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不同产地三叶崖爬藤品质评价及其相关药效学研究

发布时间:2020-03-31 04:17
【摘要】:目的:研究不同产地三叶崖爬藤(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)的遗传变异、所含主要的化学成分的含量、体外抗氧化活性,以及抗炎镇痛、抗肝损伤作用,优选出种质优良的三叶崖爬藤产地,从而进行林下种植,缓解对三叶崖爬藤的需求。方法:1.使用改良的CTAB法进行三叶崖爬藤叶中基因组DNA提取,采用ISSR分子标记技术,建立ISSR-PCR反应体系,对16个不同产地三叶崖爬藤进行遗传多样性分析。2.通过测定三叶崖爬藤新鲜根、茎、叶和干燥后质量恒重时的质量,测定失水率;采用紫外分光光度法、高效液相色谱法分别测定三叶崖爬藤中总黄酮、总皂苷、总酚、多糖以及山奈酚、槲皮素、异槲皮苷7个指标行成分的含量。3.采用响应曲面分析法对三叶崖爬藤抗氧化提取工艺进行优化,在最佳提取工艺条件下进行提取,采用ABTS法、DPPH法测定不同产地三叶崖爬藤的抗氧化能力。4.采用二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸扭体和CCl4致小鼠肝损伤药理模型,分别进行三叶崖爬藤抗炎、镇痛和抗肝损伤作用。结果:1.16个不同产地三叶崖爬藤具有较大的遗传差异,可分为A、B、C三类,A类包括S1福建顺昌、S2福建邵武、S4福建松溪、S5福建三元、S6福建漳平、S7福建连城、S8福建大田、S12福建沙县、S14浙江乐清、S15浙江临安;B类包括S3福建建阳、S9福建永安、S10福建泰宁、S11福建尤溪、S13福建永春;C类包括S16浙江开化。2.失水率方面,S2福建邵武根的失水率最低为62.01%,S8福建大田产三叶崖爬藤茎的失水率最低为66.84%,S7号福建连城叶的失水率最低为80.70%。总黄酮、总皂苷、总酚、多糖以及山奈酚、槲皮素、异槲皮苷含量方面。分部位考虑,S12福建沙县产三叶崖爬藤茎中总黄酮、山奈酚含量均最高,分别为113.07 mg·g-1、7830.61 μg·g-1;S8福建大田产三叶崖爬藤茎中总皂苷、总酚含量均最高,分别为114.17 mg·g-1 22.36 mg·g-1;S5福建三元产三叶崖爬藤根中多糖含量最高为96.35 mg·g-1;S11福建尤溪产三叶崖爬藤叶中槲皮素、异槲皮苷含量均最高,分别为803.60 μg·g-1、9188.72 μg·g-1。从全株考虑,S12福建沙县产三叶崖爬藤中总黄酮、总皂苷、总酚含量均最高,分别为66.97 mg·g-1、49.28mg·g-1、15.16 mg·g-1;S5福建三元产三叶崖爬藤中多糖含量最高为52.48 mg·g-1;S13福建永春产三叶崖爬藤中山奈酚含量最高为5197.23 μg·g-1;S11福建尤溪产三叶崖爬藤中槲皮素、异槲皮苷含量均最高,分别为317.52 μg·g-1、3105.86μg·g-1。3.响应曲面法优化得到最佳提取工艺为:提取时间40 min,液料比26:1,乙醇浓度50%,提取温度50℃。在此工艺条件下进行16不同产地三叶崖爬藤不同部位提取,发现S5福建三元、S8福建大田、S9福建永安、S12福建沙县产三叶崖爬藤清除DPPH和ABTS自由基能力强于12个产地的三叶崖爬藤。4.不同产地三叶崖爬藤均具有抗炎镇痛作用,但存在明显差异,其中福建三元产三叶崖爬藤抗炎镇痛作用优于福建尤溪、福建顺昌产三叶崖爬藤。福建三元产三叶崖爬藤多糖具有抗肝损伤作用。结论:16个不同产地三叶崖爬藤具有遗传差异性,通过化学成分含量测定、抗氧化及抗炎镇痛作用研究,优选出S5福建三元、S12福建沙县产三叶崖爬藤为最佳。
【图文】:

引物扩增,多态性,样品,比率


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遗传相似度,不同产地,多态性,样品


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【学位授予单位】:福建中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R284;R285.5

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本文编号:2608550

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