不同期别矽肺病人肺泡巨噬细胞差异蛋白质研究
发布时间：2021-12-02 03:05
目的收集不同期别矽肺病人肺灌洗液中巨噬细胞,探讨不同期别矽肺患者肺泡巨噬细胞的差异蛋白质,以期获得与矽肺发生发展有关的蛋白质,进一步揭示矽肺的发生发展机理。方法选取2016年10月至2017年9月中国煤矿工人北戴河疗养院治疗的矽肺患者为研究对象,选取其中接尘史单纯即只接触岩尘,无其他或尽量少的基础疾病,未脱尘或脱尘时间短（2年内）的31例男性矽肺患者。肺内粉尘沉着症5例、矽肺壹期10例、矽肺贰期9例、矽肺叁期7例。查阅病历,符合入选条件并签署知情同意书后,收集矽肺病人前8瓶灌洗液,提取肺灌洗液中巨噬细胞。培养2h后,前7瓶巨噬细胞用于提取全蛋白并于-80℃冰箱保存,第8瓶提取的巨噬细胞用于瑞氏吉姆萨染色,观察细胞形态。巨噬细胞培养2h冰上提取蛋白质,双向凝胶电泳初步分离差异蛋白质,Image Master 2D Platinum软件确定差异蛋白斑点,New ultrafle Xtreme型反射式串联基质辅助激光解吸附飞行时间质谱鉴定差异斑点,应用生物信息学对差异蛋白质进行GO、KEGG Pathway、PPI分析。结果研究入选的31例患者年龄、地区、吸烟史、饮酒史、接尘时间、粉尘性质、...
【文章来源】：华北理工大学河北省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
矽肺病人巨噬细胞形态
注： A 为肺内粉尘沉着症病人肺泡灌洗液巨噬细胞；B 为矽肺壹期症病人肺泡灌洗液巨噬细胞；C 为矽肺贰期病人肺泡灌洗液巨噬细胞； D 为矽肺叁期病人肺泡灌洗液巨噬细胞 比例尺为 50μm，红色箭头所指处为空泡，黑色箭头所指处为细胞核，黄色箭头所指处为粉尘图 2 肺泡巨噬细胞瑞氏-吉姆萨染色Fig.2 The ray-giemsa staining of alveolar macrophage1.3.3 双向凝胶电泳差异蛋白斑点PH 干胶条为 3-10NL，彩色 Marker 表示范围为 10-170 KDa。经 Image Masterv6.0 软件识别分析：肺内粉尘沉着症组 4 张胶共匹配 1500 个蛋白斑点；壹期矽肺组 9 张胶共匹配 4619 个蛋白斑点；贰期矽肺组 8 张胶共匹配 3049 个蛋白斑点；叁期矽肺组 6 张胶共匹配 4713 个蛋白斑点。肺内粉尘沉着症组与壹期矽肺组间共存在 17 个差异蛋白斑点；肺内粉尘沉着症组与贰期矽肺组间共存在 28 个差异蛋白斑点；肺内粉尘沉着症组与叁期矽肺组间共存在 6 个差异蛋白斑点。经反复确定及听取老师建议最后确定肺内粉尘沉着症
第 1 章 实验研究 3516，3304, 2276, 1792, 3008, 1821, 2967, 2805, 2376, 1857, 1349；肺内粉组与叁期矽肺组间共 6 个差异蛋白斑点，Match ID 分别为 2828, 2863, 4, 2959, 2965；总共 23 个斑点拟进行质谱鉴定。有趣的是 Match ID 为 30蛋白斑点在肺内粉尘沉着症组与矽肺壹期组，肺内粉尘沉着症组与矽肺贰组间均存在差异，这很可能是矽肺发生发展的关键蛋白质。表 7 差异蛋白质分布情况Table 7 The conditions of diverse protein spots因素 S0 vs S1 S0 vs S2 S0 vs S3别差异点数量 17 28 6质谱鉴定数量 6 11 6定差异点数量 2 5 0S0 代表肺内粉尘沉着症组；S1 代表壹期矽肺组；S2 代表贰期矽肺组；S3 代表叁期矽肺组
本文编号：3527601
【文章来源】：华北理工大学河北省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
矽肺病人巨噬细胞形态
注： A 为肺内粉尘沉着症病人肺泡灌洗液巨噬细胞；B 为矽肺壹期症病人肺泡灌洗液巨噬细胞；C 为矽肺贰期病人肺泡灌洗液巨噬细胞； D 为矽肺叁期病人肺泡灌洗液巨噬细胞 比例尺为 50μm，红色箭头所指处为空泡，黑色箭头所指处为细胞核，黄色箭头所指处为粉尘图 2 肺泡巨噬细胞瑞氏-吉姆萨染色Fig.2 The ray-giemsa staining of alveolar macrophage1.3.3 双向凝胶电泳差异蛋白斑点PH 干胶条为 3-10NL，彩色 Marker 表示范围为 10-170 KDa。经 Image Masterv6.0 软件识别分析：肺内粉尘沉着症组 4 张胶共匹配 1500 个蛋白斑点；壹期矽肺组 9 张胶共匹配 4619 个蛋白斑点；贰期矽肺组 8 张胶共匹配 3049 个蛋白斑点；叁期矽肺组 6 张胶共匹配 4713 个蛋白斑点。肺内粉尘沉着症组与壹期矽肺组间共存在 17 个差异蛋白斑点；肺内粉尘沉着症组与贰期矽肺组间共存在 28 个差异蛋白斑点；肺内粉尘沉着症组与叁期矽肺组间共存在 6 个差异蛋白斑点。经反复确定及听取老师建议最后确定肺内粉尘沉着症
第 1 章 实验研究 3516，3304, 2276, 1792, 3008, 1821, 2967, 2805, 2376, 1857, 1349；肺内粉组与叁期矽肺组间共 6 个差异蛋白斑点，Match ID 分别为 2828, 2863, 4, 2959, 2965；总共 23 个斑点拟进行质谱鉴定。有趣的是 Match ID 为 30蛋白斑点在肺内粉尘沉着症组与矽肺壹期组，肺内粉尘沉着症组与矽肺贰组间均存在差异，这很可能是矽肺发生发展的关键蛋白质。表 7 差异蛋白质分布情况Table 7 The conditions of diverse protein spots因素 S0 vs S1 S0 vs S2 S0 vs S3别差异点数量 17 28 6质谱鉴定数量 6 11 6定差异点数量 2 5 0S0 代表肺内粉尘沉着症组；S1 代表壹期矽肺组；S2 代表贰期矽肺组；S3 代表叁期矽肺组
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