福氏志贺氏菌2a单克隆抗体的制备及ELISA方法的建立

发布时间：2019-02-09 12:12

【摘要】：为制备特异性和灵敏度较高的抗福氏志贺氏菌2a单克隆抗体,并建立双抗夹心酶联免疫吸附检测法,用于检测生鲜食品中的福氏志贺氏菌2a。本研究利用自制的福氏志贺氏菌2a抗原免疫BALB/c小鼠,并用杂交瘤技术进行细胞融合,经筛选克隆后,获得3株分泌抗福氏志贺氏菌2a单克隆抗体稳定的杂交瘤细胞,分别命名为5C12、1B5和6A11。3株杂交瘤细胞注射进小鼠腹腔后,诱导产生的腹水中抗体的效价为1∶2.048×10~5~1∶1.024×10~5,免疫球蛋白亚型均为IgG。3株抗体识别抗原表位的最佳配对为5C12和6A11,由此建立双抗夹心ELISA体系,测得其灵敏度为1 000 CFU/g,且具有良好的特异性。
[Abstract]:In order to prepare a specific and sensitive monoclonal antibody against Shigella flexneri 2a, a double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa) was established for the detection of Shigella flexneri 2a in fresh food. In this study, BALB/c mice were immunized with 2a antigen of Shigella flexneri and fused with hybridoma technique. After screening and cloning, three hybridoma cells secreting stable monoclonal antibody against Shigella flexneri 2a were obtained. After the hybridoma cells were named 5C12O1B5 and 6A11.3 strain, the titer of antibody in ascites induced by injection into mice was 1: 2.048 脳 10 ~ (12) ~ (5) and 1: 1.024 脳 10 ~ (5) ~ (5), respectively, and the titer of antibody in ascites was 1: 2.048 脳 10 ~ (5). The best pairs of immunoglobulin subtypes were 5C12 and 6A11 for antibody recognition epitopes of IgG.3 strain. The double antibody sandwich ELISA system was established. The sensitivity was 1 000 CFU/g, and the specificity was good.
【作者单位】： 食品质量与安全北京实验室/农产品有害微生物及农残安全检测与控制北京市重点实验室/北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心/微生态制剂关键技术开发北京市工程实验室/北京农学院食品科学与工程学院;
【基金】：北京市属高等学校高层次人才引进与培养长城学者计划项目(CIT&TCD20140315) 北京农学院协同创新建设项目
【分类号】：R155.5

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本文编号：2418944