苯并[a]芘和脂多糖联合作用对人脐静脉内皮细胞功能的影响及分子机制

发布时间：2023-05-07 07:38

　　目的:研究苯并[a]芘(BaP)联合脂多糖(LPS)对心血管内皮细胞功能的影响及其分子机制,为科学地评价大气多环芳烃(PAHs)及其微生物污染对公众心血管系统的影响提供基础科学数据。方法:以心血管生理或病理研究的模式细胞——人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为细胞模式,选择ET-1、eNOS、TF、PAI-1、IL-6、IL-8、MCP-1、IL-4、IL-10等表征内皮细胞功能及炎症状态的目标蛋白为生物标志物,分别采用酶联免疫吸附(ELISA)和免疫印迹(Western Blot)等技术,检测LPS和BaP单独或联合作用下上述目标蛋白的表达,以探讨LPS和BaP联合作用对心血管内皮细胞功能与炎症的影响,并选择AhR、NF-?B、p38、Erk1/2、JNK等信号通路的关键蛋白为目标来探讨其联合作用的分子机制。结果:(1)ELISA结果显示,LPS单独作用下,HUVEC细胞内IL-6、IL-8、MCP-1的表达显著上升;BaP单独作用下,IL-6和MCP-1的表达降低;LPS和BaP联合作用下,IL-6、IL-8和MCP-1的表达较LPS组降低,IL-4、IL10和ET-1的表达无明显变化...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
第2章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 LPS与PAHs
        2.1.2 细胞系
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 主要试剂与耗材
        2.1.5 主要试剂的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 ELISA检测IL-6、IL-8、MCP-1、IL-4 和IL-10的表达
        2.2.3 ELISA检测ET-1的表达
        2.2.4 Western Blot法检测eNOS、PAI-1、TF、AhR、NF-?B等蛋白的表达
    2.3 统计分析处理
第3章 结果
    3.1 LPS、BaP对内皮细胞炎症因子的影响
        3.1.1 LPS对IL-6、IL-8、MCP-1表达的影响
        3.1.2 BaP对IL-6、MCP-1表达的影响
        3.1.3 LPS、BaP联合作用对IL-6、IL-8、MCP-1、IL-4、IL-10表达的影响
        3.1.4 LPS、IYP联合作用对IL-8、MCP-1表达的影响
        3.1.5 LPS、NAP联合作用对IL-8、MCP-1表达的影响
    3.2 LPS、Ba P对内皮细胞功能相关蛋白的影响
    3.3 潜在的分子机制
        3.3.1 LPS、BaP对AhR蛋白表达的影响
        3.3.2 LPS、BaP对内皮细胞MAPK信号通路相关蛋白的影响
        3.3.3 LPS、BaP联合作用对IKKβ和NF-κB蛋白表达的影响
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
致谢



本文编号：3810571