甘草粗多糖对非酒精性脂肪肝大鼠的保护作用

发布时间：2020-04-07 00:49

【摘要】：目的:非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是世界范围内的主要肝脏疾病,通常与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和高脂血症有关,它已成为许多疾病死亡的预测因素。本研究旨在研究甘草粗多糖(crude Glycyrrhiza uralensis polysaccharide,CGP)对高脂饮食(high-fat diet,HFD)诱导的非酒精性脂肪肝大鼠的保护作用。方法:通过苯酚-硫酸法、紫外分光光度法(ultraviolet spectrophotometry,UV)、傅里叶变换红外光谱法(fourier transform infrared spectra,FT-IR)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析CGP。本研究采用HFD诱导的NAFLD大鼠模型用于研究CGP的肝保护作用。将52只SD大鼠根据体重随机分成正常组和模型组,分别饲喂正常饲料与高脂饲料,连续喂养10周后我们依据肝脏病理形态结果判断造模是否成功。然后将模型组大鼠根据体重随机分为CGP干预组(400、500、600mg/kg/day),二甲双胍治疗组(150 mg/kg)和模型组。干预6周后,使用相应试剂盒测定大鼠血清中总胆固醇(total cholesterol,TC),甘油三酯(triglycerides,TG),低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C),谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT),谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、空腹血糖(fasting blood glucose,FPG)和胰岛素水平;检测大鼠肝脏组织中的丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)及还原型谷胱甘肽酶(reduced glutathionease,GSH)。同时,对肝脏进行组织病理学检查。RT-PCR和Western blot法检测肝脏组织中细胞色素P4502E1(CYP2E1)蛋白与基因表达量。结果:通过分析发现,CGP主要由摩尔比为3.11:5.45:13.6:0.53:0.22的甘露糖:鼠李糖:葡萄糖:半乳糖:岩藻糖组成的杂多糖,其具有多糖应有的红外和紫外的吸收特征,多糖总含量为42.81%。动物实验结果表明,与模型组比较,口服不同浓度的CGP均可可降低NAFLD大鼠血清中的ALT,AST,TG,TC,LDL-C、FPG、INS(P0.05),升高肝脏组织中SOD、CAT、GSH(P0.05)水平。同时,CGP还抑制血清中TNF-α、IL-6(P0.05)的升高,改善NAFLD大鼠促炎症因子环境。RT-PCR和western blot的结果显示,CGP抑制了NAFLD大鼠肝组织中CYP2E1的表达。此外,肝脏的组织病理学检查显示CGP可防止非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂肪的浸润和并逆转组织的病理学改变。结论:CGP具有降低NAFLD血脂、ALT和AST水平,增加胰岛素敏感性及SOD、CAT、GSH酶的活性,改善炎症因子状况的作用,并可能通过抑制CYP2E1基因的表达来发挥对NAFLD的保护作用。本研究为宁夏甘草的开发与应用提供理论基础。
【图文】：

曲线,多糖含量,苯酚-硫酸法,硕士学位论文

医科大学硕士学位论文结果GP 的表征苯酚-硫酸法测定多糖含量使用苯酚-硫酸法测定 CGP 的多糖含量，以无水葡萄糖作为标准品，基于标准得到 CGP 的多糖含量为 42.81%（y=285.84x+0.9258,R2=0.9987）。

红外光谱图,水溶液,吸收峰,弯曲振动

图 2. CGP 水溶液的紫外吸收光谱图igure 2. UV- Visible spectra of CGP aqueous solution. CGP: Crude Glycyrrhiza uralenpolysaccharide. 傅里叶变换红外光谱扫描 CGP根据 CGP 的红外光谱图显示，3392.79 cm-1附近的强烈宽带和约 2931.80cm-1弱吸收带分别是由于 O-H 和 C-H 伸缩振动。此外，，1383 与 1437 cm-1之间的吸收峰是源于糖类 C-H 的变角振动，它与 3392.79 cm-1附近的吸收峰是多糖吸收峰。1475 与1300cm-1之间的双吸收峰被认定为C-H弯曲振动。在2400-210的峰值与三键对称伸缩有关。在 1616.35cm-1区域的吸收峰是由于双键的伸缩振，900-1200cm-1区域的特征吸收峰归因于 C-O-H 弯曲振动。
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

【相似文献】