叶菜中叶酸含量的HPLC测定条件优化及不同处理方式对叶酸保留效果研究
本文关键词:叶菜中叶酸含量的HPLC测定条件优化及不同处理方式对叶酸保留效果研究,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:叶酸是人体在利用糖分和氨基酸时的必要物质,是机体细胞生长和繁殖所必需的物质,它对人体的健康作用日益被人们所认识。本文以常见的叶菜类蔬菜菠菜、生菜、白菜等为试材,研究高相液相色谱法测定叶酸条件以及不同处理方式下叶酸含量,得出如下结论:1.试验中通过对液相条件流动相、流速、柱温、波长等条件的优化,确定了高效液相色谱法测定叶菜中叶酸以及五甲基四氢叶酸的检测方法。液相条件为:流速0.4ml/min;进样量20μL;检测波长285nm;柱温25℃;梯度洗脱条件:0min-5min6%乙腈+94%磷酸盐缓冲液;5min-25min由原始比例线性变化到25%乙腈+75%磷酸盐缓冲液,渐变得到该比例后维持2min,在27min-28min流动项比例线性变回原始的浓度比例。验证试验表明该方法具有灵敏度高,准确度好,线性范围宽(r0.9996)的特点。2.对叶酸的提取进行了单因素试验和正交试验。单因素主要研究提取温度、提取时间、料液比、提取次数对提取量的影响。由正交试验得出最佳的叶酸提取条件是:温度为90℃,提取时间为10min,料液比为1:5,提取次数为3次。该提取工艺比较简单,提取率达到97%。3.通过研究三种处理方式(清炒、水煮、鲜切)下八种蔬菜:菠菜、小白菜、大白菜、甘蓝、紫甘蓝、生菜、青菜、油麦菜中叶酸含量,得出叶菜在日常生活中最佳食用方式。保留率依次为:清炒(55.66±5.30)%、水煮(63.77±4.88)%、鲜切(83.275±2.45)%,变异系数分别为:7.65、9.52、2.94。由此可见鲜切较其他两种方式对叶酸保留效果更佳,鲜切作为新兴的即食蔬菜加工方式会成为一种新的时尚。在室温和4℃贮藏,后者叶酸保留效果较好。在贮藏前两天,4℃贮藏中叶酸降低慢,但是在两天之后降低较快,所以新鲜蔬菜买回来不食用时应该存放在4℃条件下才能更好吸收利用蔬菜中含有的叶酸,白菜除外,宜在两天内食用。
【关键词】:叶菜 叶酸 HPLC 处理方式
【学位授予单位】:西北农林科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R151.3;O657.72
【目录】:
- 摘要5-6
- ABSTRACT6-11
- 第一章 文献综述11-19
- 1.1 引言11-14
- 1.1.1 叶菜在消费饮食中的地位11-12
- 1.1.2 叶酸简介12-14
- 1.2 叶酸生理活性研究进展14
- 1.2.1 叶酸的代谢14
- 1.2.2 叶酸的功能14
- 1.3 叶酸测定方法研究进展14-17
- 1.3.1 微生物法15
- 1.3.2 紫外分光光度法15
- 1.3.3 荧光分析15
- 1.3.4 高效液相色谱法15-17
- 1.4 加工方式对叶酸含量的影响17
- 1.5 本课题研究的目的意义17-18
- 1.6 本课题主要研究内容18-19
- 1.6.1 高效液相法测定叶菜中叶酸含量18
- 1.6.2 对叶酸的提取条件进行优化研究18
- 1.6.3 研究不同处理方式以及贮藏对叶酸含量的影响18-19
- 第二章 高效液相色谱法测定叶酸含量19-30
- 2.1 材料19-20
- 2.1.1 供试材料19
- 2.1.2 试剂19
- 2.1.3 仪器与设备19-20
- 2.2 方法20-22
- 2.2.1 色谱条件20
- 2.2.2 标准溶液配制20
- 2.2.3 样品制备20
- 2.2.4 叶酸的定性定量分析20-21
- 2.2.5 检测限和定量限21
- 2.2.6 回收试验21
- 2.2.7 精密度试验21
- 2.2.8 稳定性试验21
- 2.2.9 质量控制21-22
- 2.3 结果与分析22-29
- 2.3.1 色谱条件的选择22-25
- 2.3.2 定性定量分析25-27
- 2.3.3 测定方法的验证27-29
- 2.4 讨论29
- 2.5 小结29-30
- 第三章 提取条件优化研究30-38
- 3.1 材料30-31
- 3.1.1 供试材料30
- 3.1.2 试剂30-31
- 3.1.3 仪器与设备31
- 3.2 方法31-33
- 3.2.1 提取工艺31
- 3.2.2 提取工艺操作要点31
- 3.2.3 色谱条件31-32
- 3.2.4 菠菜中叶酸HPLC测定方法32
- 3.2.5 叶酸以及五甲基四氢叶酸提取因素试验设计32-33
- 3.3 结果与分析33-36
- 3.3.1 提取时间的对提取效果的影响33
- 3.3.2 提取温度对提取效果的影响33-34
- 3.3.3 料液比对提取效果的影响34-35
- 3.3.4 提取次数对提取效果的影响35
- 3.3.5 正交试验35-36
- 3.4 讨论36-37
- 3.5 小结37-38
- 第四章 加工处理对叶酸含量的影响38-46
- 4.1 材料38-39
- 4.1.1 供试材料38
- 4.1.2 化学试剂38
- 4.1.3 仪器与设备38-39
- 4.2 方法39-41
- 4.2.1 色谱条件39
- 4.2.2 样品制备39
- 4.2.3 样品加工39-40
- 4.2.4 对照组处理40
- 4.2.5 存放时叶酸测定40-41
- 4.3 结果与分析41-45
- 4.3.1 对照组叶酸含量41
- 4.3.2 加工处理组与对照组叶酸含量对比41-42
- 4.3.3 贮藏过程中八种叶菜中叶酸含量变化42-45
- 4.4 讨论45
- 4.5 小结45-46
- 第五章 结论与展望46-48
- 5.1 液相条件的优化研究46
- 5.2 提取条件的确定46
- 5.3 多种处理条件下叶酸测定46-47
- 5.4 展望47-48
- 参考文献48-52
- 致谢52-53
- 作者简介53
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