不同区域铁皮石斛成分差异分析与指纹图谱建立研究

发布时间：2020-03-25 19:28

【摘要】：铁皮石斛(Dendrobium officinale Kiumra et Migo)是我国传统中草药,目前主要以茎入药,为加强铁皮石斛药材资源的综合利用与质量控制,本研究以高效液相色谱(HPLC)指纹图谱、气相色谱/质谱(GC-MS)结合多指标成分定量分析的方法,对不同产地、不同部位、不同生长时期的铁皮石斛有效成分进行了综合系统的评价,同时建立了铁皮石斛的标准指纹图谱,具体研究结果如下:1.本研究采用顶空固相微萃取技术(HS-SPME)高效提取铁皮石斛花、茎、叶中的挥发性成分,并以GC-MS技术测定各化合物,根据NIST 11质谱数据库的检索匹配结果并结合保留指数RIs,共鉴定得到37种化合物,分为七大类:烷烃类、烯烃类、醛类、醇类、酮类、酯类化合物及其他,其中花中有30种化合物,叶中18种,茎中11种。铁皮石斛花、茎、叶中有7种共有的化合物,分别为:十一烷、反-2-辛烯醛、长叶烯、β-紫罗兰酮、壬醛、癸醛和香叶基丙酮。从挥发性成分种类分析,发现铁皮石斛叶中成分种类丰富,β-紫罗兰酮、香叶基丙酮、β-环柠檬醛、壬醛和癸醛这几类主要成分的含量较高,表明了铁皮石斛叶片在挥发性成分上具有较大的研究利用价值。进一步比较了安徽霍山、浙江德清、浙江磐安、浙江永康这四个产地的铁皮石斛叶中挥发性成分,安徽霍山的铁皮石斛叶片共有22种成分,种类最为丰富。其次为浙江磐安,共有21种成分,浙江德清含有20种成分,浙江永康含有18种成分。四个产地的铁皮石斛叶片共有14种共有的挥发性成分。2.本研究建立了铁皮石斛HPLC指纹图谱研究的方法。结果显示叶中化合物种类和含量都明显高于茎,这说明铁皮石斛叶具有较高的研究价值。在此基础上,对7个产地(云南德宏、江西鹰潭、安徽霍山、浙江德清、浙江磐安、浙江永康、浙江丽水)11个批次的铁皮石斛样品的甲醇提取物进行成分研究及比较,建立了11个批次铁皮石斛叶片有效成分的指纹图谱体系。共获得21个共有色谱峰,并以其峰面积计算各产地铁皮石斛样品的相似性,浙江德清两个批次样品与对照图谱相似性较低,分别为0.639和0.654,其余六个产地的样品与对照图谱相似性较高,在0.816~0.954之间。聚类分析结果显示,云南德宏的铁皮石斛被单独聚为一类,安徽霍山和浙江磐安聚为一类,浙江其余三个产地和江西鹰潭聚为一类。此外,通过主成分分析得到累积贡献率达70.583%的三个主成分,其中峰8、9、10、14、15、16对主成分1贡献率较高,峰1、2、4、5、20对主成分2贡献率较高,峰11、12、13对主成分3贡献率较高。铁皮石斛叶和茎的甲醇提取物均有一定的抗氧化活性,且叶的抗氧化活性高于茎。3.对不同部位、不同产地的铁皮石斛黄酮、多糖、生物碱含量进行比较,结果发现铁皮石斛叶中的黄酮含量明显高于茎,不同产地之间,浙江永康的铁皮石斛的总黄酮含量明显高于其他产地,其次为安徽霍山和云南德宏。铁皮石斛茎的多糖含量明显高于叶,不同产地之间,浙江德清铁皮石斛的总多糖含量最高,为51.453%。铁皮石斛生物碱含量明显低于黄酮和多糖,并且在叶中含量明显高于茎,不同产地之间,浙江磐安的铁皮石斛总生物碱含量最高,为0.0575%。铁皮石斛的总黄酮和总多糖都具有一定的抗氧化活性,黄酮的抗氧化活性与黄酮含量成正相关,而石斛粗多糖的抗氧化活性与粗多糖含量成负相关。本文通过对不同产地、不同部位铁皮石斛的挥发性成分、甲醇提取物、多糖、生物碱、黄酮进行测定,采用HPLC指纹图谱、GC-MS检测等方法结合多成分定量分析,同时,对各成分进行体外抗氧化活性分析,本研究为铁皮石斛药材质量控制和资源利用提供了更为全面的科学参考依据。
【图文】：

挥发性成分,铁皮石斛,峰面积

图 2.1 37 种挥发性成分在铁皮石斛花、茎、叶中的分布Figure 2.1 The distribution of the 37 volatile compounds in different tissues of D. off挥发性成分峰面积

挥发性成分,铁皮石斛,含量比较,中共

16图 2.2 铁皮石斛花、茎、叶中共有的七种挥发性成分含量比较。图中同成分中的不同示含量存在显著差异，小写英文字母表示显著性差异 p＜0.05，大写英文字母表示显著性差异Figure 2.2 Seven common volatile compounds present in flower, leaf and stem of DDifferent letters within the same compound indicate significant differences in amounts.Amousame letters do not differ significantly. Lowercase letters indicate a significant difference at puppercase letters indicate a significant difference at p < 0.01.2.4.2 不同产地铁皮石斛叶中挥发性成分比较根据对铁皮石斛不同组织中挥发性成分的研究，发现花中挥发性成分种类
【学位授予单位】：浙江理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284.1

【参考文献】