天麻多糖延缓D-半乳糖诱导小鼠骨骼肌衰老的实验研究

发布时间：2020-04-05 10:33

【摘要】：目的:探讨天麻多糖(GEP)对D-半乳糖(D-gal)诱导的小鼠骨骼肌衰老的延缓作用及其可能的机制。方法:50只3月龄昆明小鼠随机分为5组:对照组(control),模型组(model),天麻多糖低剂量组(0.4mg/(g·d~(-1))(L))、中剂量组(2mg/(g·d~(-1))(M))、高剂量组(10mg/(g·d~(-1))(H)),每组10只(雌雄各半)。天麻多糖三个剂量组和模型组小鼠每日颈背部皮下注射5%D-半乳糖(125 mg/kg)溶液建立实验模型,对照组以相同的方式及部位注射等体积的生理盐水,连续给药8周。建模第8天开始,天麻多糖低、中、高剂量组分别以天麻多糖0.4mg/(g·d~(-1))、2mg/(g·d~(-1))、10mg/(g·d~(-1))灌胃,连续给药7周。对照组和模型组用等体积的生理盐水灌胃,实验过程共8周,期间以普通饲料喂养,保持实验温度在20~24℃。实验过程中观测如下指标:(1)观察各组小鼠生长状况并检测其体重变化,(2)水平绳实验检测小鼠四肢肌肉力量,(3)检测肌组织、肝、肾脏器系数,(4)组织病理学观测骨骼肌纤维横截面积变化,(5)ELISA法检测骨骼肌组织衰老相关超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性,丙二醛(MDA)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量,(6)qRT-PCR和Western blot法分别检测Caspase-3、MAFbx和MuRF-1的mRNA表达和蛋白水平变化。结果:(1)与对照组比较,模型组出现明显的脱毛现象、活动度下降及体重减轻;与模型组比较,GEP呈时间和剂量依赖性改善D-半乳糖诱导的小鼠骨骼肌衰老,增加体重,维持脏器系数稳定,增强小鼠的肌肉力量。(2)与对照组比较,模型组骨骼肌肌纤维横截面积显著减小(P0.05);与模型组比较,给予三个剂量GEP干预后,肌纤维横截面积逐渐恢复,并具有统计学意义(P0.05)。(3)ELISA结果显示,与对照组比较,模型组SOD、GSH-Px、CAT水平降低,MDA、8-OHdG含量增加(P0.05);然而,与模型组比较,GEP给药组小鼠骨骼肌组织SOD、CAT、GSH-Px水平升高,MDA、8-OHdG水平明显降低(P0.05),并且GEP剂量越大,上述指标改变越明显。(4)qRT-PCR与Western blot分析结果表明,与对照组比较,模型组Caspase-3、MAFbx、MuRF-1的mRNA表达和蛋白水平明显增高(P0.05),GEP给药组能明显下调Caspase-3、MAFbx、MuRF-1的mRNA表达和蛋白水平(P0.05),并且GEP剂量越大,其表达量越低。结论:GEP可延缓D-半乳糖诱导的小鼠骨骼肌衰老,其机制可能与下调氧化应激水平及Caspase-3、MAFbx、MuRF-1的水平有关。
【图文】：

动物实验操作流程

GEP对D-gal诱导的衰老小鼠体重的影响
【学位授予单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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本文编号：2614902