三聚氰胺免疫层析试纸的研制和应用

发布时间：2017-10-04 09:33

  本文关键词：三聚氰胺免疫层析试纸的研制和应用

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【摘要】：在生物医学和食品安全的领域中,我们有时需要对某些特定的物质进行检测。截止到目前,已知的检测方法有很多种,主要分为传统检测方法和试纸检测法。传统检测的方法主要是利用一些仪器,人工操作完成检测任务,而试纸检测法则是通过应用免疫层析技术来达到检测的目的。免疫层析试纸检测技术和传统的检测方法相比具有简单、方便、快捷的优点。现如今,免疫层析试纸检测技术因其独特的优势已成为生物医学领域和食品安全检测的有效手段。本文成功制备了胶体金,并以胶体金标记三聚氰胺单克隆抗体,在免疫层析技术的基础上成功研制出三聚氰胺胶体金免疫层析试纸。 本实验的主要目的和意义是研制一种特异性强、灵敏度高,且操作简单方便,对样品经过简单处理即可进行检测的快速试纸检测方法。在实验中通过改变柠檬酸钠的加入量制备出不同粒径的金颗粒,最终选择出质量报告良好的胶体金颗粒,并将其作为标记物偶联三聚氰胺单克隆抗体。分别把三聚氰胺／OVA的偶联物和羊抗鼠IgG点在硝酸纤维素膜(NC)上作为检测线(T线)和质控线(C线),制作成免疫层析试剂条。将该试纸条对三聚氰胺溶液进行加标,检测,观察结果。三聚氰胺胶体金免疫层析试纸条的检测灵敏度较高,特异性和稳定性良好,可长期保存使用。
【关键词】：三聚氰胺 偶联物 胶体金 免疫层析 试纸检测
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R155.5
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-9
• 1 引言9-13
• 1.1 三聚氰胺简介9
• 1.2 胶体金免疫层析技术简介9-12
• 1.2.1 胶体金的制备10
• 1.2.2 胶体金的结构特点10-11
• 1.2.3 胶体金的性质11
• 1.2.4 胶体金作为标记物的优势11
• 1.2.5 胶体金免疫层析技术的原理11-12
• 1.2.6 胶体金免疫层析技术的优点及应用发展12
• 1.3 本文主要研究的内容和目的12-13
• 2 三聚氰胺胶体金免疫层析试纸条的研制及应用13-28
• 2.1 主要试剂和材料13
• 2.2 主要仪器13-14
• 2.3 实验过程14-17
• 2.3.1 胶体金的制备14-15
• 2.3.2 金标单抗的制备15-16
• 2.3.2.1 金探针标记单抗的原理15
• 2.3.2.2 金标单抗的制备方法15-16
• 2.3.3 胶金垫的制作16
• 2.3.4 试纸条的制作16-17
• 2.3.5 胶体金免疫层析试纸卡的制作17
• 2.4 结果分析17-28
• 2.4.1 胶体金的质量鉴定17-20
• 2.4.1.1 肉眼观察17-18
• 2.4.1.2 紫外-分光光度计扫描鉴定18-19
• 2.4.1.3 粒径分布19-20
• 2.4.2 胶体金鉴定结果20-23
• 2.4.2.1 目测结果20-21
• 2.4.2.2 紫外扫描鉴定21
• 2.4.2.3 粒度分布鉴定21-22
• 2.4.2.4 原子力显微镜观察22-23
• 2.4.2.5 浓度计算23
• 2.4.3 金标单抗的质量鉴定及与金标液的对比23-25
• 2.4.3.1 紫外-分光光度计扫描鉴定23-24
• 2.4.3.2 金标单抗粒径分布24-25
• 2.4.4 试纸卡试验25-28
• 2.4.4.1 二抗和偶联物的选择25
• 2.4.4.2 试验结果及判定依据25-26
• 2.4.4.3 特异性检测26-27
• 2.4.4.4 灵敏度检测27-28
• 2.4.4.5 稳定性检测28
• 3 讨论28
• 4 结论28-29
• 5 展望29-30
• 致谢30-31
• 参考文献31-34
• 作者简介34

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 许媛媛;边超;陈绍凤;夏善红;;基于微机电系统技术和纳米金自组装膜的安培型免疫传感器研究[J];分析化学;2006年05期

2 何艳玲;林松;王陆迪;唐慧林;刘振;王静;李瑾;;胶体金免疫层析法检测水产品中O_1群霍乱弧菌方法的建立与优化[J];中国国境卫生检疫杂志;2007年01期

3 焦Z，

本文编号：969909