清肝滋肾中药激活高脂喂养SHR大鼠肝脏组织SIRT1表达减轻其脂肪沉积改善代谢紊乱的实验研究

发布时间：2020-04-12 14:10

【摘要】：目的观察清肝滋肾中药(针箭颗粒Ⅱ号)对高脂喂养的SHR大鼠血糖、肝脏组织的脂质浸润状况及对肝脏组织SIRT1、PTP1B蛋白表达水平变化的影响,并初步探讨其作用的分子机制。方法选用18只4周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR),随机的分成对照组、模型组及针箭颗粒组,各组均为6只。适应性喂养2周后,对照组予基础饲料和相同剂量0.5%纤维素钠安慰剂灌胃,模型组予高脂饲料和相同剂量0.5%纤维素钠安慰剂灌胃,针箭颗粒组予高脂饲料和清肝滋肾中药(针箭颗粒Ⅱ号)混悬液(22.5g/kg/d)灌胃,共灌胃9周。在灌胃第8周时,各组大鼠禁食8-12小时,然后分别进行口服糖耐量试验,测定Omin、30min、60min、90min、120min时血糖值,记录结果。待灌胃结束后,处死大鼠,提取各组大鼠的肝脏组织,生理盐水冲洗,4%的多聚甲醛固定,石蜡包埋、切片,分组予HE染色、油红0染色观察肝脏细胞脂肪浸润情况,采用Western blot法测定肝脏组织Sirt1、PTP1B蛋白的表达,并运用SPSS 17.0统计软件对上述所得数据统计分析,以P0.05为差异存在统计学意义。结果糖耐量试验(OGTT)结果:与对照组比较,模型组大鼠60 min、90 min血糖水平均明显增高(P值依次为0.018、0.0440.05),且120 min血糖仍未回到空腹水平;而与模型组比较,针箭颗粒组各时段血糖水平下降不明显,无统计学差异。Western blot法检测各组大鼠肝脏组织Sirt1、PTP1B蛋白的表达:(1)肝脏组织Sirt1蛋白表达中:与对照组相比,模型组肝脏组织Sirt1蛋白表达水平显著下降(P=0.0000.01);与模型组比较,针箭颗粒组肝脏组织Sirt1蛋白表达水平也明显上调(P=0.0420.05),差异均具有统计学意义。(2)肝脏组织PTP1B蛋白表达中:与对照组相比,模型组的肝脏组织PTP1B蛋白表达水平显著上调(P0.0000.01);与模型组比较,针箭颗粒组肝脏组织PTP1B蛋白表达则明显下降(P=0.0000.01),差异均具有统计学意义。大鼠肝脏组织病理形态观察:(1)HE染色结果对照组大鼠的肝小叶结构清晰,细胞索整齐,核结构也较清晰,肝细胞无明显病理改变;模型组大鼠肝组织结构紊乱,细胞索不整齐,部分肝细胞发生脂肪变性、沉积,呈大泡样改变;针箭颗粒组大鼠肝脏组织结构较模型组有所恢复,虽亦可见少许脂肪浸润及脂肪空泡,但较模型组的程度明显减轻,且未见明显炎性细胞浸润。(2)油红O染色结果对照组大鼠肝脏组织未见脂肪沉积,而模型组大鼠肝脏组织可见密集的脂滴,显示大量脂肪浸润,而针箭颗粒组肝脏组织的脂滴密度和大小较模型组均有显著降低。结论1.清肝滋肾中药(针箭颗粒Ⅱ号)能一定程度改善高血压合并代谢紊乱的血脂代谢异常,减轻肝脏组织脂肪沉积、炎性细胞浸润,而对血糖的影响在本实验中表现不明显。2.高血压伴有代谢紊乱较单纯高血压状态,肝脏组织SIRT1蛋白表达下调,PTP1B蛋白表达增加,而清肝滋肾中药(针箭颗粒Ⅱ号)与SIRT1蛋白表达上调,PTP1B蛋白表达降低相关联。因此,通过本实验可以推断:清肝滋肾中药对高血压代谢紊乱的干预可通过SIRT1/PTP1B通路发挥作用,但由于中药作用具有多途径多靶点的特点,所以,要更加全面地认识其作用的分子机制还需进一步的实验研究来证实。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】