北沙参镇咳祛痰的药效物质基础及质量标准研究

发布时间：2020-03-19 12:06

【摘要】：北沙参为伞形科植物珊瑚菜(Glehnia littoralis Fr.Schmidt ex Miq)的干燥根,为传统常用中药材和蒙药材之一,用于肺热燥咳,劳嗽痰血,胃阴不足,热病津伤,咽干口渴等。市场上北沙参来源种类繁多,但尚无统一的质量控制标准,导致产品的质量参差不齐。《中国药典》2015年版一部仅规定北沙参的【来源】、【性状】、【显微鉴别】(横切面组织特征)项,而药材的【检查】与【浸出物】、【薄层色谱鉴别】及【含量测定】等项目缺失。为进一步完善北沙参的质量标准,本研究对北沙参镇咳祛痰的药效物质基础展开研究,并建立简便、科学、可控的质量标准体系。1.北沙参镇咳祛痰活性评价研究本研究采用氨水引咳法和气管酚红排泄法小鼠实验,对北沙参总提物及其石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位的镇咳、祛痰作用进行了比较研究,结果表明北沙参的总提取物、石油醚部位和乙酸乙酯部位可显著的减少小鼠咳嗽次数,而乙酸乙酯部位和正丁醇部位可显著的增加小鼠酚红排泄量,表明北沙参的总提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位具有明显的镇咳作用,乙酸乙酯部位和正丁醇部位有明显的祛痰作用。此外,还对北沙参总提取物及其各萃取部位进行了HPLC指纹图谱与其镇咳、祛痰药效学的关联性分析,结果表明高效液相色谱中保留时间在22.5~40 min区域色谱峰可能是北沙参镇咳作用的主要有效成分,而保留时间在5.5~22.5 min区域色谱峰可能是北沙参祛痰作用的主要有效成分,该结果为后期实验寻找镇咳、祛痰的指标性成分有重要的指导性作用。本实验结果为北沙参镇咳、祛痰的药效物质基础阐明和质量评价指标的选择提供了科学依据。2.北沙参镇咳祛痰有效部位的化学成分研究本研究运用硅胶、凝胶、制备HPLC等柱色谱进行分离纯化,采用NMR、UV、IR、MS等波谱技术并与相关文献进行比较,从北沙参镇咳祛痰有效部位中分离并鉴定了16个已知化合物,包括1个β-卡巴林生物碱(1-3)、4个苯丙素(4-7),5个酚酸(8-12),3个聚乙炔(13-15)和1个脂肪酸(16)。进一步对上述分离得到的16个单体化合物进行了系统的化学分类学探讨。3.北沙参质量标准研究本研究对北沙参的薄层色谱、指纹图谱、水分、灰分、浸出物、法卡林醇含量进行了测定并规范了相应操作规范,建立了北沙参的质量标准。方法:对北沙参提取工艺及方法学考察七个方面进行了探索研究,建立了北沙参薄层色谱鉴定的方法;指纹图谱采用高效液相法,对现有的30批北沙参药材进行提取工艺和方法学考察,采用国家药典委员会规定的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版对不同来源、不同批次的30批北沙参药材测定结果进行分析;参照《中国药典》2015版4部规定,对北沙参水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇浸出物、水浸出物进行了测定;以法卡林醇为指标成分对不同来源30批次北沙参药材进行含量测定,使各检查项更完善、更规范、更科学。结果:建立不同产地的北沙参药材的化学指纹图谱,比较我们看出,不仅是河北、内蒙、山东三个主产地之间的药材存在明显差异,同一个地区的药材之间差异性也非常显著;按照《中国药典》药材质量标准制定的技术要求,建立了北沙参的质量标准,形成了《北沙参质量标准草案》:(1)建立了北沙参TLC鉴别方法;(2)规定了北沙参各【检查】项的限度:水分不得过11.0%,总灰分不得过3.9%,酸不溶性灰分不得过0.3%,醇浸出物不得少于10.0%,水浸出物不得少于25.0%。(3)建立了北沙参中法卡林醇的含量测定方法,制定了限量规定:本品按干燥品计算,含法卡林醇(C_(17)H_(24)0)不得少于0.05%(去皮)或0.11%(不去皮)。结论:以上研究为北沙参质量标准的研究提供科学依据。
【图文】：

北沙参,部位,内乡,回收溶剂

光光度计（日本岛津公司）。清（枸橼酸喷托维林片，上海全宇生物科技内乡制药有限公司，；氯化铵、浓氨水、碳酸氢钠（均购自西陇化工股份有限公司，批17、131011、120219）。提取物的制备的北沙参药材 10.0 kg、粉碎、依次用 8 倍量体积分数为 80 %和 40%、过滤、合并滤液、减压回收得到北沙参的总浸膏 BSS 总（2.14kg4.4 g，剩余的样品（2.04kg）溶于水中（2.5 L），，依次用等体积的石和正丁醇萃取 5 次，减压回收溶剂分别得到石油醚部位（BSS-A, 58部位（BSS-B, 22.5 g）、正丁醇部位（BSS-C, 121.1 g）和水溶性部位（。详细见图 2-1：

HPLC指纹图谱,北沙参,HPLC指纹图谱,色谱峰

2 0.24±0.07石油醚部位 1 0.14±0.062 0.32±0.05*乙酸乙酯部位 1 0.32±0.09*2 0.36±0.10**正丁醇部位 1 0.57±0.17**2 0.28±0.08水部位 1 0.33±0.09*2 0.31±0.09*注：与正常组比较 *P＜ 0.05，**P＜0.016.3 北沙参总提取物及各萃取部位的 HPLC 指纹图谱结合表 1-1、表 1-2 和图 1-1 可知，在保留时间为 5.5~21.5 min 色谱峰可能是北沙参祛痰作用的主要有效成分，而保留时间为 25~30 min 色谱峰可能是北沙参镇咳作用的主要有效成分。
【学位授予单位】：江西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R284.1;R285.5

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