阿拉山口口岸常见媒介生物本底调查及携带病原谱检测研究

发布时间：2017-07-04 20:24

  本文关键词：阿拉山口口岸常见媒介生物本底调查及携带病原谱检测研究

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【摘要】：目的:对阿拉山口口岸地区常见的媒介生物鼠、蚤、蠓、蚊和蜱进行本底调查和虫媒病监测,建立口岸地区媒介生物“DNA条形码”物种鉴定平台,解析阿拉山口口岸地区鼠、蚤、蠓、蚊和蜱携带传染病病原谱,为阐述重要疾病在人-宿主-媒介中的传播机制和重要媒介源传染病跨种/跨境传播规律奠定基础,同时为口岸地区虫媒传播动物疫病的风险评估提供基础资料。方法:(1)采用鼠笼法、鼠夹法、网捕法、灯诱法、白布旗法和动物体表采集法等方法采集鼠、蚤、蠓、蚊和蜱。(2)采用形态学、分子生物学方法对采集的媒介生物进行种类鉴定,并进行基因序列系统发育分析。(3)采用血清学和分子生物学技术对非洲猪瘟、蓝舌病、水泡性口炎、莱姆病、无形体和埃立克体等虫媒病进行病原检测,对PCR阳性产物进行测序并登录Genbank数据库Blast分析,使用Mega 6.0构建分子遗传进化树,进行系统发育分析。结果:(1)采集鼠类样本4属9种384只,蚤类7种431只,蠓1属1种24017只,蚊4属10种27128只,蜱2科5属8种1336只。(2)分析并获取灰仓鼠和子午沙鼠COI基因序列,大沙鼠、灰仓鼠和西伯利亚五趾跳鼠16S r RNA基因序列,臀突客蚤线粒体COI和COII基因序列,凶小库蚊16S r RNA和ITS基因序列,里海伊蚊16S r RNA、28S r RNA和Cytb基因序列;短垫血蜱的16S r DNA,COI,12Sr RNA,ITS基因序列,且分子生物学鉴定结果与形态学鉴定不符。(3)大沙鼠嗜吞噬细胞无形体核酸阳性率为3.39%;42.9%的臀突客蚤中检测到未定型的立克次体核酸;凶小库蚊沃尔巴克氏体核酸检出率为3.33%;在蜱中检测到伯氏疏螺旋体、埃立克体、无形体、斑点热群立克次体、Q热和巴贝斯虫核酸,阳性率分别为45.44%、14.95%、11.26%、12.04%、17.48%和12.82%。结论:(1)在阿拉山口口岸地区首次采集到迷走按蚊、阿拉斯加脉毛蚊、带棒按蚊、图兰扇头蜱和囊形扇头蜱。大沙鼠、臀突客蚤、原野库蠓、凶小库蚊、亚洲璃眼蜱和边缘革蜱为优势种。(2)鼠、蚤、蚊和蜱进行分子信息研究,其中灰仓鼠和子午沙鼠COI基因序列,大沙鼠、灰仓鼠和西伯利亚五趾跳鼠16S r RNA基因序列,臀突客蚤线粒体COI和COII基因部分序列,凶小库蚊16S r RNA和ITS基因序列,里海伊蚊16S r RNA、28S r RNA和Cytb基因序列和短垫血蜱的16S r DNA、COI、12Sr RNA、ITS基因序列信息在国际上首次进行报道。(3)在阿拉山口口岸检测到沃尔巴克氏体、嗜吞噬粒细胞无形体、伯氏疏螺旋体、绵羊无形体、未定型埃立克体、Q热、饶氏立克次体、隐藏巴贝斯虫、弩巴贝斯虫和未定型巴贝斯虫核酸。在短垫血蜱中检测到嗜吞噬细胞无形体、饶氏立克次体和未定型的巴贝斯虫,提示虎鼬可能是无形体、立克次体和巴贝斯虫的潜在宿主。(4)阿拉山口口岸地区存在多种虫媒病,为多种虫媒病的自然疫源地,对野生动物、候鸟和旅客造成潜在危害。
【关键词】：媒介生物 本底调查 虫媒病 疾病监测 PCR
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R181.8;S851.3
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-12
• 主要符号表12-14
• 前言14-16
• 第一章 媒介生物的分类学研究及虫媒病综述16-28
• 1 媒介生物的鉴定方法16-18
• 1.1 形态学鉴定16
• 1.2 同工酶分析16
• 1.3 气相色谱法16
• 1.4 质谱法16-17
• 1.5 分子生物学技术17-18
• 1.6 其他分子生物学技术18
• 2 常见的虫媒病18-23
• 2.1 非洲猪瘟18-19
• 2.2 蓝舌病19
• 2.3 水泡性口炎19
• 2.4 疟疾19-20
• 2.5 登革热20
• 2.6 寨卡病毒病20
• 2.7 鼠疫20
• 2.8 土拉菌病20-21
• 2.9 新疆出血热21
• 2.10 莱姆病21
• 2.11 Q热21
• 2.12 斑点热21
• 2.13 无形体病21-22
• 2.14 埃立克体病22
• 2.15 巴贝斯虫病22-23
• 参考文献23-28
• 第二章 鼠的本底调查及鼠传疾病的检测28-44
• 1 材料与方法28-34
• 1.1 鼠样采集28
• 1.2 采样工具和用品28-29
• 1.3 监测方法29
• 1.4 主要仪器设备29
• 1.5 主要试剂29
• 1.6 形态学鉴定29
• 1.7 分子生物学鉴定29-33
• 1.8 鼠传病原检测33-34
• 2 结果34-42
• 2.1 鼠类样本采集结果34
• 2.2 季节消长规律34
• 2.3 形态学鉴定结果34
• 2.4 分子生物学鉴定结果34-40
• 2.5 鼠传疾病监测结果40-42
• 3 讨论42-43
• 参考文献43-44
• 第三章 蚤的本底调查及蚤传疾病的检测44-54
• 1 材料与方法44-47
• 1.1 蚤样采集44
• 1.2 采样工具和用品44-45
• 1.3 监测方法45
• 1.4 主要仪器设备45
• 1.5 主要试剂45
• 1.6 形态学鉴定45
• 1.7 分子生物学鉴定45-46
• 1.8 蚤传病原检测46-47
• 2 结果47-51
• 2.1 蚤类样本采集结果47
• 2.2 形态学鉴定结果47
• 2.3 分子生物学鉴定结果47-49
• 2.4 蚤传疾病监测结果49-51
• 3 讨论51-53
• 参考文献53-54
• 第四章 蠓的本底监测与蠓传疾病的检测54-63
• 1 材料与方法54-58
• 1.1 蠓样采集54
• 1.2 采样工具和用品54-55
• 1.3 监测方法55
• 1.4 牛血和羊血样本采集55
• 1.5 主要仪器设备55
• 1.6 主要试剂55
• 1.7 形态学鉴定55
• 1.8 蓝舌病检测55-58
• 2 结果58-60
• 2.1 蠓类样本采集结果58
• 2.2 蠓季节消长规律58
• 2.3 蠓形态学鉴定结果58-59
• 2.4 蓝舌病RT-PCR检测结果59
• 2.5 蓝舌病实时RT-PCR检测结果59
• 2.6 蓝舌病B-ELISA抗体检测结果59-60
• 3 讨论60-62
• 参考文献62-63
• 第五章 蚊的本底调查和蚊传病的检测63-78
• 1 材料与方法63-67
• 1.1 蚊样采集63-64
• 1.2 采样工具和用品64
• 1.3 监测方法64
• 1.4 牛血和羊血样本采集64
• 1.5 主要仪器设备64
• 1.6 主要试剂64
• 1.7 形态学鉴定64-65
• 1.8 分子生物学鉴定65
• 1.9 蚊传病原检测65-67
• 2 结果67-73
• 2.1 蚊类样本采集结果67
• 2.2 蚊虫季节消长规律67
• 2.3 蚊虫形态学鉴定结果67
• 2.4 分子生物学鉴定结果67-72
• 2.5 蚊传疾病监测72-73
• 3 讨论73-76
• 参考文献76-78
• 第六章 蜱的本底调查和蜱传疾病的检测78-108
• 1 材料与方法78-84
• 1.1 蜱样本采集78-79
• 1.2 监测工具和用品79
• 1.3 标本制作及鉴定用具79
• 1.4 个人防护用品79
• 1.5 消毒器械及用品79
• 1.6 主要仪器79
• 1.7 主要试剂79
• 1.8 形态学鉴定79
• 1.9 猪血液样本采集79-80
• 1.10 旅客截留物采集80
• 1.11 分子生物学鉴定80
• 1.12 蜱传疾病检测80-82
• 1.13 非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测82
• 1.14 非洲猪瘟病毒Elisa检测82-84
• 2 结果84-98
• 2.1 蜱类样本采集结果84
• 2.2 蜱季节消长规律84
• 2.3 蜱形态学鉴定结果84
• 2.4 蜱分子生物学鉴定84-86
• 2.5 遗传进化树分析86-90
• 2.6 遗传距离分析90-91
• 2.7 蜱传疾病监测91-98
• 3 讨论98-103
• 参考文献103-108
• 结论108
• 创新点108-109
• 附录109-118
• 1. 鼠的形态学鉴定照片109-111
• 2. 蚤的形态学鉴定照片111-112
• 3. 蠓的形态学鉴定照片112-114
• 4. 蚊的形态学鉴定照片114-115
• 5. 蜱的形态学鉴定照片115-118
• 致谢118-119
• 作者简介119-121
• 导师评阅表121

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本文编号：519233