内源性硫化氢对硫酸铍致16HBE细胞损伤的保护作用及其机制研究

发布时间：2021-08-08 17:28

　　目的:本实验运用硫酸铍（Be SO4）染毒人支气管上皮细胞16HBE构建体外细胞模型,并用内源性硫化氢（H2S）供体硫氢化钠（Na HS）和肺组织中内源性H2S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）抑制剂DL-炔丙基甘氨酸（PPG）对16HBE细胞进行干预,观察Be SO4对16HBE细胞的损伤作用,阐明内源性H2S对Be SO4致16HBE细胞损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法:常规培养人支气管上皮细胞（16HBE）,用不同浓度的Be SO4处理细胞。采用MTT法检测细胞活性;采用H2S供体Na HS预处理细胞6h增加内源性H2S的量;使用CSE抑制剂PPG预处理细胞6h抑制CSE的表达,减少内源性H2S的量,随后用Be SO4处理细胞,采用荧光探针DCFH-DA检测细胞内的ROS水平,用硫代巴比妥酸法（TBA）检测细胞内丙二醛（MDA）水平,检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性,免疫组化法检测8-羟基脱氧鸟苷（8-OHDG）和3硝基酪氨酸（3-NT）,免疫蛋白印迹法检测检测胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、总Akt（t... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同浓度的BeSO4处理16HBE细胞后细胞活力的检测*#P＜0.05VS对照组

不同浓度的BeSO4处理16HBE细胞后对细胞内的ROS水平进行检测*P＜0.05VS对照组

0 μM NaHS、10 mM PPG 预处理细胞 6h，150 μM BeSO4处理细胞 48h 检测H2S 水平；*P＜0.05 VS 对照组，#P＜0.05 VS BeSO4组源性硫化氢对 BeSO4致细胞氧化应激水平的影响 300 μM NaHS、10 mM PPG 预处理细胞 6h，随后用 150 μM Be8h，检测细胞 ROS、MDA 水平及 SOD、GSH-PX 活力。与对照组O4处理过后的 16HBE 细胞中的 ROS 及 MDA 含量均增高，差异均(P<0.05)；与 BeSO4组比较，NaHS 干预后降低了 16HBE 细胞内A 含量，差异均有统计学意义(P<0.05)；然而用 PPG 干预后，16HOS 及 MDA 含量均上升，差异均有统计学意义(P<0.05)。并且在处理的两组中，与 NaHS 的干预相比，PPG 的干预能够使细胞内量均增高，差异均有统计学意义(P<0.05)；NaHS 和 PPG 单独干

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]硫化氢对敌敌畏中毒急性肺损伤大鼠肺组织中SP-A、B、C的影响[D]. 韩婧.南华大学 2014
[2]内源性硫化氢对硫酸铍致大鼠肺损伤的保护作用及其PI3K/Akt依赖机制[D]. 廖永红.南华大学 2014



本文编号：3330373