酸枣抗菌增敏活性成分及其生物学活性研究

发布时间：2020-03-24 18:20

【摘要】：酸枣(Ziziphus jujuba Mill.var.spinosa(Bunge)Hu ex H.F.Chow)是鼠李科枣属植物,具有镇定催眠、改善学习记忆、强心、抗肿瘤、抗菌、抗氧化、抗抑郁、降血脂、保护心肌、增强体液免疫和细胞免疫等多种生物活性。在我国重要的野生果木和药用植物资源库中,酸枣是其重要的组成部分,有着极其重大的开发利用潜力。本文实验以酸枣果为原料,对其化学成分进行分段提取,对获得的精制物进行组成成分分析、广谱抗菌增敏活性分析、并检测其对细菌生物膜和运动性的影响以及作为食品防腐剂的潜力,可为酸枣的进一步开发和利用提供理论依据。试验结果如下:1.超声波辅助不同极性大小溶剂:石油醚、氯仿、乙酸乙酯、80%甲醇、热水(极性由小到大)从10 kg酸枣中逐级提取得到不同极性范围的提取物,分别为石油醚提取物73.28 g,氯仿提取物278.16 g,乙酸乙酯提取物7.79 g,80%甲醇提取物1717.04 g,热水提取物356.83 g。而提取率分别为0.733%、2.782%、0.078%、17.170%、3.568%。2.采用滤纸片法测定各提取物的抑菌效果,结果表明:氯仿提取物对铜绿假单胞菌,鲍曼不动杆菌,金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌,大肠杆菌,伤寒杆菌,福氏痢疾杆菌,毕赤酵母均具有较好的抑菌效果,而其它提取物均没有抑菌效果。3.通过体外抗菌增敏活性评价,结果表明:氯仿提取物能显著降低氨苄青霉素(Amp)对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC),显示出较好的体外抗菌增敏活性,而石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、80%甲醇提取物、热水提取物不具有抗菌增敏作用。4.通过抗菌增敏活性示踪的硅胶柱色谱对酸枣氯仿提取物进行分离纯化的最佳工艺流程为:第一次柱色谱用石油醚、石油醚:氯仿1:1、石油醚:乙酸乙酯1:1依次洗脱获得活性组分Fr.3,再对Fr.3进行第二次柱色谱分离纯化,以石油醚、石油醚:乙酸乙酯10:1依次洗脱获得活性组分Fr.2a,因活性丧失而无法对Fr.2a继续进行柱色谱分离,故确定Fr.2a组分为抗菌增敏活性精制物。5.Fr.2a组分经过GC-MS分析,其主要成分有:49.59%的1,3-二氯丙醇、5.49%的1,1-二氯甲醚、0.96%的六氯乙烷、7.81%的1,1,2,3-四氯-2-丙烯、1.33%的月桂酸、1.34%的十四酸、0.87%的棕榈油酸、7.37%的棕榈酸、9.75%的邻苯二甲酸二丁酯、2.02%的反式-13-十八碳烯酸、1.88%的油酸酰胺、3.06%的β-香树精、0.93%的α-菖蒲醇、6.20%的羽扇豆醇和1.42%的乌索醛等。6.通过对精制物的广谱抗菌增敏活性研究表明:Fr.2a与庆大霉素(Gm)、卡那霉素(Km)、妥布霉素(Tob)、Amp、四环素(Tc)、羧苄青霉素(Cb)、链霉素(St)联用时,对铜绿假单胞菌有协同抗菌作用;Fr.2a与Gm、Km、Tob、Amp、St联用时,对金黄色葡萄球菌具有协同抗菌作用;Fr.2a与Gm、Km、Tob、Tc联用时,对枯草芽孢杆菌具有协同抗菌作用;Fr.2a与Gm、Km、Tob、Amp、Tc、Cb、St、氯霉素(Cm)联用时,对大肠杆菌、白色念球菌、伤寒杆菌、福氏痢疾杆菌具有协同抗菌作用。7.Fr.2a浓度在不影响铜绿假单胞菌和白色念球菌生长的前提下,呈剂量依赖性地促进其生物膜的形成,而不同浓度的Fr.2a对鲍曼不动杆菌生物膜的形成没有显著的影响。8.1/4 MIC Fr.2a能够抑制铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、福氏痢疾杆菌的运动性。9.Fr.2a在食品防腐中的应用试验表明:0.5%Fr.2a加入牛奶中能阻止牛奶pH下降,同时显著抑制牛奶中的微生物的生长,因此,Fr.2a可作为潜在的天然食品防腐剂应用于食品工业。
【图文】：

抑菌试验,氯仿提取物

图 3-1 石油醚提取物的抑菌试验结果Fig.3-1 Antibacterial test results of petroleum ether extract图 3-2 氯仿提取物的抑菌试验结果Fig.3-2 Antibacterial test results of chloroform extract

抑菌实验,抑菌试验,甲醇提取物,氯仿提取物

图 3-2 氯仿提取物的抑菌试验结果Fig.3-2 Antibacterial test results of chloroform extract图 3-3 乙酸乙酯提取物的抑菌试验结果Fig.3-3 Antibacterial test results of ethyl acetate extract
【学位授予单位】：延安大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R284

【参考文献】