Foxp3基因启动子区甲基化在砷致人淋巴细胞免疫调节中的作用及5-Aaz-CdR的干预研究
发布时间：2021-07-12 15:32
目的:从细胞水平,探讨与验证Foxp3基因启动子区甲基化在砷对人淋巴细胞免疫调节作用中的影响,并进行针对性干预,以期为砷中毒机制的完善、寻找可靠的干预措施提供科学依据。方法:（1）染毒试验:密度梯度法分离培养健康成人外周血淋巴细胞,用0.00、5.00、10.00、20.00、30.00、40.00μmol/L的亚砷酸钠（Sodium arsenite,NaAsO2）染毒24 h,MTT比色法检测细胞相对存活率,HE染色鉴定染毒模型;实时荧光定量（RT-qPCR）检测叉头转录因子3（forkhead/winged helix transcription factor,Foxp3）,DNA甲基转移酶1（DNA methltransferases1,DNMT1）mRNA的转录水平;免疫印迹法（Western blot）检测Foxp3、DNMT1的蛋白表达水平。亚硫酸氢盐（BisμLfite sequencing,BSP）测序法检测Foxp3基因启动子区域甲基化状态,流式细胞分析仪检测调节性T细胞（regμLatory T cell,Treg）占CD4+
【文章来源】：贵州医科大学贵州省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
外周血单个核细胞的细胞层分离
图 2-2 总 RNA 凝胶电泳图Fig.2-2 Total RNAgel electrophoresis figureR 反应曲线，溶解曲线-4 可知，内参基因和 Foxp3 基因扩增曲线，证明所有基因的扩增为特异性，无引物图 2-3 GADPH 基因实时荧光定量扩增曲线及溶曲线熔解曲线
[注]*：与对照组相比，P<0.05图 2-5 NaAsO2染毒对人淋巴细胞 Foxp3 mRNA 转录表达的影响5 Transcriptional expression levels of Foxp3 gene in lymphocytes exposed to NaAsO2NaAsO2染毒对人淋巴细胞 Foxp3 蛋白表达的影响图 2-6 所示，随着亚砷酸钠染毒浓度的升高，淋巴细胞 Foxp3 蛋白表达水降趋势（rFoxp3蛋白表达水平=－0.945，P<0.05）；与对照组相比，各染毒组 的蛋白表达水平均降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]辅助性T细胞-17与调节性T细胞在燃煤污染型砷中毒患者外周血中的比例变化及意义[J]. 夏仕青,方晓琳,朱凯,董令,邹忠兰,刘永莲,王大朋,张爱华. 中华地方病学杂志. 2019 (02)
[2]燃煤污染型砷中毒患者外周血Foxp3、TGF-β1、IL-2的表达差异及意义[J]. 方晓琳,夏仕青,朱凯,董令,邹忠兰,刘永莲,王大朋,张爱华. 中华地方病学杂志. 2019 (02)
[3]贵州燃煤污染型地方性砷中毒研究进展与展望[J]. 张爱华,姚茂琳. 贵州医科大学学报. 2018(10)
[4]辅助性T细胞-17与调节性T细胞浸润在砷致大鼠肝脏损伤中的作用[J]. 朱凯,张爱华,董令,王大朋,刘永莲,邹忠兰,王庆陵. 中华地方病学杂志. 2018 (07)
[5]Chailing decoction induced immune tolerance of mice in heart transplantation[J]. 张友满. China Medical Abstracts（Internal Medicine）. 2018(01)
[6]做好地方病消除工作,为我国实现全部脱贫目标助力[J]. 孙殿军,高彦辉,刘辉,赵丽军,裴俊瑞,张微. 中华地方病学杂志. 2017 (03)
[7]调节性T细胞、辅助性T细胞-17相关免疫因子在砷暴露大鼠外周血中的表达差异及意义[J]. 刘永莲,张爱华,王大朋,董令,朱凯,王庆陵,邹忠兰. 中华地方病学杂志. 2017 (01)
[8]从免疫学角度深化认识砷所致全身性损害机制及其防治策略[J]. 张爱华,王大朋. 中华地方病学杂志. 2017 (01)
[9]重视地方性砷中毒机制假说间相互作用,提升机制研究及其转化应用价值[J]. 张爱华,王大朋. 中华地方病学杂志. 2016 (01)
[10]重视燃煤污染型地方性砷中毒的防治管理[J]. 安冬. 中华地方病学杂志. 2015 (01)
硕士论文
[1]5-Aza-CdR对B-ALL细胞系NALM-6的作用及其对miRNA影响的研究[D]. 石懿玉.山西医科大学 2014
[2]系统性红斑狼疮CD4+CD25+T细胞标记分子FOXP3启动子区甲基化水平研究[D]. 董娟.山西医科大学 2010
本文编号：3280180
【文章来源】：贵州医科大学贵州省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
外周血单个核细胞的细胞层分离
图 2-2 总 RNA 凝胶电泳图Fig.2-2 Total RNAgel electrophoresis figureR 反应曲线，溶解曲线-4 可知，内参基因和 Foxp3 基因扩增曲线，证明所有基因的扩增为特异性，无引物图 2-3 GADPH 基因实时荧光定量扩增曲线及溶曲线熔解曲线
[注]*：与对照组相比，P<0.05图 2-5 NaAsO2染毒对人淋巴细胞 Foxp3 mRNA 转录表达的影响5 Transcriptional expression levels of Foxp3 gene in lymphocytes exposed to NaAsO2NaAsO2染毒对人淋巴细胞 Foxp3 蛋白表达的影响图 2-6 所示，随着亚砷酸钠染毒浓度的升高，淋巴细胞 Foxp3 蛋白表达水降趋势（rFoxp3蛋白表达水平=－0.945，P<0.05）；与对照组相比，各染毒组 的蛋白表达水平均降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]辅助性T细胞-17与调节性T细胞在燃煤污染型砷中毒患者外周血中的比例变化及意义[J]. 夏仕青,方晓琳,朱凯,董令,邹忠兰,刘永莲,王大朋,张爱华. 中华地方病学杂志. 2019 (02)
[2]燃煤污染型砷中毒患者外周血Foxp3、TGF-β1、IL-2的表达差异及意义[J]. 方晓琳,夏仕青,朱凯,董令,邹忠兰,刘永莲,王大朋,张爱华. 中华地方病学杂志. 2019 (02)
[3]贵州燃煤污染型地方性砷中毒研究进展与展望[J]. 张爱华,姚茂琳. 贵州医科大学学报. 2018(10)
[4]辅助性T细胞-17与调节性T细胞浸润在砷致大鼠肝脏损伤中的作用[J]. 朱凯,张爱华,董令,王大朋,刘永莲,邹忠兰,王庆陵. 中华地方病学杂志. 2018 (07)
[5]Chailing decoction induced immune tolerance of mice in heart transplantation[J]. 张友满. China Medical Abstracts（Internal Medicine）. 2018(01)
[6]做好地方病消除工作,为我国实现全部脱贫目标助力[J]. 孙殿军,高彦辉,刘辉,赵丽军,裴俊瑞,张微. 中华地方病学杂志. 2017 (03)
[7]调节性T细胞、辅助性T细胞-17相关免疫因子在砷暴露大鼠外周血中的表达差异及意义[J]. 刘永莲,张爱华,王大朋,董令,朱凯,王庆陵,邹忠兰. 中华地方病学杂志. 2017 (01)
[8]从免疫学角度深化认识砷所致全身性损害机制及其防治策略[J]. 张爱华,王大朋. 中华地方病学杂志. 2017 (01)
[9]重视地方性砷中毒机制假说间相互作用,提升机制研究及其转化应用价值[J]. 张爱华,王大朋. 中华地方病学杂志. 2016 (01)
[10]重视燃煤污染型地方性砷中毒的防治管理[J]. 安冬. 中华地方病学杂志. 2015 (01)
硕士论文
[1]5-Aza-CdR对B-ALL细胞系NALM-6的作用及其对miRNA影响的研究[D]. 石懿玉.山西医科大学 2014
[2]系统性红斑狼疮CD4+CD25+T细胞标记分子FOXP3启动子区甲基化水平研究[D]. 董娟.山西医科大学 2010
本文编号：3280180
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