镉干扰脂代谢转运蛋白表达及其抑制自噬的细胞毒性机制
发布时间：2022-01-15 05:18
环境中的镉污染被认为与慢性肝病和肾病、高血压等多种疾病的发生相关。很多实验结果已证实了镉在致动脉粥样硬化中的作用,包括抑制细胞增殖、促进凋亡而增加内皮细胞渗透性,以及改变机体脂代谢。然而,针对镉引起脂代谢紊乱的研究,主要是发现了镉暴露导致血清中胆固醇、甘油三酯水平上升的现象,但其分子机制仍旧不清楚。本课题则从脂代谢问题入手,研究镉对脂代谢转运蛋白的表达影响,并通过分子生物学方法解释镉诱导脂转运蛋白ABCA1（ATP-binding cassette transporter A1）表达增加的机理和镉对抑制蛋白降解的生物毒性机制。在本研究中,我们用含有不同镉剂量的饲料喂养ICR小鼠28天,建立小鼠模型模拟环境镉污染现象;结合荧光定量PCR和Western Blotting对脂代谢相关基因进行检测,分析镉对脂代谢转运蛋白表达的影响。蛋白稳定性分析发现镉增加HepG2细胞中ABCA1蛋白是主要通过抑制溶酶体降解途径形成的,这也是镉抑制自噬流产生细胞毒性的原因。镉处理后小鼠肝脏中负责脂代谢转运蛋白的表达发生变化:1.负责甘油三酯转运的MTTP（Microsomal triglyceride tr...
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
RT-qPCR检测镉处理小鼠组织NPC1L1mRNA的表达
图 2.1 RT-qPCR 检测镉处理小鼠组织 NPC1L1 mRNA 的表达Fig2.1 RT-qPCR detection of NPC1L1 mRNA expression in mice tissue with Cd treatment*表示在统计学上有显著的差异（p<0.05），**表示在统计学上有非常显著的差异（p<0.01）。微粒体甘油三脂转运蛋白（MTTP）的功能是负责甘油三酯转运和参与合成极低密度脂蛋白（VLDL）。肝脏和小肠中 mRNA 水平检测发现，该基因表达明显上调。小肠组织 100 ppm 和 1000 ppm 组中该基因表达显著增加，分别增加 2倍和 4 倍（图 2.2A）。肝脏组织中，100 ppm 和 1000 ppm 处理组 MTTP 的表达上调，分别增加约 2.3 倍和 2.1 倍（图 2.2 B）。
图 2.3 RT-qPCR 检测镉处理小鼠肝脏组织 HMGCR 和 Srebp2 mRNA 的表达Fig2.3 RT-qPCR detection of HMGCR and Srebp2 mRNA expression in mice liver with Cdtreatment*表示在统计学上有显著的差异（p<0.05），**表示在统计学上有非常显著的差异（p<0.01）。B 类Ⅰ型清道夫受体（SR-B1）是高密度脂蛋白（HDL）的配体，和低密度脂蛋白受体LDLR一样参与介导胆固醇转运。我们对肝脏组织中SR-B1 进行检测，发现与前期实验对低密度脂蛋白受体 LDLRmRNA 表达的检测结果相比，SR-B1的表达无明显变化（图 2.4A）。（图 2.4 B 来自季星岐镉诱导小鼠血清胆固醇增加及其分子机制的研究）
【参考文献】：
期刊论文
[1]溶酶体膜上的离子通道[J]. 曲莉丽,辛竞,仓春蕾. 中国科学:生命科学. 2017(01)
[2]Regulation of lysosomal ion homeostasis by channels and transporters[J]. Jian Xiong,Michael X.Zhu. Science China（Life Sciences）. 2016(08)
[3]土壤镉污染现状及其治理措施研究进展[J]. 卢红玲,肖光辉,刘青山,彭新德. 南方农业学报. 2014(11)
[4]LDL受体介导的血浆低密度脂蛋白胆固醇的内吞[J]. 范丽娟,李仲. 生命的化学. 2014(03)
[5]镉的应用和镉污染[J]. 邓玉良. 化学世界. 2012(11)
[6]镉毒性研究进展[J]. 刘莉莉,林岚,殷霄,陈润涛,罗巧,谢植伟,陈晓燕,蔡婷峰,陆丰荣. 中国职业医学. 2012(05)
[7]氧化应激在镉致大鼠肝细胞凋亡中的作用[J]. 汪纪仓,刘学忠,袁燕,裔传卉,卞建春,刘宗平. 中国农业科学. 2011(18)
[8]自噬与泛素化蛋白降解途径的分子机制及其功能[J]. 陈科,程汉华,周荣家. 遗传. 2012(01)
[9]土壤镉污染现状及危害研究进展[J]. 冉烈,李会合. 重庆文理学院学报(自然科学版). 2011(04)
[10]微粒体甘油三酯转运蛋白脂代谢作用及表达与调节[J]. 陈仕均,唐海蓉,王哲,孙玉成,邓俊良. 畜牧与兽医. 2008(03)
本文编号：3589977
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
RT-qPCR检测镉处理小鼠组织NPC1L1mRNA的表达
图 2.1 RT-qPCR 检测镉处理小鼠组织 NPC1L1 mRNA 的表达Fig2.1 RT-qPCR detection of NPC1L1 mRNA expression in mice tissue with Cd treatment*表示在统计学上有显著的差异（p<0.05），**表示在统计学上有非常显著的差异（p<0.01）。微粒体甘油三脂转运蛋白（MTTP）的功能是负责甘油三酯转运和参与合成极低密度脂蛋白（VLDL）。肝脏和小肠中 mRNA 水平检测发现，该基因表达明显上调。小肠组织 100 ppm 和 1000 ppm 组中该基因表达显著增加，分别增加 2倍和 4 倍（图 2.2A）。肝脏组织中，100 ppm 和 1000 ppm 处理组 MTTP 的表达上调，分别增加约 2.3 倍和 2.1 倍（图 2.2 B）。
图 2.3 RT-qPCR 检测镉处理小鼠肝脏组织 HMGCR 和 Srebp2 mRNA 的表达Fig2.3 RT-qPCR detection of HMGCR and Srebp2 mRNA expression in mice liver with Cdtreatment*表示在统计学上有显著的差异（p<0.05），**表示在统计学上有非常显著的差异（p<0.01）。B 类Ⅰ型清道夫受体（SR-B1）是高密度脂蛋白（HDL）的配体，和低密度脂蛋白受体LDLR一样参与介导胆固醇转运。我们对肝脏组织中SR-B1 进行检测，发现与前期实验对低密度脂蛋白受体 LDLRmRNA 表达的检测结果相比，SR-B1的表达无明显变化（图 2.4A）。（图 2.4 B 来自季星岐镉诱导小鼠血清胆固醇增加及其分子机制的研究）
【参考文献】：
期刊论文
[1]溶酶体膜上的离子通道[J]. 曲莉丽,辛竞,仓春蕾. 中国科学:生命科学. 2017(01)
[2]Regulation of lysosomal ion homeostasis by channels and transporters[J]. Jian Xiong,Michael X.Zhu. Science China（Life Sciences）. 2016(08)
[3]土壤镉污染现状及其治理措施研究进展[J]. 卢红玲,肖光辉,刘青山,彭新德. 南方农业学报. 2014(11)
[4]LDL受体介导的血浆低密度脂蛋白胆固醇的内吞[J]. 范丽娟,李仲. 生命的化学. 2014(03)
[5]镉的应用和镉污染[J]. 邓玉良. 化学世界. 2012(11)
[6]镉毒性研究进展[J]. 刘莉莉,林岚,殷霄,陈润涛,罗巧,谢植伟,陈晓燕,蔡婷峰,陆丰荣. 中国职业医学. 2012(05)
[7]氧化应激在镉致大鼠肝细胞凋亡中的作用[J]. 汪纪仓,刘学忠,袁燕,裔传卉,卞建春,刘宗平. 中国农业科学. 2011(18)
[8]自噬与泛素化蛋白降解途径的分子机制及其功能[J]. 陈科,程汉华,周荣家. 遗传. 2012(01)
[9]土壤镉污染现状及危害研究进展[J]. 冉烈,李会合. 重庆文理学院学报(自然科学版). 2011(04)
[10]微粒体甘油三酯转运蛋白脂代谢作用及表达与调节[J]. 陈仕均,唐海蓉,王哲,孙玉成,邓俊良. 畜牧与兽医. 2008(03)
本文编号：3589977
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