参苓白术散加味对骨癌痛小鼠AKT、P70S6的影响研究

发布时间：2020-03-23 21:16

【摘要】：目的:观察参苓白术散加味复方对骨癌痛小鼠内AKT、P70S6表达的影响,明确参苓白术散加味复方治疗骨癌痛的疗效并探讨其可能的作用机制。方法:雄性BALB/c小鼠58只,随机抽取9只为正常组,其余49只建立肺癌骨转移癌痛模型,造模过程中有4只死亡,其余45只模型小鼠按随机数字表法,分为模型组,参苓白术散加味高、中、低剂量组,雷帕霉素组,总共5组,每组9只;正常组、模型组正常饲养;参苓白术散加味高、中、低剂量组分别于造模后第6周每只小鼠每天0.4ml灌胃,连续7天;雷帕霉素组造模后第6周按4mg/kg剂量腹腔给药,每天一次,连续7天。通过行为学观察、HE染色、疼痛行为学检测评估造模;Tunel染色观察肿瘤细胞调亡;免疫组化、Western blot检测各组小鼠胫骨中AKT、P70S6蛋白表达。结果:1.根据各组小鼠行为学变化,正常组及模型组HE病理检测对比,以及造模前、造模后小鼠疼痛行为学对比结果提示模型建立成功。2.给药后疼痛行为学检测结果显示,与模型组相比,参苓白术散加味中、低剂量组及雷帕霉素组小鼠疼痛阈值明显升高(P0.01)。雷帕霉素组与中、低剂量组相比,差异无统计学意义(P0.05)。3.给药后HE检测显示:参苓白术散加味不同剂量组骨髓腔内肿瘤细胞数量较模型组有所减少,其中中剂量组骨髓腔内骨髓细胞大致均匀,可见较少量肿瘤细胞,骨结构轻度改变。雷帕霉素组小鼠骨髓腔内可见肿瘤细胞数量减少,但同时伴有较明显的出血。4.免疫组化结果显示:与模型组相比,高、中、低剂量组、雷帕霉素组AKT、P70S6蛋白阳性率均降低(P0.05)。与雷帕霉素组相比,中剂量组中AKT、P70S6蛋白阳性率更低(P0.01)。5.tunel结果显示:与模型组相比,参苓白术散加味高、中剂量组及雷帕霉素组肿瘤细胞凋亡数值明显上调(P0.01)。雷帕霉素组与中剂量组对比,差异无统计学意义(P0.05)。6.Western blot检测显示:与模型组相比,参苓白术散加味高、中、低剂量组、雷帕霉素组AKT蛋白表达均降低(P0.01);中、低剂量组、雷帕霉素组P70S6蛋白表达较模型组降低(P0.05)。结论:1.成功建立肺癌骨转移癌痛小鼠模型。2.参苓白术散加味复方可以减轻骨癌痛小鼠疼痛症状,促进肿瘤细胞的调亡。3.参苓白术散加味复方可以降低骨癌痛小鼠胫骨组织中AKT、P70S6蛋白的表达。4.参苓白术散加味复方可能通过抑制AKT、P70S6表达,从而影响肿瘤血管、肿瘤组织的形成,起到治疗骨癌痛的作用。
【图文】：

51 培养中的小鼠 SBC-5 肺癌细胞株（×20癌痛模型小鼠的建立，乙醚吸入麻醉后，根据 Medhurs腿膝关节处毛发，暴露出左侧胫骨酒精依次消毒皮肤，取 7G 针头直接髓腔，注射 SBC-5 肺癌细胞液 30u保肿瘤细胞液注入骨髓腔，同时用碘酊及 75%酒精依次消毒皮肤伤口0 个万个单位青霉素，注射完后放于所有手术过程及有关器械都严格无

图 3 各组小鼠疼痛阈值情况柱形图相比，*p＜0.01；与造模后第 3 周对比，#p＜表 1 小鼠疼痛阈值情况比较（ x ±S）n 疼痛阈7 9.94±7 4.64±7 3.27±组比较，t=10.844,*P=0.00＜0.01；与造模后第
【学位授予单位】：广西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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本文编号：2597278