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大气PM 2.5 干扰内皮细胞自噬及大蒜素的改善作用机制

发布时间:2021-10-24 09:06
  目的:1)研究大气PM2.5干扰人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬的潜在分子机制,为科学评价大气PM2.5对人体心血管系统的影响提供理论依据;2)探究大蒜素改善由于大气PM2.5干扰HUVECs功能的作用及分子机制,为预防和改善大气PM2.5暴露影响人体心血管系统的健康提供新的思路和策略。方法:(1)用不同浓度的PM2.5(1,5,25μg/mL)处理HUVECs后,透射电子显微镜(TEM)观察PM2.5在细胞中的分布,以及自噬小体的形成;吖啶橙(AO)和单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察酸性小泡;间接免疫荧光法(IF)检测LC3和p62 puncta水平;Western blot检测自噬蛋白(LC3 A、LC3 B、Beclin 1、p62、ATG3、ATG7、ATG5、ATG12、STX17)和溶酶体相关蛋白(CTSB、CTSD、LAMP1、LAMP2)的表达;并选择AKT、ERK1/2、TFEB信号通路来探讨其潜在的分子机制。(2)大蒜素(5,10,2... 

【文章来源】:南华大学湖南省

【文章页数】:94 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

大气PM 2.5 干扰内皮细胞自噬及大蒜素的改善作用机制


PM2.5在HUVECs中的分布(×8000)

大气PM 2.5 干扰内皮细胞自噬及大蒜素的改善作用机制


TEM下HUVECs的自噬小体(×8000)

相关蛋白,依赖性,剂量,蛋白


27LC3AII、ATG3、ATG7、ATG5、ATG12的表达水平,与对照组相比,PM2.5组呈剂量依赖性地增加了Beclin1、LC3BII/I、LC3AII/I、ATG3、ATG7、ATG5、ATG12的表达水平(图3.3和3.4,P<0.05,P<0.01),进一步证实了PM2.5暴露组细胞内自噬泡数增加。图3.3PM2.5对HUVECs自噬相关蛋白Beclin1、LC3B、LC3A表达的影响A:IF检测LC3puncta的表达水平(400×);B:Beclin1、LC3B、LC3A蛋白的表达;C-E:分别为Beclin1、LC3BII/I、LC3AII/I相对表达水平。(与阴性对照组比较,*:P<0.05,**:P<0.01,n=3)Figure3.3TheeffectofPM2.5ontheexpressionofautophagy-relatedproteins,Beclin1,LC3BandLC3AinHUVECsA:TheexpressionlevelsofLC3byindirectimmunofluorescence(400×);B:ThelevelsofBeclin1,LC3B,LC3Aproteinexpression;C-E:Therelativeexpressionof(Beclin1,LC3BII/I,LC3AII/I,respectively).(*:P<0.05,**:P<0.01vsnegativecontrolgroup,n=3)

【参考文献】:
期刊论文
[1]《中国心血管病报告2018》要点介绍[J]. 马丽媛,吴亚哲,陈伟伟.  中华高血压杂志. 2019(08)
[2]Role of AMPK in atherosclerosis via autophagy regulation[J]. Hanxiao Ou,Chuhao Liu,Wenjie Feng,Xinwen Xiao,Shengsong Tang,Zhongcheng Mo.  Science China(Life Sciences). 2018(10)
[3]The effects of autophagy on vascular endothelial cells induced by airborne PM2.5[J]. Zhixiang Zhou,Tong Shao,Mengnan Qin,Xiaoyan Miao,Yu Chang,Wang Sheng,Fengshang Wu,Yunjiang Yu.  Journal of Environmental Sciences. 2018(04)

硕士论文
[1]PM2.5致人脐静脉内皮细胞氧化损伤及白藜芦醇的干预效应研究[D]. 李利忠.中国人民解放军军事医学科学院 2016



本文编号:3455002

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