氟化钠诱导氧化应激促进大鼠子宫组织炎症反应及其作用机制
发布时间：2019-10-10 23:25
【摘要】：目的通过对氟化钠染毒大鼠的炎症反应相关因子及关键信号通路分子的检测,探讨其对大鼠子宫组织细胞氧化损伤的作用机制。方法将30只雌性SD成年大鼠分为3组(10只/组),分别给予蒸馏水(对照组)、100 mg/L氟化钠溶液(100 mg/L氟化钠处理组)、200 mg/L氟化钠溶液(200 mg/L氟化钠处理组)饮用,持续染毒180 d,建立氟化钠染毒动物模型。采用Western blot、免疫组织化学法检测子宫组织炎症相关因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表达;采用ELISA对氧化应激相关分子ROS、MDA、SOD、CAT、GSH进行检测;采用Western blot测定P38、ERK、JNK、PI3K活性物质的表达。结果 2个氟化钠处理组大鼠子宫组织炎症相关因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表达量明显高于对照组(P0.05);2个氟化钠处理组ROS、SOD、CAT、GSH明显高于对照组,而MDA明显低于对照组(P0.05);与对照组相比,2个氟化钠处理组P38、JNK蛋白磷酸化效率增加(P0.05),而且ERK、PI3K总蛋白及磷酸化蛋白表达水平均有增加。结论氟化钠可诱导大鼠子宫组织的氧化应激,促进炎症反应发生,MAPK(ERK、JNK、P38)和PI3K信号通路可能参与其中。
【图文】：
MDA、SOD、CAT、GSH水平为探索氧化应激是否参与了氟化钠所导致的大鼠子宫组织炎症反应，我们对氧化损伤指标ＲOS、MDA和抗氧化损伤指标SOD、CAT、GSH进行了检测。大鼠子宫组织处理方法同1．3所述，上清液送上海研辉生物科技有限公司用ELISA检测ＲOS、MDA、SOD、CAT、GSH水平。1．7统计学分析采用SPSS17．0统计软件进行统计学分析，行单因素方差分析，统计图利用GraphPadPrism5．0软件绘制。2结果2．1模型验证动物血清及子宫组织中的氟离子浓度测定结果显示，氟化钠处理组氟离子浓度明显高于对照组(P＜0.05，图1)，表明模型建立成功。2．2氟化钠处理导致大鼠子宫组织发生炎症反应100mg/L、200mg/L氟化钠处理组大鼠子宫组织炎症相关因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表达水平均明显高于对照组(P＜0．05，图2)。进一步用免疫组化检测Cox-2、ICAM-1的表达及分布，结果发现氟化钠处理组Cox-2、ICAM-1广泛表达于子宫基质中，而对照组未见明显阳性表达(图3)。1:对照组;2:100mg/L氟化钠处理组;3:200mg/L氟化钠处理组图1离子选择电极法测定血清(A)和子宫(B)中的氟离子浓度1:对照组;2:100mg/L氟化钠处理组;3:200mg/L氟化钠处理组A、B:Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β蛋白Westernblot检测结果;C:半定量分析结果a:P＜0．05，与对照组比较图2Westernblot检测大鼠子宫组织炎症相关因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β的表达1746第37卷第17期2015年9月15日第三军医大学学报JThirdMilMedUnivVol．37，No．17Sep．152015
2．3氟化钠处理引起大鼠子宫组织氧化-抗氧化系统失衡与对照组相比，氟化钠处理导致大鼠子宫组织ＲOS及抗氧化酶类SOD、CAT、GSH明显增高(图4A～D，P＜0．05)。进一步对脂质过氧化物MDA的水平进行了检测，与对照组相比，，100mg/L氟化钠处理组与200mg/L氟化钠处理组MDA水平都明显降低(P＜0.05，图4E)。结果证实，氟化钠处理导致大鼠子宫组织产生大量过氧化物，同时，也激发机体产生大量的抗氧化物质，打破了机体氧化系统与抗氧化系统之间的平衡。ge:腺上皮;le:腔上皮;sc:基质细胞↑:示棕色为阳性表达图3免疫组化检测Cox-2、ICAM-1在子宫组织的表达及分布(S-P)A:ＲOS;B:SOD;C:CAT;D:GSH;E:MDA1:对照组;2:100mg/L氟化钠处理组;3:200mg/L氟化钠处理组图4ELISA检测各组子宫组织氧化应激指标变化1747第37卷第17期2015年9月15日第三军医大学学报JThirdMilMedUnivVol．37，No．17Sep．152015
【作者单位】： 重庆医科大学公共卫生与管理学院生殖生物学研究室;
【基金】：重庆市地质矿产勘探开发局项目(渝地勘科字[2010]第2号) 国家自然科学基金面上项目(30973195)~~
【分类号】：R114
【图文】：
MDA、SOD、CAT、GSH水平为探索氧化应激是否参与了氟化钠所导致的大鼠子宫组织炎症反应，我们对氧化损伤指标ＲOS、MDA和抗氧化损伤指标SOD、CAT、GSH进行了检测。大鼠子宫组织处理方法同1．3所述，上清液送上海研辉生物科技有限公司用ELISA检测ＲOS、MDA、SOD、CAT、GSH水平。1．7统计学分析采用SPSS17．0统计软件进行统计学分析，行单因素方差分析，统计图利用GraphPadPrism5．0软件绘制。2结果2．1模型验证动物血清及子宫组织中的氟离子浓度测定结果显示，氟化钠处理组氟离子浓度明显高于对照组(P＜0.05，图1)，表明模型建立成功。2．2氟化钠处理导致大鼠子宫组织发生炎症反应100mg/L、200mg/L氟化钠处理组大鼠子宫组织炎症相关因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表达水平均明显高于对照组(P＜0．05，图2)。进一步用免疫组化检测Cox-2、ICAM-1的表达及分布，结果发现氟化钠处理组Cox-2、ICAM-1广泛表达于子宫基质中，而对照组未见明显阳性表达(图3)。1:对照组;2:100mg/L氟化钠处理组;3:200mg/L氟化钠处理组图1离子选择电极法测定血清(A)和子宫(B)中的氟离子浓度1:对照组;2:100mg/L氟化钠处理组;3:200mg/L氟化钠处理组A、B:Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β蛋白Westernblot检测结果;C:半定量分析结果a:P＜0．05，与对照组比较图2Westernblot检测大鼠子宫组织炎症相关因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β的表达1746第37卷第17期2015年9月15日第三军医大学学报JThirdMilMedUnivVol．37，No．17Sep．152015
2．3氟化钠处理引起大鼠子宫组织氧化-抗氧化系统失衡与对照组相比，氟化钠处理导致大鼠子宫组织ＲOS及抗氧化酶类SOD、CAT、GSH明显增高(图4A～D，P＜0．05)。进一步对脂质过氧化物MDA的水平进行了检测，与对照组相比，，100mg/L氟化钠处理组与200mg/L氟化钠处理组MDA水平都明显降低(P＜0.05，图4E)。结果证实，氟化钠处理导致大鼠子宫组织产生大量过氧化物，同时，也激发机体产生大量的抗氧化物质，打破了机体氧化系统与抗氧化系统之间的平衡。ge:腺上皮;le:腔上皮;sc:基质细胞↑:示棕色为阳性表达图3免疫组化检测Cox-2、ICAM-1在子宫组织的表达及分布(S-P)A:ＲOS;B:SOD;C:CAT;D:GSH;E:MDA1:对照组;2:100mg/L氟化钠处理组;3:200mg/L氟化钠处理组图4ELISA检测各组子宫组织氧化应激指标变化1747第37卷第17期2015年9月15日第三军医大学学报JThirdMilMedUnivVol．37，No．17Sep．152015
【作者单位】： 重庆医科大学公共卫生与管理学院生殖生物学研究室;
【基金】：重庆市地质矿产勘探开发局项目(渝地勘科字[2010]第2号) 国家自然科学基金面上项目(30973195)~~
【分类号】：R114
【参考文献】
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1 黄志斐;张U
本文编号：2547360
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