锌对体外海马神经细胞MEK/ERK信号通路的调控作用研究

发布时间：2024-11-03 14:26

　　 目的探讨锌对海马神经细胞MEK/ERK通路的调控机制。方法将原代培养乳鼠海马神经细胞分为3组。（1）对照组（Control组）:不加任何处理因素。（2）四吡啶甲基乙二胺[N,N,N',N'-tetrakis（2-pyridylmethyl）ethylenediamine,TPEN]干预组（TPEN组）:2μmol/L TPEN处理海马神经细胞24h,以诱导海马神经细胞缺锌。（3）TPEN+5μmol/L Zn组:同时加入终浓度为2μmol/L TPEN及5μmol/L的Zn SO4。采用Western-Blot法检测pMEK,perk,Total-MEK、Total-ERK蛋白表达;免疫荧光法检测细胞内[Ca²⁺]_i浓度;分子探针DCFH-DA检测细胞内活性氧（ROS）含量。结果 （1）与对照组比较,TPEN组海马神经细胞上清液中LDH活性明显升高（P<0.05）;加入5μmol/L Zn后LDH活性显著降低（P<0.05）。（2）与对照组比较,TPEN组pMEK及pERK蛋白表达均明显下降（P<0.05）;5μmol/L ...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试剂
    1.2 仪器
    1.3 细胞培养
        1.3.1 主要溶液配制:
        1.3.2 海马神经细胞培养过程:
    1.4 细胞分组及处理
    1.5 方法
        1.5.1 细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性测定:
        1.5.2 Western-Blot法检测p MEK、p ERK、Total-MEK、Total-ERK蛋白检测:
        1.5.3 细胞内[Ca2+]i浓度检测:
        1.5.4细胞内ROS水平检测:
    1.6 统计分析
2 结果
    2.1 缺锌对海马神经细胞上清液中LDH活性的影响(图1)
    2.2 缺锌对海马神经细胞p MEK及p ERK蛋白表达的影响(图2,3)
    2.3 缺锌对海马神经细胞内[Ca2+]i浓度的影响(图4)
    2.4缺锌对海马神经细胞内ROS水平的影响(图5)
3 讨论



本文编号：4011413