PARG缺陷在苯并芘致肺癌过程中的作用及其潜在机制研究

发布时间：2020-10-30 04:14

　　 目的:肺癌作为当前全球最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁着人类的生命和健康,因此肺癌的防治至关重要。聚ADP-核糖基化反应的关键酶聚ADP-核糖水解酶[poly(ADP-ribose)glycohydrolase,PARG]在肿瘤发生中发挥重要作用,本研究拟以PARG基因缺陷小鼠作为研究对象,探讨PARG缺陷在苯并芘[Benzo(a)pyrene,BaP]致肺癌中的作用及可能机制,为肺癌的有效防治提供参考。方法:分别选择6-8周龄野生型小鼠和PARG~(+/-)小鼠各24只,雌雄各半,将其随机分为对照组和染毒组,每组6只。利用动式吸入染毒柜分别染毒90天和180天,染毒组BaP浓度为10.0ug/m3,并设溶剂对照。染毒期间记录小鼠的生存状况和体重变化。染毒结束时收集小鼠肺脏和血液,利用HE染色进行小鼠肺脏的病理分析,ELISA检测小鼠血液中BaP暴露情况,应用RT-PCR及Western blot技术检测小鼠肺脏中EGFR和UCH-L1基因在mRNA和蛋白水平的表达变化,同时运用免疫组织化学方法验证EGFR和UCH-L1在肺组织中的表达。结果:1、PARG缺陷对BaP诱导小鼠肺癌过程的影响:(1)BaP暴露能抑制野生型小鼠的体重增长,而对PARG~(+/-)小鼠无显著影响:野生型小鼠的体重在染毒90天和180天后均显著低于对照组(P0.05);而PARG~(+/-)小鼠的体重在染毒90天和180天后均与对照组无明显差异,且BaP染毒后野生型小鼠体重增长均慢于PARG~(+/-)小鼠组,差异有统计学意义(P0.05)。(2)随着BaP暴露时间加长,野生型小鼠肺脏器系数出现了增大趋势,而PARG~(+/-)小鼠没有明显变化:BaP作用90天后的野生型小鼠肺脏器系数较对照组没有明显差别,染毒180天后肺脏器系数则明显大于对照组(P0.05);PARG~(+/-)小鼠染毒90天与180天后肺脏器系数均无明显变化。(3)随着BaP暴露时间加长,野生型小鼠肺出现了肿瘤,肺损伤进行性加重,PARG~(+/-)小鼠未出现肿瘤,肺损伤较轻:染毒180天的野生型小鼠肺脏出现肿瘤,严重肺泡弥漫性间质化,肺泡结构严重破损;PARG~(+/-)小鼠染毒180天后未见肿瘤,部分肺泡间质增厚,仍可见肺泡结构。(4)经过BaP暴露,野生型小鼠和PARG~(+/-)小鼠血液中BPDE-DNA均显著升高:BaP暴露90天和180天后野生型小鼠和PARG~(+/-)小鼠的BPDE-DNA浓度均高于对照组(P0.05),野生型小鼠和PARG~(+/-)小鼠组间没有明显差异。2、PARG缺陷在BaP诱导小鼠肺癌中的潜在机制:BaP染毒90天后,野生型小鼠EGFR、UCH-L1在基因、蛋白水平的相对表达均上升(P0.05),PARG~(+/-)小鼠EGFR、UCH-L1在基因水平表达无显著差异,EGFR蛋白表达明显降低(P0.05),UCH-L1在蛋白水平表达无显著差异;BaP染毒180天后野生型小鼠EGFR、UCH-L1在基因、蛋白水平的表达均显著增强(P0.05),PARG~(+/-)小鼠EGFR、UCH-L1在基因、蛋白水平表达均降低(P0.05)。结论:1、PARG缺陷可对抗BaP致小鼠肺癌。2、PARG缺陷可能通过抑制EGFR信号通路激活和调控泛素化蛋白酶解过程对抗BaP致肺癌。
【学位单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R114
【部分图文】：

ARG 缺陷在苯并芘致肺癌过程中的作用及其潜在机制研究 硕士学位论文3.2 动物一般状况分析3.2.1BaP 染毒 90 天小鼠生长状态和体质量变化染毒过程中，野生型型小鼠和 PARG+/-小鼠均没有出现死亡，各组小均未出现叫声异常、运动迟缓、易兴奋、惊厥等异常行为，皮肤和皮毛没有明显改变。体质量变化见图 1-2，野生型型小鼠体质量增长在染毒前有明显差异，染毒后野生型型小鼠体重明显轻于对照组（P<0.05），野生型小鼠染毒组第 8 周出现下降，对照组则一直保持增长的趋势；BaP PARG+/-小鼠的体质量增长则没有明显差异，染毒组与对照组体质量增长保持稳定增长的趋势。3.2.2 BaP 染毒 180 天小鼠生长状态和体质量变化

BPDE-DNA 测定结果Tab 4 BPDE-DNA concentration of WT and PARG+/-mice exposed表 1-4 BaP 染毒后小鼠 BPDE-DNA 浓度变化（ng/mL）实验动物分组染毒剂量（ug/m3）0 10WT-90d 3.639±0.259 11.917±0.214*PARG+/--90d 4.250±1.010 12.977±0.276*WT-180d 3.200±0.327 9.514±0.315*PARG+/--180d 4.031±0.095 12.861±0.355*注：*表示与对照组比较，差异有统计学意义，P<0.05；WT-90d：野生型小鼠组 90 天+/--90d：PARG+/-小鼠组 90 天；WT-180d：野生型小鼠组 180 天；PARG+/--180d：PARG 180 天。

PARG 缺陷在苯并芘致肺癌过程中的作用及其潜在机制研究 硕士学位论文3.5.2BaP 染毒 180 天后小鼠肺形态学改变野生型小鼠肺部损伤程度与染毒时间呈正相关，BaP 染毒 180 天后野生型小鼠肺出现严重肺泡弥漫性间质化，且肺泡结构严重破损，明显的炎性浸润，出现异常结节，如图 1-6 中红色箭头所指，非正常细胞数量异常增多，病理学分析出现肿瘤组织，PARG+/-小鼠则出现部分肺泡间质增厚，肺泡结构仍可见，未发现肿瘤组织，见图 1-6。
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 高玮;邓智辉;;检测食品中苯并芘的方法研究[J];粮食科技与经济;2018年08期

2 黄燕芬;田立;;食品中苯并芘的研究进展[J];食品安全导刊;2016年24期

3 范志红;;香油里检出苯并芘,还能吃吗?[J];健康之家;2016年12期

4 弓玉红;郝林;郭凯凯;;萃取-紫外分光光度法测定土壤中3,4-苯并芘含量[J];山西农业科学;2012年04期

5 ;苯并芘食品致癌 生活中哪些途径可能摄入苯并芘[J];保鲜与加工;2012年06期

6 李桂源,罗慕强,尤家騄,姚开泰;湖南省鼻咽癌高、低发区家庭烟尘中3,4—苯并芘含量测定[J];癌症;1988年05期

7 王儒山;柴崇山;阿拉坦;李思汉;;改进工艺熏制香肠降低苯并芘含量[J];内蒙古医学杂志;1989年04期

8 万新民;;哪些人易患癌?[J];职业与健康;1989年06期

9 卢锦永;唐志峰;;食品中苯并芘的高效液相色谱法[J];现代食品;2017年01期

10 贾涛;;液相色谱-荧光法测定饲料用油中的苯并芘含量[J];饲料研究;2012年07期

相关博士学位论文 前1条

1 吴一华;血小板相关因素在心血管系统疾病中的作用研究[D];浙江大学;2012年

相关硕士学位论文 前10条

1 邓燕霞;PARG缺陷在苯并芘致肺癌过程中的作用及其潜在机制研究[D];广西医科大学;2018年

2 宁妍;双歧杆菌肽聚糖吸附苯并芘的研究与应用[D];河北农业大学;2018年

3 赵刚;苯并[a]芘短期暴露对小鼠神经行为的影响[D];山西医科大学;2018年

4 张晋;苯并芘对肺癌细胞迁移和侵袭能力的影响及其机制的研究[D];昆明医科大学;2016年

5 牛琳;多环芳烃类化合物苯并芘对人脐静脉内皮细胞血栓调节蛋白表达的影响及机制研究[D];山西医科大学;2017年

6 辛幸;苯并(a)芘对鲫鱼的生态毒理学效应[D];曲阜师范大学;2017年

7 高芬;环境致癌物苯并芘灭活PTEN的机制研究[D];中国科学技术大学;2011年

8 王敏敏;P25/CDK5-HDAC1信号通路在苯并[a]芘致神经细胞损伤中的作用[D];山西医科大学;2017年

9 刘兵戈;芝麻油的加工过程对苯并芘形成的影响[D];河南工业大学;2014年

10 朱易;肉制品无甲醛无3,4-苯并芘液熏技术研究[D];南京农业大学;2013年

本文编号：2861971