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烟草烟雾凝集物对BEAS-2B细胞caspase-1及相关炎性细胞因子表达的影响

发布时间:2019-03-30 16:09
【摘要】:目的观察烟草烟雾凝集物CSC(cigarette smoke condensate,CSC)刺激永生化人支气管上皮细胞(Immortalized human bronchial epithelial cells,BEAS-2B),其caspase-1及相关炎性细胞因子的改变。方法分别以终浓度为0 mg/ml(空白对照与DMSO溶剂对照)、0.015 mg/ml(1/4 IC50)、0.03mg/ml(1/2 IC50)及0.06 mg/ml(IC50)的CSC溶液作用于BEAS-2B细胞8、16和24 h,检测caspase-1活性,并用ELISA方法检测细胞内caspase-1活性及含量和细胞培养上清液中IL-1β和IL-18的水平。结果随CSC刺激浓度增加,BEAS-2B细胞抑制率增大,CSC对BEAS-2B细胞的半数抑制浓度约为0.06 mg/ml。不同浓度CSC处理细胞8和16 h后,1/4IC50、1/2IC50与IC50组caspase-1活性和含量以及IL-1β、IL-18水平均高于对照组(P0.05),且随染毒浓度增高而增高(P0.05);不同浓度CSC处理细胞24h后,各染毒组细胞caspase-1活性和含量以及IL-1β、IL-18水平均高于对照组(P0.05),但1/2IC50组与IC50组caspase-1活性及含量差异无统计学意义(P0.05)。结论 CSC处理BEAS-2B细胞可引起caspase-1活化,且IL-1β、IL-18表达水平增高,提示可能存在caspase-1依赖的细胞焦亡(pyroptosis)。
[Abstract]:Aim to observe the changes of caspase-1 and related inflammatory cytokines in immortalized human bronchial epithelial cells (Immortalized human bronchial epithelial cells,BEAS-2B) stimulated by tobacco smoke agglutinin (CSC (cigarette smoke condensate,CSC). Methods BEAS-2B cells were treated with CSC solution of 0 mg/ml (blank control and DMSO solvent control), 0.015 mg/ml (1? 4 IC50), 0.03mg/ml (1? 2 IC50) and 0.06 mg/ml (IC50) for 8, 16 and 24 h, respectively. The activity of caspase-1 was detected, and the activity and content of caspase-1 in the cells and the levels of IL-1 尾 and IL-18 in the supernatant of cell culture were detected by ELISA method. Results with the increase of CSC concentration, the inhibition rate of BEAS-2B cells increased, and the half inhibitory concentration of CSC on BEAS-2B cells was about 0.06 mg/ml.. After 8 and 16 hours of treatment with different concentrations of CSC, the activity and content of caspase-1 and the levels of IL-1 尾 and IL-18 in the groups treated with 1? 4IC _ (50), 1 ~ (2) IC _ (50) and IC50 were higher than those in the control group (P0.05), and increased with the increase of the concentration (P0.05). After treated with different concentrations of CSC for 24 hours, the activity and content of caspase-1 and the levels of IL-1 尾 and IL-18 in each group were higher than those in the control group (P0.05). But there was no significant difference in caspase-1 activity and content between 1/2IC50 group and IC50 group (P0.05). Conclusion CSC can induce the activation of caspase-1 and increase the expression of IL-1 尾 and IL-18 in BEAS-2B cells, suggesting that there may be caspase-1 dependent (pyroptosis). In focal death.
【作者单位】: 郑州大学公共卫生学院;郑州大学医学检验系;
【基金】:国家自然科学基金(81172717)
【分类号】:R114

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