染锰大鼠脱锰后运动功能恢复及其机制初探
发布时间：2020-08-09 09:58
【摘要】：目的:研究染锰大鼠脱锰5个月后运动功能、记忆能力、PARK2/Parkin表达水平和多巴胺能神经元数量变化情况。方法:60只SPF级健康成年雄性SD大鼠(6周龄,160-180g)随机分为对照组(生理盐水)、1mg/kg Mn~(2+)组和5mg/kg Mn~(2+)组,每组20只。清晨对大鼠腹腔注射锰溶液,隔天1次,一个月后,每组随机抽取10只大鼠进行转棒实验和Y迷宫实验,分别检测其运动和记忆功能。随后取其中7只大鼠用戊巴比妥钠麻醉后取全血,石墨炉原子吸收仪检测全血中锰浓度,实时荧光定量聚合酶链式反应检测全血中PARK2mRNA表达水平;然后取脑,分离中脑和纹状体,石墨炉原子吸收仪测各脑区锰浓度,实时荧光定量聚合酶链式反应测各脑区PARK2 mRNA表达水平,蛋白印迹法检测各脑区Parkin表达水平;剩余3只大鼠戊巴比妥钠麻醉后用多聚甲醛灌注,免疫组化检测多巴胺能神经元数量。各组余下10只大鼠停止染锰,继续常规饲养5个月后操作同前。期间每月对大鼠乙醚麻醉后取内眦静脉血用实时荧光定量聚合酶链式反应动态追踪血液中PARK2 mRNA表达水平变化情况。结果:与染锰1月时相比,脱锰5个月后5mg/kg Mn~(2+)组大鼠纹状体及血锰浓度下降(t_(纹状体)=4.54,t_(全血)=13.27,P0.05),但中脑和纹状体锰浓度仍高于对照组(F_(中脑)=112.60,F_(纹状体)=9.75,P0.05);大鼠转棒距离增加(t=2.12,P0.05);脑内多巴胺能神经元数量增加,细胞树突明显增多,细胞形态较前饱满,但胞浆染色性欠佳。与染锰1月时相比,脱锰1月后,染锰组大鼠血PARK2 mRNA表达水增加(P0.05)。与染锰1月时相比,脱锰5个月后5mg/kg Mn~(2+)组大鼠纹状体PARK2 mRNA表达水平增加(t=-4.22,P0.05)且大鼠中脑、纹状体Parkin表达量也增加(F_(中脑)=0.52、F_(纹状体)=1.66,P0.05)。结论:1.染锰大鼠脱离锰暴露5个月后,5mg/kg Mn~(2+)组大鼠受损运动功能恢复;2.PARK2 mRNA/Parkin水平降低可能是锰致中枢神经系统中毒的作用机制之一。
【学位授予单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R114
【图文】：
遵义医科大学硕士学位论文 曹玉民中脑锰浓度增加 73.85％，纹状体锰浓度增加 282.98%，1 mg/kg Mn2+组大鼠血锰浓度增加 27.78%，中脑锰浓度增加 46.15%，纹状体锰浓度增加 91.49%。
图 2 大鼠转棒实验及 Y 迷宫实验Fig.2 rod experiment and Y maze experiment of rats注：数据用(x±S，n=10）表示。*与同月对照组比较 P<0.05；a与染锰 1 个月 5mg/kg Mn2+组比较 P<0.05。表 2 染锰 1 个月及脱锰 5 个月大鼠转棒实验转棒距离、转棒速度及转棒时间比较（ x±s）Tab.2 The compare of rats' rotation distance, average speed and time of rod experimentbetween manganese exposure 1 month and manganese removed 5 month（ x±s）Rotation distance(cm) Rotation speed(cm/s) Rotation time(s)manganeseexposure 1monthmanganeseremoved 5 monthmanganeseexposure 1monthmanganeseremoved 5monthmanganeseexposure 1monthmanganeseremoved 5month1547.09±192.53 1299.14±102.51 25.20±1.74 24.00±0.90 217.2±14.64 198.80±8.78
遵义医科大学硕士学位论文 曹玉民染锰 1 个月，与对照组比较，锰暴露组大鼠黑质（部分基底神经节）内的 DAN丢失明显（F=199.97，P<0.05）。在 1mg/kg Mn2+组中，黑质中 DAN 减少了 41.27％，而在 5mg/kg Mn2+组中，DAN 丢失高达 76.56％。此外，锰暴露后细胞树突长度变短，细胞形态饱满性欠佳，部分呈固缩状，胞体凸起减少，胞浆染色性欠佳，胞核明显缩小。脱锰 5 个月，锰暴露组中的黑质（部分基底神经节）内的 DAN 数量较染锰 1 月时增加，但 5mg/kg Mn2+组大鼠 DAN 数量仍低于对照组（F=9.43，P<0.05）。与对照组相比，1mg/kg Mn2+组大鼠黑质中的 DAN 仅降低 20.83％，5mg/kg Mn2+组大鼠黑质中的 DAN 仅丢失 22.41％。细胞树突较染锰 1 月时明显增多，细胞形态整体较染锰 1 月时饱满，仍有部分呈固缩状，胞体凸起减少，但 5mg/kg Mn2+组 DAN 浆染色性欠佳，胞核缩小。
【学位授予单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R114
【图文】：
遵义医科大学硕士学位论文 曹玉民中脑锰浓度增加 73.85％，纹状体锰浓度增加 282.98%，1 mg/kg Mn2+组大鼠血锰浓度增加 27.78%，中脑锰浓度增加 46.15%，纹状体锰浓度增加 91.49%。
图 2 大鼠转棒实验及 Y 迷宫实验Fig.2 rod experiment and Y maze experiment of rats注：数据用(x±S，n=10）表示。*与同月对照组比较 P<0.05；a与染锰 1 个月 5mg/kg Mn2+组比较 P<0.05。表 2 染锰 1 个月及脱锰 5 个月大鼠转棒实验转棒距离、转棒速度及转棒时间比较（ x±s）Tab.2 The compare of rats' rotation distance, average speed and time of rod experimentbetween manganese exposure 1 month and manganese removed 5 month（ x±s）Rotation distance(cm) Rotation speed(cm/s) Rotation time(s)manganeseexposure 1monthmanganeseremoved 5 monthmanganeseexposure 1monthmanganeseremoved 5monthmanganeseexposure 1monthmanganeseremoved 5month1547.09±192.53 1299.14±102.51 25.20±1.74 24.00±0.90 217.2±14.64 198.80±8.78
遵义医科大学硕士学位论文 曹玉民染锰 1 个月，与对照组比较，锰暴露组大鼠黑质（部分基底神经节）内的 DAN丢失明显（F=199.97，P<0.05）。在 1mg/kg Mn2+组中，黑质中 DAN 减少了 41.27％，而在 5mg/kg Mn2+组中，DAN 丢失高达 76.56％。此外，锰暴露后细胞树突长度变短，细胞形态饱满性欠佳，部分呈固缩状，胞体凸起减少，胞浆染色性欠佳，胞核明显缩小。脱锰 5 个月，锰暴露组中的黑质（部分基底神经节）内的 DAN 数量较染锰 1 月时增加，但 5mg/kg Mn2+组大鼠 DAN 数量仍低于对照组（F=9.43，P<0.05）。与对照组相比，1mg/kg Mn2+组大鼠黑质中的 DAN 仅降低 20.83％，5mg/kg Mn2+组大鼠黑质中的 DAN 仅丢失 22.41％。细胞树突较染锰 1 月时明显增多，细胞形态整体较染锰 1 月时饱满，仍有部分呈固缩状，胞体凸起减少，但 5mg/kg Mn2+组 DAN 浆染色性欠佳，胞核缩小。
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本文编号：2786957
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