炎症激活骨髓间充质干细胞条件培养基对体外辐射损伤小肠上皮细胞的修复作用和机制研究
发布时间：2021-11-11 23:44
背景辐射性小肠损伤多发生于腹腔、盆腔恶性肿瘤放射治疗后,临床表现为腹痛、腹泻、血便、营养不良,严重可出现脓毒血症、感染性休克等危及生命的并发症,严重影响肿瘤患者的生存质量。然而,对于辐射性小肠损伤,目前仍无理想的治疗方法。间充质干细胞具有强大的自身分化及旁分泌能力,广泛用于组织损伤修复。间充质干细胞培养基（conditioned medium from mesenchymal stem cells,MSC-CM）富含间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）旁分泌的生物活性因子,且无干细胞移植的风险,是干细胞移植的理想替代方案。课题组前期研究表明炎症预激活的间充质干细胞条件培养基能促进辐射损伤小肠组织学结构和功能的修复,改善急性辐射损伤大鼠生存状态,但其潜在的细胞机制未进一步探讨。目的明确不同状态MSC-CM对小肠上皮细胞（IEC-6）增殖、凋亡的影响及探讨相关旁分泌机制,为优化MSC-CM的临床应用提供理论基础和实验室依据。方法1.小肠隐窝IEC-6细胞分为对照组、辐射损伤组、辐射损伤+MSC-CMIEC-6（NOR）组和辐射损伤+MSC-CMIEC-6（...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１各实验组ＩＥＣ－６细胞在辐射处理后不同时间段活细胞计数情况??
ＩＥＣ－６细胞的ＰＣＮＡ阳性细胞数明显增加，差异有显著性意义（Ｐ＜?０．０５）；??而辐射损伤＋ＭＳＣ－ＣＭｉｅｃ％６（ｎｑｒ＞组ＰＣＮＡ阳性细胞数比辐射损伤组虽然有所增加，??但未达到统计学差异，见图２。??Ａ?ＰＣＮＡ?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??ｉ?：?｜?－Ｖ＇．＇＂＇．?；?Ｉ；?；：．＾?Ｉ?Ｉ对照结??对照组?翻员伤组??［；５；＂１－，＿－?；；?｜?ｊ［?「ｉＭ｜?＿德１?辐射损伤＋ＭＳＣ－ＣＭＩＥＩ＾＿■组??Ｂ?＾■福射损伤＋ＭＳＣ－ＣＭＩＥＣ－？＜ｉＲ＞ｍ??ＢＫ｜ＨｈＨ?■??｜?；．?．?賴）｜?Ｉ?二顏擊顏１１．，?ｆ?翻爾：！｜?■?ｉ〇〇??ＭＳＣ－??＇；＇ｎ＞，ｒ＞＾ｈ??ＭＢＭＭｉＢＭＢｊＭ?２０?｜??￥ｉ＾＾＋ＭＳＣ－Ｐ：?ｉ??图２：?ＭＳＣ－ＣＭＩＥｅ＿６（ＩＲ）促进辐射损伤ＩＥＣ－６增殖??Ｆｉｇ?２?ＭＳＣ－ＣＭｉｅｃ?＿６（ＩＲ）?ｉｎｃｒｅａｓｅｓ?ｔｈｅ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ?ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｒａｄｉａｔｉｏｎ??ｉｎｊｕｒｙ??图注．？图２?（Ａ）为辐射损伤后第三天各组ＩＥＣ－６细胞ＰＣＮＡ染色情况，标尺为５０网。??图２（Ｂ）为ＰＣＮＡ阳性细胞数目，每个孔随机观察１０个视野，每一组重复３个孔。统计平均??每个视野的阳性细胞数，与辐射损伤组比，＞＜〇．〇５；与辐射损伤＋ＭＳＣ－ＣＭ１Ｅｅ＿６（ＮＣ）Ｒ＞组比，??１，尸＜０．０５〇??２．３原位末端标记法（Ｔｕｎｅｌ）及Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ法检测细胞凋亡??２
未见统计学差异（户＞０．０５）。＼＼＾沉１１８１〇１；检测显不，福射损伤组＃Γ悼冢常常叮常?车鞍祝崳?表达水平较对照组显著升高（Ｐ＜〇．〇５），辐射损伤＋ＭＳＣ－ＣＭＩＥｅ＇６（ＩＲ＞Ｓ，而非辐射??损伤＋ＭＳＣ－ＣＭＩＥｅ■６（ＩＮＧＲ＞组，Ｃａｓｐａｓｅｓ－３蛋白表达较辐射损伤组显著降低，差异??有显著性意义（Ｆ＜?０．０５），见图３。??Ａ?Ｔｕｎｅｌ?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??■■■??■■?■脚；＋Ｍｓｃ－ｃＭ＿＿ｍ??，■：?ｊ?！］？?Ｓ?＾?Ｉ＇?＇?；?ｖ．?（?Ｊ?ｊ｜?Ｂ?？ｆ＞?－ＭＳＣ－ＣＭ１?＇??｜ｊ｜＾Ｅ＾＾ＱＪ｜?｜?１５??＊??ＭＳＣ－ＣＭ＇＂?＇?＊?Ｉ?■?｜?＾?：Ｅ？；?＾＂＇ｊ｜?Ｉ?’．’Ｉｆ?Ｉ?＿??－＊??ＭＳＣ－ＣＭ１?丨，■丨丨■?１?ｒ－?｜?ｒ?；?ｊｊ?？?Ｖ??ｉ；，？ｆｉ．．?Ｈ?￥ＭＷ＾：＾＋ＭＳＣ－ＣＭｉｅｃ＇６＜ｎｏｒ，？１Ｉ??Ｃ?ＣＭｉｅｃ？丄，ＣＭｌｆｃｉ，、ＩＫ：：?Ｄ?■?■?１?’?’ＳＣＣＭ??Ｔ??Ｃａｓｐａｓｅ－３?＾?一州‘彳????！ｊ＿ｌｌｉ??图３?ＭＳＣ－ＣＭＩＥｅ＿６（ＩＲ＿制辐射损伤ＩＥＣ－６细胞凋亡??Ｆｉｇ３?ＭＳＣ－ＣＭｉｅｃ＂６（ＩＲ）?ｒｅｄｕｃｅｓ?ｔｈｅ?
【参考文献】：
期刊论文
[1]炎症诱导骨髓间充质干细胞条件培养基修复急性辐射引起的小肠上皮干细胞损伤[J]. 马发鑫,沙卫红,王启仪,李金亮,卢铨,骆昱均. 中国组织工程研究. 2019(09)
[2]炎症激活骨髓间充质干细胞条件培养基对辐射损伤IEC-6细胞的修复[J]. 李金亮,骆昱均,马发鑫,郑跃,卢铨,周伟杰,张宸,沙卫红,陈浩. 中国组织工程研究. 2019(05)
[3]间充质干细胞在器官移植中的应用研究进展[J]. 曲泽澎,贾兆锋,黄曦,蔡志明,牟丽莎. 器官移植. 2018(05)
[4]间充质干细胞移植促进放射性肠损伤肠绒毛的结构修复[J]. 王彦,郭梦征,徐畅,杜利清,龚伟,刘强. 重庆医学. 2018(17)
[5]缺氧诱导骨髓间充质干细胞条件培养基体外修复辐射损伤小肠上皮细胞变化[J]. 郑跃,陈浩,沙卫红,王启仪,刘婉薇. 中国组织工程研究. 2015(45)
[6]谷氨酰胺对新生鼠坏死性小肠结肠炎增殖细胞核抗原的影响[J]. 邓庆先,贺湘英,黄永坤,文革生,袁新华,林梅芳,富琴琴,蒋琦. 临床儿科杂志. 2015(03)
[7]炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基修复小肠黏膜急性辐射损伤[J]. 刘婉薇,陈韵,郑跃,沙卫红,王启仪,叶山亮,陈浩. 中国组织工程研究. 2015(10)
[8]New insights for pelvic radiation disease treatment:Multipotent stromal cell is a promise mainstay treatment for the restoration of abdominopelvic severe chronic damages induced by radiotherapy[J]. Alain Chapel,Sabine Francois,Marc Benderitter,Luc Douay,Jan Voswinkel. World Journal of Stem Cells. 2013(04)
[9]放射性肠炎发生机制的研究进展[J]. 李荣富,孙涛. 医学综述. 2011(02)
[10]IL-2对辐射损伤后小肠上皮细胞生长影响的实验研究[J]. 付凯飞,彭瑞云,高亚兵,王德文,罗庆良,杨怡,董波. 细胞与分子免疫学杂志. 2005(02)
本文编号：3489771
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１各实验组ＩＥＣ－６细胞在辐射处理后不同时间段活细胞计数情况??
ＩＥＣ－６细胞的ＰＣＮＡ阳性细胞数明显增加，差异有显著性意义（Ｐ＜?０．０５）；??而辐射损伤＋ＭＳＣ－ＣＭｉｅｃ％６（ｎｑｒ＞组ＰＣＮＡ阳性细胞数比辐射损伤组虽然有所增加，??但未达到统计学差异，见图２。??Ａ?ＰＣＮＡ?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??ｉ?：?｜?－Ｖ＇．＇＂＇．?；?Ｉ；?；：．＾?Ｉ?Ｉ对照结??对照组?翻员伤组??［；５；＂１－，＿－?；；?｜?ｊ［?「ｉＭ｜?＿德１?辐射损伤＋ＭＳＣ－ＣＭＩＥＩ＾＿■组??Ｂ?＾■福射损伤＋ＭＳＣ－ＣＭＩＥＣ－？＜ｉＲ＞ｍ??ＢＫ｜ＨｈＨ?■??｜?；．?．?賴）｜?Ｉ?二顏擊顏１１．，?ｆ?翻爾：！｜?■?ｉ〇〇??ＭＳＣ－??＇；＇ｎ＞，ｒ＞＾ｈ??ＭＢＭＭｉＢＭＢｊＭ?２０?｜??￥ｉ＾＾＋ＭＳＣ－Ｐ：?ｉ??图２：?ＭＳＣ－ＣＭＩＥｅ＿６（ＩＲ）促进辐射损伤ＩＥＣ－６增殖??Ｆｉｇ?２?ＭＳＣ－ＣＭｉｅｃ?＿６（ＩＲ）?ｉｎｃｒｅａｓｅｓ?ｔｈｅ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ?ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｒａｄｉａｔｉｏｎ??ｉｎｊｕｒｙ??图注．？图２?（Ａ）为辐射损伤后第三天各组ＩＥＣ－６细胞ＰＣＮＡ染色情况，标尺为５０网。??图２（Ｂ）为ＰＣＮＡ阳性细胞数目，每个孔随机观察１０个视野，每一组重复３个孔。统计平均??每个视野的阳性细胞数，与辐射损伤组比，＞＜〇．〇５；与辐射损伤＋ＭＳＣ－ＣＭ１Ｅｅ＿６（ＮＣ）Ｒ＞组比，??１，尸＜０．０５〇??２．３原位末端标记法（Ｔｕｎｅｌ）及Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ法检测细胞凋亡??２
未见统计学差异（户＞０．０５）。＼＼＾沉１１８１〇１；检测显不，福射损伤组＃Γ悼冢常常叮常?车鞍祝崳?表达水平较对照组显著升高（Ｐ＜〇．〇５），辐射损伤＋ＭＳＣ－ＣＭＩＥｅ＇６（ＩＲ＞Ｓ，而非辐射??损伤＋ＭＳＣ－ＣＭＩＥｅ■６（ＩＮＧＲ＞组，Ｃａｓｐａｓｅｓ－３蛋白表达较辐射损伤组显著降低，差异??有显著性意义（Ｆ＜?０．０５），见图３。??Ａ?Ｔｕｎｅｌ?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??■■■??■■?■脚；＋Ｍｓｃ－ｃＭ＿＿ｍ??，■：?ｊ?！］？?Ｓ?＾?Ｉ＇?＇?；?ｖ．?（?Ｊ?ｊ｜?Ｂ?？ｆ＞?－ＭＳＣ－ＣＭ１?＇??｜ｊ｜＾Ｅ＾＾ＱＪ｜?｜?１５??＊??ＭＳＣ－ＣＭ＇＂?＇?＊?Ｉ?■?｜?＾?：Ｅ？；?＾＂＇ｊ｜?Ｉ?’．’Ｉｆ?Ｉ?＿??－＊??ＭＳＣ－ＣＭ１?丨，■丨丨■?１?ｒ－?｜?ｒ?；?ｊｊ?？?Ｖ??ｉ；，？ｆｉ．．?Ｈ?￥ＭＷ＾：＾＋ＭＳＣ－ＣＭｉｅｃ＇６＜ｎｏｒ，？１Ｉ??Ｃ?ＣＭｉｅｃ？丄，ＣＭｌｆｃｉ，、ＩＫ：：?Ｄ?■?■?１?’?’ＳＣＣＭ??Ｔ??Ｃａｓｐａｓｅ－３?＾?一州‘彳????！ｊ＿ｌｌｉ??图３?ＭＳＣ－ＣＭＩＥｅ＿６（ＩＲ＿制辐射损伤ＩＥＣ－６细胞凋亡??Ｆｉｇ３?ＭＳＣ－ＣＭｉｅｃ＂６（ＩＲ）?ｒｅｄｕｃｅｓ?ｔｈｅ?
【参考文献】：
期刊论文
[1]炎症诱导骨髓间充质干细胞条件培养基修复急性辐射引起的小肠上皮干细胞损伤[J]. 马发鑫,沙卫红,王启仪,李金亮,卢铨,骆昱均. 中国组织工程研究. 2019(09)
[2]炎症激活骨髓间充质干细胞条件培养基对辐射损伤IEC-6细胞的修复[J]. 李金亮,骆昱均,马发鑫,郑跃,卢铨,周伟杰,张宸,沙卫红,陈浩. 中国组织工程研究. 2019(05)
[3]间充质干细胞在器官移植中的应用研究进展[J]. 曲泽澎,贾兆锋,黄曦,蔡志明,牟丽莎. 器官移植. 2018(05)
[4]间充质干细胞移植促进放射性肠损伤肠绒毛的结构修复[J]. 王彦,郭梦征,徐畅,杜利清,龚伟,刘强. 重庆医学. 2018(17)
[5]缺氧诱导骨髓间充质干细胞条件培养基体外修复辐射损伤小肠上皮细胞变化[J]. 郑跃,陈浩,沙卫红,王启仪,刘婉薇. 中国组织工程研究. 2015(45)
[6]谷氨酰胺对新生鼠坏死性小肠结肠炎增殖细胞核抗原的影响[J]. 邓庆先,贺湘英,黄永坤,文革生,袁新华,林梅芳,富琴琴,蒋琦. 临床儿科杂志. 2015(03)
[7]炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基修复小肠黏膜急性辐射损伤[J]. 刘婉薇,陈韵,郑跃,沙卫红,王启仪,叶山亮,陈浩. 中国组织工程研究. 2015(10)
[8]New insights for pelvic radiation disease treatment:Multipotent stromal cell is a promise mainstay treatment for the restoration of abdominopelvic severe chronic damages induced by radiotherapy[J]. Alain Chapel,Sabine Francois,Marc Benderitter,Luc Douay,Jan Voswinkel. World Journal of Stem Cells. 2013(04)
[9]放射性肠炎发生机制的研究进展[J]. 李荣富,孙涛. 医学综述. 2011(02)
[10]IL-2对辐射损伤后小肠上皮细胞生长影响的实验研究[J]. 付凯飞,彭瑞云,高亚兵,王德文,罗庆良,杨怡,董波. 细胞与分子免疫学杂志. 2005(02)
本文编号：3489771
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yundongyixue/3489771.html
最近更新
教材专著
