氡影响皮肤组织蛋白质-miRNA调控网络的机制研究

发布时间：2020-11-15 06:12

　　 目的:流行病学研究表明:氡与皮肤癌等皮肤相关疾病的发生具有相关性。但氡对于皮肤组织影响及机理尚未见报道。本研究旨在研究氡对于皮肤组织和细胞的影响及分子网络变化。方法:通过建立染氡小鼠及皮肤成纤维细胞(WS1)模型,探究染氡对于皮肤组织及WS1细胞的影响,筛选皮肤组织差异蛋白和mi RNA,并通过体外实验研究差异蛋白对皮肤细胞WS1生物学功能影响。(1)利用多功能生态氡室和多功能生态细胞气体染毒装置建立氡染毒小鼠(BALB/c和C57小鼠)模型和细胞染氡模型。通过对不同染氡剂量小鼠皮肤组织的HE染色、β-半乳糖苷酶染色、Masson染色,观察小鼠皮肤组织损伤变化。通过对染氡细胞WS1的形态学观察、MTT检测、凋亡检测、细胞周期检测和细胞核染色,观察皮肤细胞染氡后的变化;(2)收集染氡小鼠模型的皮肤组织蛋白,通过同位素标记相对和绝对定量(i TRAQ)技术和HPLC/MS技术,对对照组/染氡皮肤组织进行分析。通过数据库搜索,对差异蛋白进行生物信息学分析;(3)采用mi RNA芯片筛选对照组/染氡皮肤组织中差异表达的mi RNA。(4)研究mi RNA对脂肪酸合成酶(FASN)的表达调控;(5)研究表达FASN对皮肤细胞生物功能的影响。结果:(1)染氡能够引起小鼠皮肤组织的损伤,包括角质层变薄和缺损、皮肤组织的衰老以及皮肤组织内线粒体的肿胀形态变化;(2)染氡能够抑制皮肤细胞WS1的增殖,增加细胞凋亡率,使细胞核形态发生变化,产生固缩和破碎;(3)通过蛋白组学,筛选出了3496个差异蛋白,其中上调超过1.8倍的45个,下调低于0.83的83个。筛选可能参与染氡对小鼠皮肤组织影响的上调蛋白:脂肪酸合成酶FASN;(4)通过mi RNA分析和靶基因预测,筛选出了57个差异mi RNA和5907个下游靶基因。通过Target Scan数据库筛选出下调mi R206-3p和mi R378a-3p;(5)通过生物信息学分析建立了染氡后差异蛋白质和mi RNA的相互作用网络。差异表达的mi R206-3p和mi R378a-3p能调控脂肪酸合成酶(FASN)的表达。过表达FASN对皮肤细胞WS1增殖产生了抑制,引起了细胞周期S期的阻滞,同时还增加了细胞凋亡率和破坏了细胞核形态。结论:氡能够引起皮肤组织和细胞的变化甚至损伤,影响其生物学功能;氡能引起的皮肤组织一系列的蛋白质和mi RNA差异变化;差异表达的mi R206-3p和mi R378a-3p能调控FASN的表达;过表达差异蛋白FASN能够影响皮肤细胞增殖,增加凋亡等。
【学位单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R818
【部分图文】：

miRNA加工过程

将 transwell 培养皿置于细胞气体染毒装置染毒，见图 2。对细胞直接染毒，膜下方通过培养基保持细胞湿润。氧气浓mL/min，染毒时间为 30min，暴露氡浓度为 20000Bq/m3。1 代（记作 HR-1）。收集细胞常规培养，进行下一代染毒。

同剂量的氡染毒后，小鼠皮肤组织真皮组织及毛囊等皮肤附属结构依然清晰。但随着染氡剂量的增加，皮肤组织表皮逐渐变现了明显的肿胀，在 120WLM 的 BALB/c 小鼠皮肤组中，甚至失（图 1.1.1 箭头所示）。同样的角质层变薄的现象也出现在了
【参考文献】

相关期刊论文 前4条

1 苗超,仲恒高,孙静,聂继华,苏世标,童建;氡及其子体对小鼠血液和骨髓细胞的影响[J];中国血液流变学杂志;2005年02期

2 李冰燕,童建;氡及其子体对大鼠靶器官损伤的研究[J];卫生毒理学杂志;2004年03期

3 李冰燕,童建;氡及其子体对大鼠免疫器官的影响[J];中华放射医学与防护杂志;2004年03期

4 ;Mitochondrial microsatellite instability in gastric cancer and its precancerous lesions[J];World Journal of Gastroenterology;2004年06期

本文编号：2884438