线粒体损伤在镉诱导肝细胞凋亡和DNA损伤中的作用

发布时间：2024-11-02 14:56

　　 目的探讨活性氧(reactive oxidative species, ROS)介导的线粒体损伤在镉(cadmium, Cd)暴露诱导肝L02细胞凋亡和DNA损伤中的作用。方法以肝L02细胞为研究对象,利用0～90μmol/L的Cd处理细胞24 h,采用噻唑兰法检测Cd暴露对细胞生存率的影响;以0、20和40μmol/L的Cd染毒细胞24 h,分别采用克隆形成实验、流式细胞术、彗星实验、2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐非标记性氧化敏感的荧光探针、线粒体红色荧光探针(Mitotracker Red CMXRos)和10-N-壬基-吖啶橙等荧光探针标记、线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)、ATP测定试剂盒以及Western Blot等方法,检测Cd暴露对细胞克隆形成能力、细胞凋亡、DNA损伤、ROS水平、线粒体形态、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP/Δψm)、线粒体质量、ATP含量及相关蛋白的影响;利用90μmol/L抗氧化剂维生素C预处理细胞1 h后给予40μmol/L Cd处理细胞24 h,检测ROS水平、Δψm、线粒体质量、ATP...

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【部分图文】：

MitoTrackerRedCMXRos荧光探针标记的结果显示,Cd能够诱导线粒体发生明显的颗粒状改变,且随Cd处理剂量的增高,该现象更为显著(图4);对WesternBlot结果进行统计分析,如表3所示,胞浆cytc的蛋白水平随Cd处理剂量的增高而增高,伴随线粒体cyt....

由表3可见,随Cd处理浓度的增高,相对荧光强度(红光/绿光)显著降低,提示Cd可剂量依赖性降低线粒体膜电位。NAO荧光法检测结果显示,随Cd暴露剂量的增高,线粒体质量显著降低;且ATP的检测结果也表明,Cd引起细胞内ATP含量呈剂量依赖性降低,提示线粒体ATP的生成在Cd暴露的....

Cd作为一种具有强生物毒性的重金属污染物,不仅能够对机体的生殖、免疫及神经系统造成不同程度的损伤,还可破坏肝脏及肾脏的结构和功能。现有的研究结果表明,Cd通过线粒体途径和死亡受体途径诱导的细胞凋亡是其发挥生物毒性的主要原因,Cd可降低Bcl-2的表达和Δψm,促进凋亡诱导因子的释....

图5镉暴露诱导肝L02细胞内活性氧自由基大量蓄积表4维生素C预处理对镉暴露细胞线粒体功能的影响(xˉ±s)分组蛋白表达改变线粒体膜电位(红/绿)线粒体质量/%ATP/%胞浆细胞色素c线粒体细胞色素c对照组1.00±0.131.00±0.132.9....

本文编号：4009689