地塞米松影响骨骼发育的斑马鱼模型的建立

  本文关键词：地塞米松影响骨骼发育的斑马鱼模型的建立，，由笔耕文化传播整理发布。

药学学报 A c t a P h a r ma c e u t i c a S i n i c a 2 0 1 3, 4 8 ( 2 ): 2 5 5— 2 6 0

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研究论文

地塞米松影响骨骼发育的斑马鱼模型的建立 韦英杰，,王长梅一，蔡雪婷，詹扬一，贾晓斌， ( 1 .江苏省中医药研究院中药新型给药系统重点实验室，国家中医药管理局中药口服释药系统重点研究室， 江苏南京 2 1 0 0 2 8; 2 .江苏大学药学院，江苏镇江 2 1 2 0 1 3 )

摘要：本文首次采用斑马鱼模型动物，以糖皮质激素地塞米松为模型药，以建立一种快速、高效的骨质疏松

新模型。将受精后 4天 ( 4 d p D的斑马鱼幼鱼暴露于不同浓度地塞米松溶液中，设阴性 ( 0 . 5%D MS O )对照组， 2 8 . 5℃下在 2 4孔板中培养至 9 d p f,至斑马鱼头部骨骼形成。并用此模型观察依替膦酸二钠对斑马鱼头骨矿化 的影响及对 1 0 g mo l L 地塞米松诱导的斑马鱼骨质疏松的防治作用。采用茜素红对培养 9天的斑马鱼骨骼进

行染色，以显微检测、数码成像方法定量分析骨骼染色区域。结果显示：与阴性对照组相比，地塞米松 f 2 . 5、1 0 和 2 5 g mo l L )组的斑马鱼头部骨骼染色面积和染色光密度值显著减少；依替膦酸二钠 ( 1 5及 3 0 g mL )能增加斑马鱼头骨矿化量并有效防止地塞米松诱导斑马鱼产生的骨质疏松。结果提示，地塞米松使斑马鱼头骨骼

矿化量和骨密度显著降低，成功诱导斑马鱼产生骨质疏松。该模型亦成功验证依替膦酸二钠能防止骨质疏松的 作用。 关键词：斑马鱼；地塞米松；依替膦酸二钠；骨质疏松中图分类号： R9 6 5 文献标识码： A文章编号： 0 5 1 3 . 4 8 7 0( 2 0 1 3 ) 0 2 . 0 2 5 5 . 0 6

Es t a b l i s hm e n t o f z e br a is f h o s t e o pe n i a mo de l i n du c e d b y de x a me t ha s o n e WE I Y i n g - j i e ,, WA N G C h a n g— me i , , C A I X u e - t i n g , Z H A N Y a n g , , J I A X i a o— b i n ' r .

K e yL a b o r a t o r y o f Ne wDr u gDe l i v e yS r y s t e m o fC h i n e s e Ma t e r i aMe d i c a, J i a n g s uP r o v i n c i a l Ac a d e m y o fC h i n e s e Me d i c i n e, Na n j i n g 2 1 0 0 2 8, C h i n a,￣2 . De p a r t me n t o f P h a r ma c e u t i c s, J i a n g s u U n i v e r s i t y, Z h e n j i a n g 2 1 2 0 1 3, C h i n a ) Abs t r a c t: Ze b r a is f h wa s s e l e c t e d a s mo d e l a n i ma 1 . a n d g l uc o c o r t i c o i d d e x a me t ha s o ne wa s u s e d a s a mo d e l c o mp o u n d t o e s t a b l i s h a r a p i d a n d h i g h e ic f i e n t o s t e o p e n i a mo d e 1 . Ze b r a f i s h l a r v a e a t 4 d a y s p o s t f e r t i l i z a t i o n

( d p f ) we r e e x p o s e d t o a s e r i a l c o n c e n t r a t i o n s o f d e x a me t h a s o n e s o l u t i o n s . a n d 0 . 5% DM S 0 wa s s e l e c t e d a s t h e

v e h i c l e c o n t r o l g r o u p .A l l g r o u p s w e r e i n c u b a t e d i n 2 4 - w e l l p l a t e s ( 2 8 . 5℃) u n t i l 9 d p￡ I n a d d i t i o n, e f f e c t s of 1 0 g mo l L 1 d e x a me t h a s o n e o n p r e v e n t i n g a g a i ns t o s t e o p e n i a i n d u c e d b y e t i d r o n a t e d i s o d i u m we r e a l s o

i n v e s t i g a t e d . Z e b r a i f s h b o n e s a t 9 d p f

we r e s t a i n e d wi t h a l i z a r i n r e d . Q u a n t i t a t i v e a n a l y s i s o f t h e s t a i n e d a r e a wa s p e r f o r me d b y mi c r o s c o p i c i n s p e c t i o n n d a d i g i t a l i ma g i n g me t h o d s t o r e le f c t t he a mo u n t o f b o n e mi n e r a l i z a t i o n . Re s u l t s s h o we d t h a t d e x a me t h a s o n e g r o u p a t 2. 5,1 0 a n d 25 g mo l L c a n d e c r e a s e t h e s t a i ni n g

a r e a a n d t h e s t a i n i n g o p t i c a l d e n s i t y v a l u e s o f z e b r a is f h h e a d b o ne s whe n c o mpa r e d wi t h t h e v e h i c l e c o n t r ol

g r o u p( 0 . 5% DMS O ), wh i c h s u g g e s t e d t h a t d e x a me t h a s o n e c a n s i g n i i f c a n t l y r e d u c e t h e z e b r a f i s h mi n e r a l i z e d bo n e a n d t h e b o ne mi n e r a l d e ns i t y . Re s ul t s a l s o s h o we d t h a t 1 5 a n d 3 0 g mL e t i d r o n a t e d i s o d i u m c a n i n c r e a s e t h e mi n e r a l i z e d ma t r i x o f z e b r a is f h h e a d b o ne a n d p r e v e n t a g a i n s t o s t e o p e n i a i n d u c e d b y d e x a me t h a s o n e I n c o n e l us i o n . t h e s t u d y i n d i c a t e d ha t t z e b r a f i s h c a n b e a n i d e a

o s t e o p e n i a mo d e l i n d u c e d b y d e x a me t h a s o n e . Ke y wo r d s: z e b r a is f h; d e x a me t h a s o n e; e t i d r o n a t e d i s o d i u m; o s t e o p e ni a

收稿日期： 2 0 1 2 . 0 8— 0 9;修回日期： 2 0 1 2 - 1 0 - 0 5 . 基金项目：国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 9 7 3 9 7 8 );江苏省自然科学基金资助项目( B K 2 0 1 1 8 6 6 )

通讯作者 T e l/ F a x: 8 6 - 2 5— 8 5 6 3 7 8 0 9, E— ma i l: w y j 9 7 0@1 6 3 . t o m T e l: 8 6— 2 5— 8 5 6 0 8 6 7 2, F a x: 8 6— 2 5 - 8 5 6 3 7 8 0 9, E— ma i l: j x i a o b i n 2 0 0 5@h o t ma i l . t o m

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