穴位注射人参总皂甙对运动性疲劳大鼠肝保护的机制研究

发布时间：2019-11-19 18:06

【摘要】：研究目的：建立运动性疲劳动物模型,观察肝形态结构、血清ALT、AST含量评价肝损伤保护效果,从肝自由基、乳酸和糖原代谢,从肝细胞凋亡机制着手,探讨穴位(足三里和内关)注射人参总皂甙对运动性疲劳大鼠肝保护的机制。研究方法：将24只大鼠随机分为空白组(0.2 mL生理盐水穴位注射)、模型组(0.2 mL生理盐水穴位注射)和人参总皂甙穴位注射组(0.2 mL人参总皂甙穴位注射)等3组。空白组大鼠常规饮食和作息,模型组和穴位注射组均以“高60cm、直径55cm,水深50cm,水温33±2℃”的塑料圆桶为游泳槽,进行2天适应症性训练,从实验第3天开始正式实验。每天穴位注射给药一次,穴位为足三里和内关(单侧),隔天交替,注1h后,除空白组大鼠外,模型组和穴位注射组大鼠每天早上游泳训练2次,每次自由游泳15min,中间擦干休息10min,连续训练21天。为保证游泳训练的运动负荷,以木棍及时驱赶扒在桶池壁边缘或其他大鼠身上休息的大鼠。为确保大鼠安全,当其出现力竭状态时,则停止其游泳训练。于末次运动后,在运动训练大鼠完成运动训练后的2h内,处死各组大鼠：①取血,分离血清,-80℃保存,备用,便于谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量的检测；②剖腹：取肝脏左叶组织适量(每只大鼠均为同一部位取材),-80℃下冻存,备用,便于肝总抗氧化能力(T-AOC),肝丙二醛(MDA)、乳酸(LA)、一氧化氮(NO)和葡萄糖(Glu)含量,肝乳酸脱氢酶(LDH)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Caspase-3和Caspase-8活性的检测。③取肝脏右叶组织适量(每只大鼠均为同一部位),浸泡于10%福尔马林中固定24 h,进行HE染色,光镜下观察肝组织病理改变。研究结果：1.空白组大鼠肝小叶形态结构正常,汇管区形态完整,未见变性和坏死,单个肝细胞核膜完整,核清晰、呈圆形或椭圆形,胞内可见小脂滴,细胞线粒体形态正常,内嵴结构完整,粗面内质网排列均匀整齐；而模型组大鼠肝组织内出现点状、碎片状细胞,单个肝细胞出现胞浆疏松不均、气球样性变,提示存在坏死及炎性细胞浸润的病理状态；穴位注射人参总皂甙组大鼠肝组织病变程度相对较轻,介于空白组和模型组之间。2.与空白组比较,模型组和穴位注射人参总皂甙组大鼠血清ALT、AST含量均有显著性增加(均有p0.01)；与模型组比较,穴位注射人参总皂甙组大鼠血清ALT、AST含量均有显著性减少(均有p0.01)3.与空白组比较,模型组和穴位注射人参总皂甙组大鼠肝MDA含量和T-AOC活性均有显著性增加(均有p0.01)；与模型比较,穴位注射人参总皂甙组大鼠肝MDA含量和T-AOC活性均有显著性降低(均有p0.01)。4.与空白组比较,模型组大鼠肝乳酸含量和乳酸脱氢酶活性均显著性增加、肝糖原含量显著性减少(均有p0.01),穴位注射人参总皂甙组大鼠肝乳酸含量显著增加(p0.01),但肝乳酸脱氢酶活性和肝糖原含量均无著性差异(均有p0.05)；与模型组比较,穴位注射人参总皂甙组大鼠肝乳酸含量和乳酸脱氢酶活性均有显著降低(均有p0.01),肝糖原含量显著性增加(p0.01)5.与空白组比较,模型组和穴位注射人参总皂甙组大鼠肝NO含量,iNOS、 caspase-3和caspase-8活性均有显著性增加(均有p0.01)；与模型比较,穴位注射人参总皂甙组大鼠肝NO含量,iNOS、caspase-3和caspase-8活性均有显著性降低(均有p0.01)。结论：1.以“高60cm、直径55cm,水深50cm,水温33±2℃的塑料圆桶作为大鼠游泳槽,使SD成年雄性大鼠每天进行游泳训练2次,每次自由游泳15min,中间擦干休息10min,连续训练21天,在大鼠游泳训练中,用木棍及时驱赶扒在桶池壁边缘或其他大鼠身上休息的大鼠,当其出现力竭状态时,则停止其游泳训练”为造模方法,可以复制成功运动性疲劳动物(大鼠)模型。2.足三里和内关隔天交替,单侧,穴位注射人参总皂甙,能达到抗疲劳疗效,能使运动性疲劳大鼠血清ALT、AST含量均有显著性减少,经HE染色后,大鼠肝小叶可见,汇管区形态更完整,变性和坏死较少,单个肝细胞膜、细胞核和细胞质等结构相对完好,大鼠肝组织病变得到有效改善。3.穴位注射人参总皂甙对运动性疲劳大鼠肝保护的机制可能是,纠正肝糖原和乳酸代谢异常情况,减轻肝自由基损伤,下调iNOS,调节NO成量,终止caspase-3和caspase-8的激活,调控肝细胞凋亡
【图文】：

Ｃ１穴位组Ｘ４００逦Ｃ２穴位组Ｘ２００逦Ｃ３穴位组Ｘ１００逡逑图１各组大鼠肝形态结构逡逑．２各姐大鼠血清ＡＬＴ和ＡＳＴ含量的动态变化逡逑由表１可知，与空白组比较，模型组和穴位注射组大鼠血清ＡＬＴ、ＡＳＴ含著性增加（均有ｐＯ．Ｏｌ）；与模型组比较，穴位注射组大鼠血清ＡＬＴ、ＡＳＴ显著性减少（均有ｐ＜０．０１）。逡逑表１各组大鼠血清ＡＬＴ和ＡＳＴ含量的动态变化（ｎ＝８，，Ｓ）逡逑分}D逦ＡＬＴ／邋Ｕ邋？邋Ｌ—１逦ＡＳＴ／邋Ｕ邋．邋Ｌ—ｉ逡逑空白组逦１０７．９２５邋＋邋８．２６７逦１９９．８２５邋＋邋１０．６４０逡逑模型}D邋２４４．６１２＋１５．６７１＊＊逦２Ｓ＞２．９５０±邋１３．６４６＊＊逡逑穴位组邋１７５．４３８邋＋邋１１．７４２＊＊＃＃逦２４３．２３８邋＋邋１１．３７７＊＊＃＃逡逑注：与空白组相比，＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１；与模型组相比，＃ｐ＜０．０５，邋＃＃ｐ＜０．０１。逡逑．３各组大鼠巧Ｔ－ＡＯＣ活性和ＭＤＡ含量比较逡逑由表２可知，与空白组比较，模型组和穴位注射组大鼠肝Ｔ－ＡＯＣ活性、ＭＤ
【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R87

【参考文献】

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1 闫生;冯韶文;;运动性疲劳与细胞凋亡研究综述[J];北京体育大学学报;2007年S1期

2 张继红;焦晓明;;针剌手厥阴心包经穴对力竭大鼠心肌过氧化损伤的保护作用[J];湘南学院学报;2007年05期

3 由文华;何胜;;益智仁水提取物对运动训练小鼠肝组织自由基代谢和超微结构的影响[J];第四军医大学学报;2007年23期

4 冯毅

本文编号：2563178