黄芪中黄酮类成分的抗病毒作用研究

发布时间：2020-03-24 00:24

【摘要】：目的:优选出黄芪中黄酮类成分的最佳工业提取、纯化工艺,制定黄酮类成分的质量标准,并探讨黄芪中黄酮类成分的抗“柯萨奇”病毒性心肌炎作用。方法:1.优选最佳的提取工艺:以毛蕊异黄酮苷含量和总黄酮含量为考察指标,先对不同溶剂对提取的影响进行考察,选出其中提取效果较好的溶剂。再以溶剂用量、提取时间、提取次数为影响因素,设计正交实验,选出最佳的提取工艺。2.优选最佳工业纯化工艺:以毛蕊异黄酮苷转移率、总黄酮转移率为考察指标,先设计预实验选出双水相体系,再以盐质量分数、无水乙醇质量分数、投料比为影响因素,设计正交实验,优化出最佳初步纯化工艺。再采用聚酰胺柱对初步纯化液进行分离,考察各种影响因素,优化出最佳分离工艺。3.抗“柯萨奇”病毒心肌炎作用:(1)用制备液给小鼠灌胃,通过酶联免疫法和胸腺指数评价黄芪中黄酮类成分对机体免疫功能的影响。(2)通过体外细胞实验,评价黄芪中黄酮类成分对柯萨奇病毒的影响。结果:1.最佳的提取工艺为采用煎煮法提取,提取条件为:加水煎煮提取二次,第一次加9倍量水,煎煮2小时,第二次加7倍量水,煎煮1小时。2.最佳的纯化、分离工艺为:采用磷酸氢二钾-无水乙醇双水相体系,对黄芪提取液进行纯化;最后采用聚酰胺柱对黄芪中黄酮类成分进行分离,聚酰胺活化后每100mL上2.5g原药(湿法装柱湿法上样),活化1h,用3BV的水、25%乙醇溶液进行洗脱,洗脱速度为1.0BV/h。3.(1)黄芪中黄酮类成分可以调节机体免疫功能。(2)黄芪中黄酮类成分对柯萨奇病毒有抑制作用。结论:通过优化提取、纯化工艺,可以得到含量较高的黄酮类成分,而黄芪中黄酮类成分可以从多个角度提高机体抗病毒的能力。
【图文】：

图 1 毛蕊异黄酮苷标准曲线精密度试验：精密吸取毛蕊异黄酮苷对照品溶液（0.056mg/mL）20μL，色谱条件连续进样 5 次，测定峰面积积分值，计算精密度，结果毛蕊异黄测定峰面积变异系数 RSD 为 1.86%，结果见表 1。

图 2 不同溶剂提取液中毛蕊异黄酮苷含量结果（%） 提取液中总黄酮含量的测定照品溶液的制备：精密称取毛蕊异黄酮苷对照品 4.0mg，置于 50mL 容量瓶至刻度线溶解，定容，，即得浓度为 0.08mg/mL 的毛蕊异黄酮苷对照品溶液
【学位授予单位】：山东中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284;R285

【引证文献】

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1 马慧;特异性产牡荆苷木豆内生真菌Dichotomopilus funicola Y3的发酵工艺优化及其生物活性研究[D];东北林业大学;2018年

本文编号：2597505