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不同条件下核酸样本制备的质量控制和参数建立

发布时间:2023-02-18 13:51
  现代某些遗传学研究领域,如法医学分析,出生前或植入前诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD),或致瘤因子检测中,DNA分析通常只是针对小量细胞甚至单个细胞。有限的基因组DNA(genomic DNA,gDNA)即通常所说的低拷贝数(low copy number,LCN)DNA常常限制这些检测的敏感性。另一方面,临床实践和法医学实践中由于种种外界条件的限制,长期以来在生物样本中,获得理想的高质量的DNA一直是个难题。DNA常受光、热、湿度、温度、微生物等多种因素的影响而发生降解。因此,DNA的质和量是影响DNA分析的两个重要因素。 福尔马林固定、石蜡包埋组织(formalin fixed and parafiin embedded,FFPE)是现在运用最广的用于回顾性研究的材料。一般认为,从福尔马林固定的组织样本中分离出的DNA常成高度降解状态,平均片段大小在60-200bp之间。DNA的降解可发生于组织准备、福尔马林固定和石蜡包埋的不同阶段,这对于DNA检测的敏感性会产生不利影响。通常大于300bp的扩增片段较难在石蜡包埋组织进行基因表达研究...

【文章页数】:79 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
缩略语
中文摘要
英文摘要
正文
    前言
    仪器和试剂材料
    第一部分 建立微量DNA检测细胞系标准
    第二部分 对肿瘤细胞系DNA的检测及应用
    第三部分 福尔马林固定石蜡包埋组织中DNA的质量分析
    讨论
    结论
    参考文献
综述1
综述2
致谢



本文编号:3745090

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