BNIP3在CO中毒后少突胶质细胞的caspase依赖线粒体凋亡途径中的作用研究
发布时间:2020-11-11 13:59
为探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2和腺病毒E1B19 000相互作用蛋白3(B cell lymphoma/lewkmia-2 and adenovirus E1B19 000 interacting protein 3,BNIP3)在一氧化碳中毒引起的少突胶质细胞凋亡中的可能作用机制,选用C57BL/6小鼠建立一氧化碳中毒模型,40只雄性小鼠完全随机分为5组(n=8):正常对照组(不给予CO气体)、CO染毒后1d组,CO染毒后3 d组,CO染毒后7 d组,CO染毒后14 d组(CO染毒组均给予2 500~3 000 ppm CO气体,40min)。通过免疫组织化学染色方法和蛋白免疫印迹法检测小鼠脑组织内髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)和少突胶质细胞转录因子2(oligodendrocyte transcription factor2,Olig2)的表达,评价一氧化碳中毒后的髓鞘脱失及少突胶质细胞死亡程度;通过tunel凋亡相关检测及透射电镜证实少突胶质细胞的凋亡;采用蛋白免疫印迹技术检测小鼠脑白质部位BNIP3蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 Associated X Protein,Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cysteinyl aspartate specific proteinase9,caspase 9)的表达情况。与对照组相比,MBP在染毒后1 d表达开始降低(P0.05),3 d后表达持续降低(P0.01),7 d后降至最低(P0.01),直至14 d后其表达有所回升(P0.05),但仍低于对照组。采用蛋白免疫印迹法进行MBP的表达变化分析,与对照组比较,1 d组开始降低(P0.01),3 d组持续降低(P0.01),7 d组降到最低(P0.01),14 d组有一定恢复(P0.01)。Olig2在一氧化碳染毒3 d后表达较对照组升高显著(P0.01);与对照组比较,蛋白免疫印迹中3d组显著升高(P0.01)。采用tunel凋亡相关检测胼胝体区凋亡细胞的阳性数百分比,与对照组比较,1 d组开始升高(P0.01),3 d组持续升高(P0.01),7 d组凋亡最明显(P0.01),14 d组凋亡阳性细胞百分比同样高于对照组(P0.01)。透射电镜结果显示胼胝体区少突胶质细胞在一氧化碳染毒后存在凋亡现象。与对照组相比,BNIP3在染毒后1 d组表达量明显增高(P0.01),在3 d后开始降低(P0.01),至14 d后恢复正常(P0.05)。与对照组相比,Bax在染毒后1 d组表达明显增加(P0.01),随后的3 d(P0.01)和7 d组(P0.05)开始降低,至14 d组恢复正常(P0.05)。与对照组相比,caspase9在染毒后1 d组明显增加(P0.01),3 d后降低(P0.01),7 d后恢复正常(P0.05),其表达变化趋势与BNIP3基本相同。综上所述,BNIP3参与了CO中毒引起的少突胶质细胞caspase依赖性线粒体凋亡途径。
【学位单位】:河北北方学院
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2018
【中图分类】:D919
【文章目录】:
中文摘要
英文摘要
缩略词表
前言
材料与方法
结果
附图
附表
讨论
结论
参考文献
综述 急性一氧化碳中毒迟发型脑病发病机制的研究进展
参考文献
致谢
个人简历
【参考文献】
本文编号:2879275
【学位单位】:河北北方学院
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