。说明手机辐射可引起孕鼠及新生鼠血清中Zn含量显著降低,补充中、高剂量VitE后可以使Zn含量显著恢复,并且VitE与Zn有协同作用,新生鼠与孕鼠结果较一致,不同的是低剂量VitE对新生鼠Zn含量降低拮抗作用同样也有显著性。各组孕鼠血清中Fe含量相比,差异均无统计学意义(P＞0.05)。阳性对照组与阴性对照组相比,新生鼠血清中Fe含量降低,差异有统计学意义(P0.05),补充VitE及锌后未见明显改善。各组孕鼠血清中Cu含量相比,差异均无统计学意义(P0.05)。阳性对照组与阴性对照组相比,新生鼠血清中Cu含量降低,差异有统计学意义(P0.05),VitE低剂量组、VitE中剂量组、VitE高剂量组、VitE+Zn联合组与阳性对照组新生鼠血清Cu含量比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。说明VitE与锌不能拮抗由于手机辐射引起的新生鼠血清中铁含量的降低。 [结论] 1.维生素E和元素Zn对手机辐射暴露孕鼠体重、精神状况和新生鼠一般生长发育指标未见明显影响。 2.一定剂量维生素E对手机辐射暴露的孕鼠及新生鼠有一定的抗氧化保护作用,元素Zn与维生素E联合作用在受手机辐射暴露孕鼠SOD、新生鼠MDA、SOD变化方面具有显著的干预作用。 3.手机电磁辐射未造成孕鼠脑组织AChE活力的明显改变,但造成新生鼠脑组织AChE活力的明显上升,中、高剂量维生素E对新生鼠脑组织AChE活力上升有一定拮抗作用；维生素E在一定剂量范围内对手机辐射暴露孕鼠及新生鼠脑组织谷氨酸类神经递质的降低也具有干预作用。 4.一定剂量维生素E对手机辐射暴露孕鼠血清补体C3、C4及新生鼠血清C3的降低具有明显的干预作用,其中元素维生素E与Zn联合在保护受手机辐射大鼠补体C4和新生鼠补体C3变化,提高免疫力方面具有显著效应。 5.维生素E与元素Zn对手机电磁辐射造成新生鼠血清Cu、Fe含量的降低不起到干预作用,但对孕鼠和新生鼠血清Zn含量的降低起到明显的保护作用,尤其元素Zn与维生素E的联合干预作用更为显著。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R142

【参考文献】