新晶型化合物DL1502抗骨关节炎症作用研究

发布时间：2020-04-01 18:38

【摘要】：DL1502是一种提取自蓼科中药植物的单体化合物,有着显著的抗炎作用。但该药物经口服后存在着腹泻的毒副作用,这导致了DL1502成药的不可行性及已有药物的下市。通过转换药物晶型及给药方式,有可能在保证药效的基础上减轻或消除毒副作用。本文对获得的DL1502化合物5个晶型的颗粒度、平衡溶解度及DL1502与1%透明质酸混悬液性质进行检测,并进一步对其在SD大鼠体内的药代动力学进行研究,得到了体内吸收效果相对有优势的F晶型。最后对DL1502的F晶型固体口服及注射给药的抗骨性关节炎的药效作用进行了研究,实验结果证明了固体口服给药及注射给药对大鼠膝关节骨关节炎均有治疗作用。1.DL1502多晶型粒度检测晶型的改变可能会使得化合物理化性质发生变化,其中颗粒度的变化是一个重要的指标。本章检测了不同晶型的DL1502化合物的颗粒度,结果显示,新的晶型在颗粒度方面存在差异。2.DL1502多晶型水中平衡溶解度药物晶型对于药物的稳定性、溶解度等有着不可忽视的影响,是影响药物品质和疗效的重要因素,因此,对于药物多晶型理化性质的研究也显得举足轻重。本章将所获得的5个新DL1502晶型溶于37℃、p H7.24的纯净水中,采用HPLC-DAD法检测DL1502化合物的水中平衡溶解度。结果显示,晶型的变化改变了药物的溶解度,颗粒度的大小与溶解速率、平衡溶解度成负相关,颗粒度较小的晶型溶解快,平衡溶解度浓度值较大。3.DL1502与透明质酸混悬注射剂质量标准检测本章将所获得的5个DL1502新的晶型溶于1%透明质酸,制成0.125,0.25,0.5,1.0,2.0 mg·m L-1 5个浓度的混悬液。我们检测了这5个晶型不同浓度下的吸光度,配制标准曲线,检测仪器精密度,方法精密度及72 h稳定性,肉眼观察混悬的药物颗粒的混悬情况,以此对关节腔注射剂进行初步质量标准控制的研究。结果表明,DL1502的5个晶型与1%透明质酸混悬液,在0.125~2 mg·m L-1浓度范围内,仪器检测结果的线性关系良好,准确可靠,仪器精密度、方法精密度结果良好,72 h内稳定性好,对制造混悬注射制剂的质量标准控制有指导作用。4.DL1502化合物多晶型的药代动力学研究本章采用HPLC-DAD法,检测了多个晶型的DL1502在SD大鼠体内的药代动力学差异。固体灌胃DL1502的C,D,E,F和Y(与烟酰胺混晶)晶型(100 mg·kg-1)后,所得的Cmax分别为4.05±1.44μg·m L-1,2.77±1.17μg·m L-1和3.97±0.54μg·m L-1,7.45±4.49μg·m L-1,5.89±3.56μg·m L-1。五种晶型的AUC(0-t)为34.10±14.85μg·h·m L-1,18.34±10.51μg·h·m L-1,15.49±8.26μg·h·m L-1,61.07±36.43μg·h·m L-1和16.01±8.39μg·h·m L-1。结果表明:DL1502化合物F晶型,在大鼠体内的达峰浓度Cmax、药时曲线下面积AUC(0-t)明显优于其他晶型,这表明,晶型F在大鼠体内的吸收优于DL1502的C、D、E、Y(与烟酰胺混晶)晶型,是优势晶型。5.DL1502多晶型药物抗骨关节炎症作用研究本章采用经典的关节腔注射药物(注射4%木瓜蛋白酶)法制备大鼠膝关节骨关节炎模型。对动物进行自主活动、电子压痛、步态评测等行为学评分。测量大鼠膝关节直径评判其肿胀程度;应用小动物活体成像仪拍摄X-Ray平片测量大鼠造模侧膝关节的关节腔间隙变狭窄程度评判骨关节炎对软骨磨损、变薄的作用。造模成功后,给药两周,再次检测上述指标,评价药效作用。并且,设立注射给药组,研究将DL1502直接向病灶部注射给药的药效作用。结果显示,与正常组相比,模型组的大鼠膝关节电子压痛阈值评分显著降低(P0.05),而F晶型DL1502的口服给药组及注射给药组均可显著改善关节压痛症状(P0.05)。F晶型DL1502的1.125和4.5 mg·kg-1剂量组和DL1502的注射给药组(DL1502混悬于1%透明质酸,浓度为1 mg·m L-1)可显著减轻由骨关节炎所引起的肿胀(P0.0001、P0.0001和P0.05)。X-Ray平片拍摄结果显示F晶型DL1502两个剂量口服给药组(1.125和4.5 mg·kg-1)均能显著改善由骨关节炎导致的关节间隙狭窄程度(P0.0001和P0.0001),并且高剂量组的改善作用优于低剂量组。DL1502关节腔注射给药组,动物关节间隙狭窄情况有明显改善(P0.05),间隙狭窄的改善效果优于低剂量口服组(P0.001),与高剂量组相比没有显著性差异。本章采用经典的药物注射法制备大鼠膝关节骨关节炎模型,评价了F晶型的DL1502化合物对大鼠膝骨关节炎的治疗作用。DL1502对膝关节骨关节炎所导致的大鼠膝关节关节间隙变窄有着良好的保护作用,并对骨关节炎所致的肿胀、疼痛症状有改善作用。新的给药方式对于以上各症状,同样有着显著的药效作用。
【图文】：

颗粒度,晶型,差异比较,化合物

方法同 3.2.1 项，配制 2.0、1.0、0.5、0.25、0.125 mg·mL-1五个浓度的不同晶型液，分别于 0、0.5、1、2、4、8、12、24、72 h 时检测其 OD 值，以确定样品性。.7 混悬液混悬情况检视将所配制混悬液，，每个晶型，各浓度均精密量取 1 mL 加入透明玻璃小瓶中，拍片，记录 72 h 混悬液 DL1502 药物颗粒混悬、沉淀状态。实验结果 DL1502 多晶型颗粒度检测结果以 SPSS 软件，对所得 5 种 DL1502 晶型的颗粒度进行统计分析。结果显示，不型的颗粒度在转晶后存在一定差异。结果见 Figure 1-3-2。

标准曲线,晶型,差异比较,溶解度

图 1-3-3 新晶型化合物 DL1502 在水中溶解度差异比较Figure.1-3-3. The difference of the solubility of polymorphic of DL1502 in the waterDL1502 多晶型与 1%透明质酸混悬液吸光度检测结果1 标准曲线的建立配制 2.0、1.0、0.5、0.25、0.125 mg·mL-1五个浓度的混悬液，测量各浓度混D 值，以浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，绘制标准曲线。得到 5 条标准曲C 晶型：y = 1.2463x + 0.3046，R2= 0.9964；D 晶型：y = 0.5936x + 0.1635，R2= 0.9917；E 晶型：y = 0.7063x + 0.1702，R2= 0.9928；F 晶型：y = 1.3445x + 0.3138，R2= 0.9977；Y（混晶）晶型：y = 1.0959x + 1.1252，R2= 0.7062。
【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】