三氧化二砷纳米粒对人乳腺癌MGF-7细胞的体外抗肿瘤作用研究

发布时间：2017-05-21 13:08

  本文关键词：三氧化二砷纳米粒对人乳腺癌MGF-7细胞的体外抗肿瘤作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[目的]乳腺癌是危害女性生命健康的常见恶性肿瘤,严重影响了女性的生活质量和健康。三氧化二砷作为化学辅助治疗乳腺癌的重要药物,近年来受到越来越多学者的关注与研究。纳米给药系统因其具有缓释、靶向、降低肿瘤多药耐药性的产生等多种优点,被作为一种新型的载药系统应用到抗肿瘤药物的研究中。本实验选择三氧化二砷纳米粒为模型药物,主要考察其对人乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒性作用、对细胞周期的影响、对诱导细胞凋亡作用的影响以及MCF-7细胞对三氧化二砷纳米粒摄取情况的分析,探究以纳米粒为载体的三氧化二砷药物在体外对乳腺癌MCF-7细胞的抗肿瘤作用效果。为此药物将来进一步的实验研究和临床应用提供初步依据。[方法]采用MTT法测定不同浓度游离三氧化二砷药物、空白纳米粒、三氧化二砷纳米粒对人乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒作用；采用PI单染流式细胞术检测三氧化二砷纳米粒各细胞周期细胞比例；采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测三氧化二砷纳米粒诱导细胞凋亡的作用；运用荧光显微镜对MCF-7细胞摄取三氧化二砷纳米粒定性分析,运用流式细胞仪对影响摄取结果的因素进行定量分析。[结果]作用24h后,游离药物对细胞生长的抑制率大于相同浓度下的三氧化二砷纳米粒药物,作用48h后,游离药物对细胞生长的抑制率小于相同浓度下三氧化二砷纳米粒药物；当给药浓度分别为1μg/mL、3μg/mL时,三氧化二砷纳米粒作用24h后,G0/G1期细胞所占比例随着浓度增加而增加,S期细胞所占比例随着浓度增加而下降；三氧化二砷纳米粒作用48h后,G0/G1期细胞所占比例随浓度增加而增加更明显,S期细胞所占比例随浓度增加而降低更明显；当给药浓度分别为1μg/mL、3μg/mL时，三氧化二砷纳米粒作用24h后,随着浓度的增高,对诱导细胞凋亡率逐渐升高；作用48h后,诱导细胞凋亡率也随浓度增高而升高,并且均高于相同浓度下作用24h后的凋亡率；荧光显微镜显示MCF-7细胞对三氧化二砷纳米粒发生了摄取,且流式细胞仪定量显示：随着用药剂量的增加细胞对药物的摄取率增加,随着温度的升高,细胞对药物的摄取率增加,随着作用时间的增加,细胞对药物的摄取率增加。[结论]纳米粒作为载体显示无细胞毒性,对细胞生长不产生抑制作用；三氧化二砷纳米粒具有缓释作用,其细胞毒性与药物剂量、用药时间呈正相关；三氧化二砷纳米粒通过诱导细胞周期阻滞于G0/G1期,发挥了抑制细胞增殖的作用；三氧化二砷纳米粒在诱导细胞凋亡方面,细胞凋亡率表现出了与用药剂量、用药时间正相关的关系；人乳腺癌MCF-7细胞对三氧化二砷纳米粒的摄取率也表现出了与用药剂量、温度、用药时间呈正相关的趋势,还能说明MCF-7对药物具有主动转运的过程,此过程需要消耗能量。
【关键词】：三氧化二砷纳米粒 细胞毒 细胞周期 细胞凋亡 细胞摄取
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R96
【目录】：

• 缩略语表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 引言10-11
• 文献综述11-21
• 第一章 三氧化二砷纳米粒的细胞毒性研究21-32
• 1 实验仪器与材料21
• 1.1 实验仪器与试剂21
• 1.2 实验用药21
• 1.3 细胞株21
• 2 实验方法21-25
• 2.1 实验溶液的配制21-22
• 2.2 细胞培养22-23
• 2.3 细胞生长曲线测定23-24
• 2.4 细胞毒性试验24
• 2.5 细胞形态学观察24-25
• 2.6 统计学方法25
• 3 实验结果25-31
• 3.1 细胞生长曲线的绘制25-26
• 3.2 细胞毒性实验结果26-30
• 3.3 As_2O_3-EGF-NP对细胞形态学的影响30-31
• 4 小结与讨论31-32
• 第二章 三氧化二砷纳米粒对细胞周期的影响32-37
• 1 材料与细胞32
• 1.1 仪器和试剂32
• 2 实验方法32-33
• 2.1 细胞样品的准备32-33
• 2.2 统计学方法33
• 3 实验结果33-36
• 3.1 三氧化二砷纳米粒作用24h后结果33-35
• 3.2 三氧化二砷纳米粒作用48h后结果35-36
• 4 小结与讨论36-37
• 第三章 三氧化二砷纳米粒诱导细胞凋亡的研究37-43
• 1 实验原理37
• 2 材料与细胞37-38
• 2.1 仪器和试剂37-38
• 2.2 细胞38
• 3 实验方法38-39
• 3.1 细胞样品制备38
• 3.2 凋亡试剂处理细胞样品38
• 3.3 统计学方法38-39
• 4 实验结果39-41
• 4.1 不同浓度的三氧化二砷纳米粒作用24小时结果39-40
• 4.2 不同浓度的三氧化二砷纳米粒作用48小时结果40
• 4.3 细胞凋亡率与时间、As_2O_3-EGF-NP浓度的关系40-41
• 5 小结与讨论41-43
• 第四章 三氧化二砷纳米粒的细胞摄取研究43-50
• 1 材料与细胞43
• 1.1 仪器与试剂43
• 1.2 细胞43
• 2 实验方法43-44
• 2.1 FITC标记的As_2O_3-EGF-NP的制备43-44
• 2.2 荧光显微镜检测细胞摄取实验44
• 2.3 流式细胞仪检测细胞摄取实验44
• 3 实验结果44-49
• 3.1 荧光显微镜检测细胞摄取实验结果44-45
• 3.2 流式细胞仪检测细胞摄取实验结果45-49
• 4 小结与讨论49-50
• 结论50-51
• 参考文献51-56
• 致谢56-57
• 发表论文情况57-60
• 个人简历60

【参考文献】

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本文编号：383729