二氧化硅诱导的内皮间质转化参与矽肺纤维化的实验研究

发布时间：2021-01-29 18:11

　　目的成纤维化细胞部分通过内皮细胞发生间质转化（endothelial mesenchymal transition,EndMT）而来,而在矽肺纤维化的发病机制中EndMT所发挥的作用未见报道。因此本研究着重探讨二氧化硅（SiO₂）激活的EndMT在矽肺纤维化中扮演的角色。方法利用内皮细胞特异性标记绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）小鼠（Tie-2-GFP）和人肺动脉内皮细胞系人肺动脉内皮细胞（human pulmonary artery endothelial cells,HPAEC）构建矽肺体内体外模型,利用计算机断层扫描（computed tomography,CT）,结合相关分子生物学方法探究SiO₂对相关细胞功能的影响。结果 CT检测结合天狼猩红染色显示SiO₂作用28天的Tie-2-GFP小鼠,肺部出现纤维化病变;免疫荧光结果显示SiO₂诱导小鼠肺组织血管中EndMT的发生;蛋白免疫印迹法实验结果发现SiO₂刺激下,HPAEC中... 

【文章来源】：现代预防医学. 2020,47(09)北大核心

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【部分图文】：

SiO2诱导小鼠肺组织纤维化和EndMT

此外我们同时对SiO2引起间质转化过程中伴随的功能改变做了进一步研究。首先在细胞体外实验中利用反映细胞增殖能力的Brdu试验发现,SiO2促进HPAEC的增殖,差异具有统计学意义(24小时,t=3.617,P=0.043;48小时,t=5.535,P=0.030;72小时,t=8.030,P=0.025)(图3A);而反映细胞活力的CCK8试验证实,SiO2使HPAEC的活力呈时间依赖性升高,SiO2刺激24h到达高峰,差异具有统计学意义(t=6.101,P=0.028)(图3B)。运用划痕实验探究了SiO2对内皮细胞迁移功能的影响。结果显示SiO2刺激HPAEC后,细胞迁移能力上升,表现为SiO2刺激组的HPAEC能在较短时间融合,且具有统计学差异(和0小时相比,SiO2作用24h,t=32.486,P<0.001;SiO2作用48h,t=181.544,P<0.001;和对照组相比,t=120.647,P<0.001)(图3C-D)。这些体外实验结果表明SiO2激活EndMT相关的细胞增殖、活力以及迁移能力的改变。图3 SiO2激活内皮细胞相关功能的改变

SiO2激活内皮细胞相关功能的改变


本文编号：3007351