硫化氢对甲醛诱导大鼠海马铁死亡的拮抗作用

发布时间：2020-07-15 04:44

【摘要】：【研究背景与目的】甲醛(formaldehyde,FA)是一种有毒性气体,已经证实当甲醛在体内代谢失衡时,容易引起大脑组织氧化受损,诱导神经毒性。硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)是一种具有抗氧化作用的内源性气体分子,具有抗氧化和保护神经的作用。铁死亡(ferroptosis)是一种氧化型细胞死亡方式,与多种神经变性疾密切相关。本文将探讨硫化氢是否可拮抗甲醛诱导的大鼠海马铁死亡,为甲醛的神经毒性的防治提供新思路。【方法】1.Western blotting检测大鼠海马组织中谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione-dependent antioxidant enzyme glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达;2.酶联免疫吸附法(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测大鼠海马组织中谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-Hydroxynonenal,4-HNE)的含量;3.C11-BODIPY染色流式细胞术检测大鼠海马组织中脂质活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平;4.Calcein-acetoxymethlester(Ca-AM)染色流式细胞仪检测大鼠海马组织中Fe~(2+)含量;5.透射电镜观察大鼠海马组织CA3区线粒体平均横切面的大小;【结果】1.甲醛诱导大鼠海马铁死亡的作用大鼠通过侧脑室微量注射2.5μL不同浓度的FA,连续7天后,取海马进行检测:1.1 Elisa法检测大鼠海马组织中GSH、MDA、4HNE含量,结果显示FA(0.1,1,10μM)呈浓度依赖性的降低组织GSH水平和增加MDA、4HNE的含量;1.2 Western blotting检测海马组织中GPX4的水平,结果显示FA(0.1,1,10μM)呈浓度依赖性降低GPX4水平的表达;1.3染色流式检测海马组织中脂质ROS、Fe~(2+)含量,结果显示FA(10μM)可显著增加海马脂质ROS以及Fe~(2+)含量;1.4透射电镜检测海马CA3区内线粒体平均横切面积的大小,结果显示FA(10μM)可明显缩小线粒体平均横切面积;2.硫化氢对甲醛诱导大鼠海马铁死亡的拮抗作用大鼠通过腹腔注射H_2S供体NaHS(10,30,100μmol/kg)7 h后,再通过侧脑室微量注射2.5μL的FA(1μM),连续给药7 d后,取海马组织进行如下检测:2.1 Elisa法检测大鼠海马组织GSH、MDA、4HNE含量,结果显示NaHS(10,30,100μmol/kg)可拮抗FA(1μM)诱导的海马组织GSH水平的降低和MDA、4HNE含量的增加;2.2 Western blotting检测海马组织GPX4水平,结果显示NaHS(10,30,100μmol/kg)可逆转FA(1μM)导致的海马组织GPX4水平的降低;2.3染色流式术检测海马组织ROS、Fe~(2+)含量,结果显示NaHS(10,30,100μmol/kg)可减少FA(1μM)诱导的海马组织ROS以及Fe~(2+)含量的增多;2.4透射电镜观察海马CA3区线粒体平均横切面积的大小,结果显示NaHS(30,100μmol/kg)可明显逆转FA(1μM)引起的海马组织线粒体平均横切面积的缩小;【结论】硫化氢可拮抗甲醛诱导大鼠海马铁死亡
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R114
【图文】：

第 3 章 结果导大鼠海马铁死亡诱导大鼠海马脂质 ROS 水平的升高作为铁依赖和氧化形式的细胞死亡方式，目前研究与脂质 ROS 相关，细胞中脂质 ROS 的积累是诱发了探讨甲醛是否可引起海马发生铁死亡，我们首先术检测大鼠海马脂质 ROS 水平，结果如图 3.1 所示7 天后，大鼠海马脂质 ROS 水平增加。

图 3.2 流式细胞术检测 FA 对大鼠海马 Fe2+水平的影响大鼠给予 2.5 μL 的 FA(0.1, 1, 10 μM，i .c.v.) 处理 7 d 后，取海马组织制成细胞悬液，Calcein-AM染色流式细胞术检测海马 Fe2+水平。3.1.3 FA 诱导大鼠海马抗氧化力降低铁死亡作为一种氧化型的死亡方式，其在生化方面主要是谷胱甘肽(γ-glutamylcysteinylglycine ， GSH) 耗竭，谷胱甘肽过氧化物酶 4(glutathioneperoxidase 4，GPX4) 活性下降，细胞抗氧化能力下降，脂质过氧化反应增加，引起细胞死亡。有研究发现当 GSH 的合成或 GPX4 活性水平在体内外抑制时，即可触发铁死亡[21, 22]。之后为了明确甲醛对大鼠海马组织抗氧化能力的影响，我们使用Elisa 法和 Western blotting 法分别检测大鼠海马 GSH 的含量和 GPX4 活性水平。结果如 3.3 所示，0.1、1、10 μM 的 FA 处理大鼠后，大鼠海马组织 GSH 的含量均明显下降（图 3.3A）；FA 在 1、10 μM 时可明显减少 GPX4 的表达，而 0.1 μM 的 FA对其没有明显的影响（图 3.3 B）。这些结果说明甲醛可降低大鼠海马组织的抗氧化能力。

图 3.2 流式细胞术检测 FA 对大鼠海马 Fe2+水平的影 FA(0.1, 1, 10 μM，i .c.v.) 处理 7 d 后，取海马组织制成细测海马 Fe2+水平。大鼠海马抗氧化力降低为一种氧化型的死亡方式，其在生化方面主inylglycine ， GSH) 耗竭，谷胱甘肽过氧化物PX4) 活性下降，细胞抗氧化能力下降，脂质过氧化究发现当 GSH 的合成或 GPX4 活性水平在体内外之后为了明确甲醛对大鼠海马组织抗氧化能力的rn blotting 法分别检测大鼠海马 GSH 的含量和 GP0.1、1、10 μM 的 FA 处理大鼠后，大鼠海马组织A）；FA 在 1、10 μM 时可明显减少 GPX4 的表达影响（图 3.3 B）。这些结果说明甲醛可降低大鼠海

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 刘志刚;聂玉芝;刘琴;;沙苑子对运动大鼠海马氨基酸类神经递质代谢的调控作用[J];中国体育科技;2017年02期

2 郭蓉;曹云鹏;;雌激素对大鼠海马β淀粉样蛋白的清除作用[J];中国老年学杂志;2010年18期

3 章翔,姬西团,费舟,林绿标,赵明,曹锐蜂,王西玲,程光,梁景文;人与大鼠海马血管构筑的观察(英文)[J];中华神经外科疾病研究杂志;2004年03期

4 邓医宇,曾红科,田代实,张苏明,阮旭中;诱导型一氧化氮合酶在血管性痴呆大鼠海马中的表达[J];中华急诊医学杂志;2004年09期

5 杨勤,庄宗杰,程昊,马启玲,杨里福;碘缺乏大鼠海马NO含量及NOS活性的研究[J];贵阳医学院学报;2003年01期

6 阎淑枝;用HRP法对大鼠海马一些传入纤维的观察[J];第三军医大学学报;1988年06期

7 高晓克,王静明,罗质璞;重复注射安定对大鼠海马、蓝斑、背侧中缝核自发电活动和行为的影响[J];中国药理学与毒理学杂志;1988年01期

8 张樟进,张可仁,王国明,马菊芬;大鼠海马结构内生长抑素样神经元的衰老变化[J];西安交通大学学报(医学版);1988年04期

9 余朝阳,区英琦,许世彤;在饮水条件反射中大鼠海马CA_3区突触效应的变化[J];动物学研究;1989年04期

10 易立,许世彤,区英琦;大鼠海马CA_3区的习得性长时程突触增强[J];生理学报;1989年03期

相关会议论文 前10条

1 彭代银;蔡标;汪远金;;大豆异黄酮对阿尔茨海默病模型大鼠海马乙酰胆碱代谢的影响[A];中华中医药学会中药实验药理分会2012年学术年会论文摘要汇编[C];2012年

2 朱泽华;王彦青;吴根诚;;电针对皮质酮诱导大鼠海马损伤的作用研究[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年

3 雍政;颜玲娣;周培岚;高翔;宫泽辉;;噻吩诺啡对大鼠海马区突触可塑性的影响[A];第十五届中国神经精神药理学学术会议论文摘要[C];2012年

4 李茂进;谢林;胡俊峰;李国珍;;天麻对铅所致大鼠海马损害的拮抗作用[A];山东预防医学会首届学术年会资料汇编[C];2003年

5 史艳红;徐平;宋凯英;潘成玉;;阻塞性睡眠呼吸暂停综合征大鼠海马损害及其机制的研究[A];贵州省第六届中西医结合神经科学术年会论文汇编[C];2013年

6 张日辉;刘宇;韩忠媛;;运动性疲劳对大鼠海马谷氨酸含量及学习记忆的影响[A];2007全国运动生理学论文报告会论文集[C];2007年

7 戴薇薇;金国琴;张学礼;赵伟康;;左旧丸、右旧丸对老年大鼠海马、杏仁核氨基酸类神经递质含量变化的影响[A];第七次全国中西医结合虚证与老年病学术会议论文摘要集[C];2003年

8 魏丽;彭瑞云;王丽峰;王水明;高亚兵;马俊杰;苏镇涛;;S波段HPM辐射对大鼠海马组织形态结构的影响及神经递质含量的变化[A];第六届全国生物医学体视学学术会议暨第九届全军军事病理学学术会议、第五届全军定量病理学学术会议论文汇编[C];2005年

9 娄淑杰;陈秀恩;陈佩杰;;运动对脑缺血再灌注大鼠海马表达BDNF、VEGF和KDR mRNA水平的影响[A];第八届全国体育科学大会论文摘要汇编（一）[C];2007年

10 蒲天强;蒋国会;王晓明;;低频重复经颅磁刺激对大鼠海马电活动的影响[A];第十一次中国中西医结合神经科学术会议论文汇编[C];2015年

相关重要报纸文章 前2条

1 ;电针能激活老年痴呆大鼠海马蛋白激酶信号通路[N];中国中医药报;2005年

2 晋志高 景向红;针刺对糖尿病脑病大鼠海马细胞色素氧化酶的影响[N];中国中医药报;2004年

相关博士学位论文 前10条

1 程威;新生鼠隔离对PTSD大鼠海马和杏仁核神经元突触可塑性机制影响的研究[D];中国医科大学;2019年

2 李静静;基于代谢组学探究运动上调糖尿病大鼠海马突触可塑相关蛋白表达的可能机制[D];上海体育学院;2018年

3 安雅臣;缺血预处理、缺血再灌注损伤大鼠海马microRNAs表达谱的变化及阿托伐他汀的干预作用[D];天津医科大学;2018年

4 胡晓宇;谷氨酸及其受体在镧所致学习记忆损伤中的作用及相关机制研究[D];中国医科大学;2018年

5 胡新颖;电项针对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡和自噬相关蛋白表达的影响[D];黑龙江中医药大学;2018年

6 张韧;石甘散对戊四氮致痫大鼠行为学表现及海马神经元细胞凋亡相关基因及蛋白表达的影响[D];黑龙江中医药大学;2018年

7 何慕兰;MSCs来源的IL-6通过gp130/AMPK/mTOR通路抑制新生HIBD大鼠海马星形胶质细胞增殖的机制研究[D];重庆医科大学;2018年

8 肖倩;抑郁症模型大鼠海马内新生神经元和少突胶质前体细胞的改变及跑步锻炼对其作用的研究[D];重庆医科大学;2018年

9 冯寅;孤啡肽在针刺抗实验性癫痫中的作用及可能机制[D];复旦大学;2004年

10 杜会枝;乙酰胆碱酯酶抑制剂和金属离子对大鼠海马细胞膜离子通道的作用研究[D];山西大学;2006年

相关硕士学位论文 前10条

1 唐敏;抑郁/焦虑敏感性相关的大鼠海马蛋白质组差异分析[D];重庆医科大学;2019年

2 杨春茂;抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马和白质体积的作用以及海马内少突胶质细胞作用的研究[D];重庆医科大学;2019年

3 武泽惠;电针对拟血管性痴呆大鼠海马JNK信号通路的影响[D];河北中医学院;2019年

4 李小亮;醒脑静对SAH大鼠海马区神经细胞自噬的影响[D];华北理工大学;2019年

5 易林;慢性应激诱导大鼠海马神经炎症：涉及海马能量代谢紊乱[D];南华大学;2019年

6 刘蓉;硫化氢对甲醛诱导大鼠海马铁死亡的拮抗作用[D];南华大学;2019年

7 唐慧玲;海马Warburg效应介导硫化氢对帕金森病大鼠海马小胶质细胞极化及其抑郁样行为的调控作用[D];南华大学;2019年

8 徐小琴;OSAS大鼠海马组织中GFAP的表达变化及其机制研究[D];遵义医科大学;2019年

9 王晶;苯并[a]芘暴露大鼠海马组织中microRNA表达谱的研究[D];重庆医科大学;2018年

10 谢保弟;腧穴“解郁方”对抑郁大鼠海马影响的观察[D];山西中医药大学;2017年

本文编号：2756000