青春期暴露双酚A致小鼠卵巢异常发育的转录组分析

发布时间：2020-11-02 10:55

　　 双酚A(BPA)具备雌激素效应能够扰乱内分泌,许多动物模型与人类流行病学已经将BPA与生殖器官和后期胚胎发育的过程联系起来,然而,基于转录组层面的BPA影响青春期小鼠卵巢发育的研究还知之甚少。因此,本研究试图通过灌胃BPA来研究ICR青春期雌鼠卵巢发育及其转录组学特征。研究中将60只四周龄ICR雌性小鼠自由分为两组,记为HBPA组和EC组。HBPA组为实验组,EC组为对照组,每组三十只,将两组小鼠分别暴露于BPA(200ng/kg/d)和玉米油中,持续四周,收集发情期小鼠血清用于BPA与17β-雌二醇(E_2)激素的测定来探究BPA的暴露是否影响雌激素的分泌,同时收集卵巢进行组织学观察和相关基因mRNA及蛋白的表达水平,并且对卵巢RNA进行转录组测序,运用生物信息学手段对所得到的差异基因进行GO功能与KEGG通路的分析。结果:1.通过观察组织学得出小鼠体重未有明显差异,但是卵巢基质出现增生,子宫充血膨大,卵泡数量减少,闭锁卵泡增多,黄体变得更大且卵细胞数量明显增加。2.HBPA组血清样本中BPA浓度和E_2水平均较高,同时免疫组化和蛋白质免疫印迹结果均显示ERβ蛋白水平的表达有所增加,ERα相反。3.采用转录组测序技术对灌胃后小鼠卵巢进行转录组测序和功能注释,利用生物学方法对基因表达和功能进行研究,结果表明测序质量较好。GO功能富集的结果显示差异基因在MAPK级联、细胞分化、心脏发育和含磷酸盐的化合物代谢过程中显著富集,KEGG代谢通路在内分泌系统类别中显著富集。结论:我们的研究结果表明青春期小鼠经BPA暴露后可造成卵巢组织结构的损伤,并且影响激素分泌的功能和重要基因的表达水平,扰乱小鼠内分泌系统诱导卵巢过早或过快发育同时可导致小鼠卵巢组织的转录组学改变,包括基因功能的改变,这将为今后更深入的探究BPA影响卵巢发育的机理奠定了基础。
【学位单位】：阜阳师范学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R114
【部分图文】：

β-1雌二醇与BPA的分子结构式

小鼠处理与样品收集路线图

小鼠阴道涂片；a：发情间期；b：发情前期：c：发情期；d：发情后期Fig2.2:Mousevaginalsmear;a:diestrus;b:proestrus:c:estrus;d:metestrus
【参考文献】

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本文编号：2866954