模拟微重力对改良纤维蛋白胶软骨细胞复合物培养影响的研究

发布时间：2022-07-16 16:53

　　运动损伤以及骨关节炎导致的关节软骨缺损、退变已严重影响运动成绩和生活质量，而修复、重建缺损的关节软骨一直是困扰创伤骨科和矫形外科的难题。近年来，组织工程学发展，使体外构建组织工程化软骨成为可能，为修复、重建关节软骨缺损开辟了新途径。由于关节软骨组织在体内所处的力学环境对其生长、发育和功能的维持有着重要的作用，因此，寻找最优的体外培养环境来提高工程化软骨的质量，使其更接近于天然软骨，成为目前研究的热点。目的：本实验通过利用旋转培养仪进行软骨细胞模拟微重力培养，观察模拟微重力对软骨细胞．改良纤维蛋白胶支架复合物构建的影响，为更好修复、重建关节软骨缺损提供实验依据。 方法：1．取3周龄新西兰白兔膝关节软骨进行单层培养扩增，收集4代以内的软骨细胞作为种子细胞。2．在纤维蛋白胶中加入适宜比例的纤溶酶抑制剂（抑肽酶、氨甲环酸）制备改良纤维蛋白胶支架。3．将种子细胞以1x10~6／ml密度接种于支架内，构建软骨细胞．改良纤维蛋白胶支架复合物。4．将复合物分成两组：旋转培养组和静态对照组。旋转培养组利用旋转培养仪进行模拟微重力培养；静态对照组在12孔板中静止培养，均连续培养3周。5．在3周内，每... 

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
1 前言(INTRODUCTION)
2 研究依据(RESEARCH EVIDENCE)
    2.1 组织工程学技术概述
    2.2 软骨细胞体外分离和培养技术
    2.3 支架材料
        2.3.1 支架材料的选择
        2.3.2 纤维蛋白胶支架
        2.3.3 改良纤维蛋白胶支架
    2.4 培养模式
        2.4.1 微重力反应器的设计开发及其结构、原理
        2.4.2 微重力反应器的应用
3 研究目的和意义(INTENTION AND SIGNIFICANCE)
4 研究的创新之处(RESEARCH INNOVATION)
5 实验设计与结果(EXPERIMENT DESIGN AND RESULTS)
    5.1 实验材料(MATERIALS)
        5.1.1 主要实验仪器设备
        5.1.2 主要试剂
    5.2 实验方法(METHODS)
        5.2.1 试剂配制
        5.2.2 软骨细胞消化分离与体外培养
        5.2.3 软骨细胞及软骨细胞-纤维蛋白胶复合物体外培养观测指标
    5.3 实验结果(RESULTS)
        5.3.1 复合物大体观察及湿重测量
        5.3.2 组织形态学观察:
            5.3.2.1 单层软骨细胞体外传代培养倒置显微镜观察
            5.3.2.2分组复合物中软骨细胞生长状况:
        5.3.3 生化检测
6 讨论(DISCUSSION)
    6.1 细胞-支架复合物建立
    6.2 静态、动态两种培养模式的比较
        6.2.1 旋转培养对复合物的组织形态学影响
        6.2.2 旋转培养对复合物生理功能的影响
    6.3 改良纤维蛋白胶作为软骨细胞旋转培养支架的适用性
    6.4 旋转培养对复合物影响的机制探讨
7 结论(CONCLUSION)
8 实验难点(EXPERIMENT DIFFICULTIES)
9 实验建议和展望(ADVICE AND PROSPECT)
参考文献(REFERENCES)
致谢(ACKNOWLEDGEMENTS)
附页(APPENDIX)
文献综述(REVIEW)



本文编号：3662895