常见嗜尸性蝇类蛹壳样品在种属分子鉴定中的应用

发布时间：2018-03-04 10:04

  本文选题：嗜尸性蝇类　切入点：蛹壳　出处：《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》2015年01期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的探讨常见嗜尸性蝇类蛹壳样品在法医昆虫学种属鉴定中的应用价值。方法收集不同保存时间的嗜尸性蝇类成虫及其羽化后的蛹壳成套样品共55套,根据形态学特征鉴定为2科6属8种。以不同保存时间,将上述样品分为2年组(n=23)、2~5年组(n=20)和5年组(n=12)。取单个成蝇胸部和空蛹壳,以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取各样品mt DNA,并测定其浓度和纯度。PCR扩增COⅠ基因,获得COⅠ基因序列Ⅰ和Ⅱ,分别截取498 bp和841 bp的序列。在Gen Bank数据库对所获序列作BLAST搜索,进行同源性比对分析。结果所有样品均成功提取了mt DNA。保存时间≤5年的成虫胸肌和2年的空蛹壳DNA浓度多在1.0~3.0μg/μl之间,A260/A280值多在1.6~1.8之间。保存时间5年的成虫胸肌和≥2年的空蛹壳DNA浓度多低于1.0μg/μl,A260/A280值多低于1.6。随着样品保存时间的延长,各样品DNA浓度均明显下降(P0.01)。保存时间2年,成虫胸部样品和空蛹壳样品均成功扩增出COⅠ序列Ⅰ和序列Ⅱ。随着保存时间的延长,扩增成功率明显下降,序列Ⅱ表现更为明显(P0.01)。8种嗜尸性蝇类COⅠ基因序列Ⅰ和序列Ⅱ分别有6个和7个种属的同源性比对结果完全正确且样品序列比对的Max ident值均97%。结论嗜尸性蝇类空蛹壳样品可作为mt DNA提取和种属比对的检材。
[Abstract]:Objective to investigate the application value of the pupae shell samples of common necrophilic flies in the identification of forensic entomological species. Methods 55 complete sets of adult and pupa shell samples were collected for different preservation times. According to the morphological characteristics, the samples were identified as 2 families, 6 genera and 8 species. The above samples were divided into 2 groups (2 years, 2 ~ 5 years) and 5 years, respectively. The single adult fly chest and empty pupa shell were obtained. Cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) method was used to extract the mt DNA of each sample. The CO 鈪，

本文编号：1565178