HMGB1通过调控α-synuclein表达参与百草枯引起的多巴胺能神经元自噬功能异常

发布时间：2021-06-26 11:03

　　目的本研究通过建立多巴胺能神经元体外模型（SH-SY5Y）,采用相关生物学技术,观察百草枯（Paraquat,PQ）对多巴胺能神经元自噬功能的影响;探讨高迁移率族蛋白1（high mobility group box-1 protein,HMGB1）和α-突触核蛋白（α-synuclein）是否为PQ影响神经元自噬功能的贡献因子;最后阐明HMGB1通过调控α-synuclein表达参与多巴胺能神经元自噬抑制的机制。方法选取人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）作为多巴胺能神经元的体外模型,不同浓度PQ处理细胞24 h以及150μmol/L PQ处理细胞不同时间,CCK8法检测PQ对SH-SY5Y细胞增殖活性的影响;分光光度法检测细胞上清中LDH的活力;免疫印迹法（Western blot）检测PQ处理后细胞内自噬相关蛋白（LC3I、LC3II、Beclin1、Vps34、p62）、α-synuclein和HMGB1蛋白表达水平;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测α-synuclein和HMGB1基因表达水平;单丹磺酰尸胺（MDC）染色法检测细胞内自噬小体的变化;免疫荧光法（Immu... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PQ对SH-SY5Y细胞增殖活性的影响(n=5)

宁夏医科大学硕士学位论文 第一部分

图 2 PQ 对 SH-SY5Y 细胞上清中 LDH 活性的影响(n=3) 3. PQ 对 SH-SY5Y 细胞自噬相关蛋白表达的影响 与对照组比较，随着 PQ 染毒浓度的增加，LC3II 蛋白表达水平明显减少，自噬标记蛋白 LC3II/LC3I 的比值明显降低，自噬相关蛋白 Beclin1 和 Vps34蛋白表达水平下降，自噬降解底物 p62 蛋白表达水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)，见图 3。

【参考文献】：
期刊论文
[1]AMPK-mTOK信号通路参与百草枯致PC12细胞的自噬抑制作用[J]. 许延龙,武坷鑫,王前,于普光,苏小明,黄敏.  中华劳动卫生职业病杂志. 2018 (11)
[2]百草枯诱导小鼠α-突触核蛋白表达升高并聚集的实验研究[J]. 杜芸兰,刘振国,陈生弟,陆国强,胡庆沈.  中国神经免疫学和神经病学杂志. 2005(01)

博士论文
[1]自噬在系统性炎症所致黑质多巴胺神经元损伤中的作用及机制研究[D]. 郑慧芬.苏州大学 2013



本文编号：3251222