牛乳中三种致病菌基因快速检测方法的建立
发布时间：2021-05-13 17:19
乳品中包含了许多营养成分,是人们日常生活重要的食物品种,乳品的质量安全与消费者的健康及乳品行业的健康发展有直接关系。原料液态奶中细菌总数的多少和乳品中的致病菌直接影响着乳品的质量好坏,国标要求生乳的细菌总数不得超过2×106 cfu/mL,而巴氏乳中细菌总数不得超过1×105 cfu/mL,而沙门菌和金黄色葡萄球菌是引起食物中毒最常见的病原菌,国标方法对乳品中这两种致病菌的要求是不得检出,而国标方法对细菌总数及特定病原菌检测存在耗时长的缺点,不利于企业的筛查及现场检测,因此亟需一种快速高效的方法对乳品进行检测。乳品中的微生物主要包括细菌和酵母菌,根据本实验室前期研究,分析并确定了吉林省区域内乳品中的细菌组分。通过实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,qPCR）获得了不同细菌的Ct值与细菌总数的对应关系,发现大肠杆菌16S的标准曲线值可以用以衡量乳品常见细菌的总数。本研究首先以此为基础,建立了乳品中细菌总数的qPCR检测方法。建立标准曲线,并通过确定Ct值判断乳品中细菌总数情况,对照国标方法对实际样品进行检测...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：110 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
abstract
英文缩写词表
引言
第一篇 文献综述
第1章 乳制品概况及检测方法研究
1.1 乳制品的种类与特点
1.2 乳制品中的微生物污染
1.3 国内外乳制品微生物限量标准对比
1.4 微生物检测方法
第2章 金黄色葡萄球菌及沙门菌研究进展
2.1 金黄色葡萄球菌研究进展
2.2 沙门菌污染
2.3 乳品中金黄色葡萄球菌及沙门菌检测
第3章 荧光定量PCR检测方法和环介导恒温扩增方法的原理及进展
3.1 QPCR和 LAMP的原理特点
3.2 QPCR和 LAMP引物设计
3.3 QPCR和 LAMP结果分析
3.4 QPCR和 LAMP检测特点
3.5 QPCR和 LAMP的应用进展
第二篇 研究内容
第1章 乳品中细菌总数荧光定量PCR检测方法的建立
1.1 材料
1.2 方法
1.3 结果
1.4 讨论
1.5 小结
第2章 沙门菌环介导恒温扩增检测方法的建立
2.1 材料
2.2 方法
2.3 结果
2.4 讨论
2.5 小结
第3章 金黄色葡萄球菌环介导恒温扩增检测方法的建立
3.1 材料
3.2 方法
3.3 结果
3.4 讨论
3.5 小结
第4章 双重环介导恒温扩增检测方法的建立及试剂盒组装
4.1 材料
4.2 方法
4.3 试剂盒的组装
4.4 试剂盒检测
4.5 结果
4.6 讨论
4.7 小结
结论
参考文献
附录
导师简介
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于CRISPR的生物分析化学技术[J]. 李悦,李景虹. 化学进展. 2020(01)
[2]基于微流控技术的数字PCR检测仪设计与实现[J]. 何关金. 天津科技. 2020(01)
[3]Preparation of a Salmonella LAMP Detection Kit[J]. Yuping WAN,Xiaosheng WU,Yu ZHANG,Meihong DU,Zhaoqin WANG,Caiwei FENG,Zhengmiao ZHAO,Fangyang HE. Agricultural Biotechnology. 2019(06)
[4]2016～2018年云南省肉类制品致病菌污染状况调查分析[J]. 何玉凤,杨菁,汤晓召,邹颜秋硕,国译丹. 食品安全质量检测学报. 2019(22)
[5]历史回顾：改革开放40年乳制品消费增长近40倍[J]. 刘回春. 中国质量万里行. 2019(11)
[6]CRISPR-Cas13a结合重组酶介导的扩增快速检测副溶血性弧菌方法的建立[J]. 葛以跃,苏璇,张倩,陈银,赵康辰,吴斌,吴涛,朱小娟,唐震,朱凤才,崔仑标. 现代预防医学. 2019(20)
[7]我国乳制品分类浅析[J]. 任秋鸿,庄超,彭华. 中国乳业. 2019(09)
[8]恒温扩增技术在真菌检测中的应用[J]. 张长军. 临床医药文献电子杂志. 2019(59)
[9]禽致病性大肠杆菌O1、O2、O78血清型三重PCR检测方法的建立[J]. 王娟芳,戴建君,姜敏,任建鸾,李德志,张鹏,孙建和,汤芳. 南京农业大学学报. 2020(01)
[10]生牛奶中的主要微生物、检测方法及其控制[J]. 王宇. 现代畜牧科技. 2019(05)
硕士论文
[1]基于CRISPR的核酸检测新技术[D]. 王巧.东南大学 2018
[2]鸡源致病性沙门氏菌毒力基因与致病性的相关性研究[D]. 张珍.广西大学 2017
[3]生牛乳中金黄色葡萄球菌的快速检测及耐药性研究[D]. 张从超.齐鲁工业大学 2017
[4]RT-LAMP检测扎伊尔型埃博拉病毒的研究[D]. 李环.中国人民解放军军事医学科学院 2017
[5]乳品中细菌与酵母菌PMA-qPCR活菌检测方法的建立[D]. 盖冬雪.吉林大学 2016
[6]鲜乳细菌总数荧光定量PCR检测方法的建立[D]. 刘艳艳.吉林大学 2014
[7]湖南十字花科蔬菜品种抗根肿病鉴定、病菌小种及qPCR土壤病菌检测技术研究[D]. 杨华.湖南农业大学 2014
[8]改良型环介导等温扩增法检测金黄色葡萄球菌的研究[D]. 张涛涛.陕西科技大学 2014
[9]单增李斯特氏菌和小肠结肠炎耶尔森氏菌LAMP方法的建立[D]. 徐云明.吉林大学 2013
本文编号：3184412
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：110 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
abstract
英文缩写词表
引言
第一篇 文献综述
第1章 乳制品概况及检测方法研究
1.1 乳制品的种类与特点
1.2 乳制品中的微生物污染
1.3 国内外乳制品微生物限量标准对比
1.4 微生物检测方法
第2章 金黄色葡萄球菌及沙门菌研究进展
2.1 金黄色葡萄球菌研究进展
2.2 沙门菌污染
2.3 乳品中金黄色葡萄球菌及沙门菌检测
第3章 荧光定量PCR检测方法和环介导恒温扩增方法的原理及进展
3.1 QPCR和 LAMP的原理特点
3.2 QPCR和 LAMP引物设计
3.3 QPCR和 LAMP结果分析
3.4 QPCR和 LAMP检测特点
3.5 QPCR和 LAMP的应用进展
第二篇 研究内容
第1章 乳品中细菌总数荧光定量PCR检测方法的建立
1.1 材料
1.2 方法
1.3 结果
1.4 讨论
1.5 小结
第2章 沙门菌环介导恒温扩增检测方法的建立
2.1 材料
2.2 方法
2.3 结果
2.4 讨论
2.5 小结
第3章 金黄色葡萄球菌环介导恒温扩增检测方法的建立
3.1 材料
3.2 方法
3.3 结果
3.4 讨论
3.5 小结
第4章 双重环介导恒温扩增检测方法的建立及试剂盒组装
4.1 材料
4.2 方法
4.3 试剂盒的组装
4.4 试剂盒检测
4.5 结果
4.6 讨论
4.7 小结
结论
参考文献
附录
导师简介
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于CRISPR的生物分析化学技术[J]. 李悦,李景虹. 化学进展. 2020(01)
[2]基于微流控技术的数字PCR检测仪设计与实现[J]. 何关金. 天津科技. 2020(01)
[3]Preparation of a Salmonella LAMP Detection Kit[J]. Yuping WAN,Xiaosheng WU,Yu ZHANG,Meihong DU,Zhaoqin WANG,Caiwei FENG,Zhengmiao ZHAO,Fangyang HE. Agricultural Biotechnology. 2019(06)
[4]2016～2018年云南省肉类制品致病菌污染状况调查分析[J]. 何玉凤,杨菁,汤晓召,邹颜秋硕,国译丹. 食品安全质量检测学报. 2019(22)
[5]历史回顾：改革开放40年乳制品消费增长近40倍[J]. 刘回春. 中国质量万里行. 2019(11)
[6]CRISPR-Cas13a结合重组酶介导的扩增快速检测副溶血性弧菌方法的建立[J]. 葛以跃,苏璇,张倩,陈银,赵康辰,吴斌,吴涛,朱小娟,唐震,朱凤才,崔仑标. 现代预防医学. 2019(20)
[7]我国乳制品分类浅析[J]. 任秋鸿,庄超,彭华. 中国乳业. 2019(09)
[8]恒温扩增技术在真菌检测中的应用[J]. 张长军. 临床医药文献电子杂志. 2019(59)
[9]禽致病性大肠杆菌O1、O2、O78血清型三重PCR检测方法的建立[J]. 王娟芳,戴建君,姜敏,任建鸾,李德志,张鹏,孙建和,汤芳. 南京农业大学学报. 2020(01)
[10]生牛奶中的主要微生物、检测方法及其控制[J]. 王宇. 现代畜牧科技. 2019(05)
硕士论文
[1]基于CRISPR的核酸检测新技术[D]. 王巧.东南大学 2018
[2]鸡源致病性沙门氏菌毒力基因与致病性的相关性研究[D]. 张珍.广西大学 2017
[3]生牛乳中金黄色葡萄球菌的快速检测及耐药性研究[D]. 张从超.齐鲁工业大学 2017
[4]RT-LAMP检测扎伊尔型埃博拉病毒的研究[D]. 李环.中国人民解放军军事医学科学院 2017
[5]乳品中细菌与酵母菌PMA-qPCR活菌检测方法的建立[D]. 盖冬雪.吉林大学 2016
[6]鲜乳细菌总数荧光定量PCR检测方法的建立[D]. 刘艳艳.吉林大学 2014
[7]湖南十字花科蔬菜品种抗根肿病鉴定、病菌小种及qPCR土壤病菌检测技术研究[D]. 杨华.湖南农业大学 2014
[8]改良型环介导等温扩增法检测金黄色葡萄球菌的研究[D]. 张涛涛.陕西科技大学 2014
[9]单增李斯特氏菌和小肠结肠炎耶尔森氏菌LAMP方法的建立[D]. 徐云明.吉林大学 2013
本文编号：3184412
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