四重PCR检测副溶血性弧菌及其毒力基因方法的建立

发布时间：2017-10-08 00:14

  本文关键词：四重PCR检测副溶血性弧菌及其毒力基因方法的建立

  更多相关文章： 副溶血性弧菌 四重PCR toxR基因 tdh基因 trh基因 tlh基因

【摘要】：【目的】建立同时检测副溶血性弧菌tox R、tdh、trh、tlh基因的四重PCR快速检测方法。【方法】分别以副溶血性弧菌的tox R、tdh、trh、tlh 4个基因为靶基因,设计4对特异性引物,对4对引物浓度和退火温度进行优化,获得最佳引物比例和扩增条件,建立快速检测致病性副溶血性弧菌的四重PCR体系。通过特异性验证、灵敏度验证以及模拟样品检测进行方法确认。【结果】四重PCR体系扩增条带与预期相符,即115 bp(tox R)、244 bp(tdh)、418 bp(trh)、759 bp(tlh)4个目的条带;用74株副溶血性弧菌和37株非目标菌的测试结果表明,所建立的方法有良好的特异性。该方法对模板DNA的检测灵敏度为50μg/L,纯培养物的检测灵敏度为6.7×103 CFU/m L;副溶血性弧菌含量为1.36 CFU/g的人工模拟样品增菌6 h后,tox R、tlh、tdh、trh 4个基因可同时被检出。【结论】该方法可实现同时检测携带tox R、tdh、trh、tlh 4种基因的副溶血性弧菌,对开展致病性副溶血性弧菌的检测研究具有一定现实意义。
【作者单位】： 集美大学食品与生物工程学院;厦门市食品科技研发检测中心;厦门市疾病预防控制中心;
【关键词】： 副溶血性弧菌 四重PCR toxR基因 tdh基因 trh基因 tlh基因
【基金】：福建省自然科学基金项目(No.2015J01614) 厦门市海洋经济创新发展区域示范项目(No.13PZP002SF24)~~
【分类号】：R155.5
【正文快照】： 副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是在海洋环境中自然存在的一种嗜盐革兰氏阴性细菌,能够在不同的盐度及不同的温度环境中生存[1-2]。它广泛存在于海口、江口以及浮游生物、鱼类、虾类、贝类等水产品中[3-4],是沿海国家普遍存在的食源性致病菌之一[5-9]。副溶血性弧

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 丁珊珊;杨振泉;李宝利;潘志明;焦新安;;柠檬酸和温度联合处理对海水鱼中副溶血性弧菌的杀灭作用[J];中国人兽共患病学报;2013年02期

2 高围n，

本文编号：990889