性激素高效液相色谱检测新方法研究

发布时间：2019-02-12 07:13

【摘要】：性激素具有维持内分泌系统稳定的作用,监测其水平对哺乳动物疾病的预防、诊断、治疗具有极其重要的意义。目前,性激素在畜牧业生产中不规范使用,导致其在畜牧产品和环境水体中的残留。因此,建立准确、简便的性激素检测方法对保障人民生命健康和生态平衡尤为必要。本文研究了17β-雌二醇(BE2)、雌酮(E1)、己烯雌酚(DES)和黄体酮(PES)等性激素的高效液相色谱检测法,主要研究内容如下： 一、超声辅助表面活性剂增强乳化微萃取(UASEME)-高效液相色谱法检测性激素的研究 1.UASEME-HPLC检测环境水体中性激素的研究 以超声辅助表面活性剂增强乳化微萃取环境水中βE2、E1和DES,最佳萃取条件为：2.4x10-6mol/LTriton X-100作为分散剂和乳化剂,50μLCCl4为萃取剂,35kHz、25℃超声5min,4000rpm离心5min,富集倍数达85.29。10-1000ng/mL范围内,线性良好,检测限为0.10-0.20ng/mL,RSD为0.85-1.28%,回收率高于89.82%。此方法明显缩短了萃取时间,提高了富集倍数和萃取效率。 2. UASEME-HPLC检测血液、尿液和牛奶中性激素的研究 以超声辅助表面活性剂增强乳化微萃取生物和牛奶样品中βE2、E1、DES和PES,最佳萃取条件为：1mL乙腈和0.3g MgS04沉淀全血,0.2g Na2SO4沉淀尿液,0.1gNaAc、0.4g MgSO4口0.5mL乙腈重复两次沉淀牛奶。上清液调节pH至7.0,0.8×10-5mol/L Triton X-100为分散剂和乳化剂,80×L CCl4为萃取剂,35kHz、25℃下超声3min,加入0.3g NaCl,4000rpm离心5min,取有机相进样分析。5-1000ng/mL内,βE2、E1和DES线性良好,10-1000ng/mL范围内,PES的线性良好,检测限为0.05-0.50ng/mL,RSD为1.28-3.88%,回收率高于83.2%。此方法能准确、简便地分析血液、尿液和牛奶中的性激素,在临床和食品检测方面具有一定的推广性。 二、超声辅助浊点萃取(UA-CPE)—高效液相色谱法测定尿液中性激素的研究 以Tergitol TMN-6为萃取剂的浊点萃取尿液样品中βE2、E1和DES,最佳萃取条件为：0.5%(v/v)Tergitol TMN-6,35kHz、45℃超声45min,2.0%NaCl,4000rpm离心3min,富集倍数高于78.39。5-1000ng/mL范围内,线性良好,检测限为0.10-0.20ng/mL,回收率高于85.35%,重复检测三天的RSD为0.84-5.15%。此法有效地缩短了萃取时间,提高了萃取效率和稳定性。 三、盐析辅助液液萃取(SA-LLE)—高效液相色谱法检测牛奶中性激素的研究 以乙腈、NaAc和MgSO4盐析辅助液液萃取牛奶中BE2, El、DES和PES,最佳萃取条件为：15mL牛奶样品中,加入6mL酸化乙腈、g NaAc和2.4g MgSO4,10000rpm离心3min,取上清液重复离心一次后调节pH至5.0,加入1mL乙腈,4000rpm离心10min,取乙腈相进样分析。10-5000ng/mL范围内,BE2、E1和DES线性良好,20-8000ng/mL范围内,PES的线性良好,检测限为0.40-2.40ng/mL,RSD为0.3-4.4%,回收率高于95.10%,明显优于液液萃取和蛋白沉淀后再萃取。此法能有效地用于牛奶中性激素残留的检测。
[Abstract]:Sex hormones can maintain the stability of endocrine system. It is very important to monitor the level of sex hormones for the prevention, diagnosis and treatment of mammalian diseases. At present, sex hormones are not standardized in animal husbandry production, resulting in their residues in animal husbandry products and environmental water. Therefore, it is necessary to establish an accurate and simple method for the determination of sex hormone in order to ensure the life and health of the people and the ecological balance. The determination of 17 尾 -estradiol (BE2), estradiol (E1), diethylstilbestrol (DES) and progesterone (PES) by high performance liquid chromatography (HPLC) was studied. Study on Ultrasound-assisted Surfactant Enhancement emulsified Microextraction (UASEME) and High performance liquid Chromatography for determination of Sex hormones in Environmental Water the study of Ultrasound-assisted Surfactant Enhancement Emulsified microextraction environment water 尾 E2, The optimum extraction conditions for E1 and DES, were as follows: 2.4x10-6mol/LTriton X-100 as dispersant and emulsifier, 50 渭 LCCl4 as extractant, 35 kHz ~ (25 鈩，

本文编号：2420193