雪胆炮制工艺及其质量标准提高研究

发布时间：2020-04-12 18:14

【摘要】：中药雪胆质量标准不完善,且味极苦,有小毒,临床上顺应性差,不能被患者所接受。雪胆传统的炮制方法为切厚片后干燥,不能改善雪胆的临床使用情况。所以本课题在中医药理论指导下,选用味甘性平具有调和作用的甘草来炮制雪胆以期能起到矫味和增效减毒的作用,降低雪胆苦味,缓解其毒性,增强其抗炎和镇痛作用。课题选取雪胆为研究对象,对雪胆炮制前后质量标准及药理作用变化进行研究。目的对雪胆炮制工艺及雪胆炮制前后的质量控制及指纹图谱、稳定性、抗炎镇痛、急毒等进行研究,为雪胆的质量标准提高及甘草制雪胆的合理性与科学性提供依据。方法1.采用正交设计和星点设计-效应面法(CCD-RSM)联合运用对雪胆炮制工艺进行研究,以雪胆素甲为指标评价制雪胆炮制工艺;2.应用显微、HPLC、TLC等,对雪胆、制雪胆饮片的性状、鉴别、检查、含量测定进行质量标准提高研究;3.采用HPLC-DAD对不同产地雪胆饮品进行候指纹图谱研究并比较雪胆炮制前后指纹图谱变化;4.采用综合药品稳定性试验箱对雪胆、制雪胆粉末进行稳定性研究;5.采用二甲苯致小鼠耳肿胀,蛋清致大鼠足趾肿胀2种急性炎症模型,比较研究雪胆生品和甘草制雪胆的抗炎作用差异。并采用热板法和醋酸扭体法致痛,比较研究雪胆生品和甘草制雪胆的镇痛作用差异。6.参照经典的急性毒性(口服半数致死量LD_(50)、最大耐受量MTD、最大给药量MLD)试验方法,进行炮制前后雪胆毒性比较研究。结果1.正交试验确定的甘草制雪胆最佳炮制工艺为闷润7 h,80℃烘干12 h;CCD-RSM确定最佳炮制工艺为闷润时间7.48 h~8.56 h,烘干时间12.06 h~13.12 h。结合前期基础研究与实际操作的方便性,得到甘草制雪胆的最佳炮制工艺为闷润时间为7.5 h,烘干温度为80℃,烘干时间为12 h。2.对雪胆、制雪胆质量提高研究确定了其性状、优化薄层条件,建立测定了雪胆素甲成分含量的方法。形成了10不同产地雪胆HPLC-DAD指纹谱图及共有模式,比较了雪胆炮制前后指纹图谱变化。3.用提供包材对雪胆、制雪胆粉末密封包装,规格1 g/袋,置阴凉干燥处储藏,有效期为2年。4.雪胆生品和炮制品的高、低剂量组均显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀(P0.01),对鸡蛋清所引起的大鼠足肿胀度在1 h~4 h内均有明显的抑制(P0.01~0.05)。与模型组相比,雪胆生品和炮制品高、低剂量组均明显提高小鼠的痛阈(P0.01~0.05),明显减少醋酸所致小鼠扭体次数(P0.01~0.05)。雪胆生品高低剂量组与同剂量的炮制品相比,高剂量组各项指标差异显著(P0.01~0.05),低剂量组各项指标差异不同,但治疗结果均显示雪胆炮制品效果更好。5.雪胆经甘草炮制后,毒性降低,但两者之间无显著性差异。雪胆生品组MTD值为20.0 g·kg~(-1)·d~(-1),但经甘草汁炙后,其MTD值大于20.0 g·kg~(-1)·d~(-1)。结论实验对甘草制雪胆的炮制工艺及雪胆炮制前后质量控制(性状、TLC、含量测定、指纹图谱等)、稳定性试验、雪胆炮制前后抗炎症痛作用、雪胆炮制前后急毒等进行研究,对建立雪胆、制雪胆质量标准奠定了基础,对甘草炮制雪胆的合理性与科学性提供了参考和依据。
【图文】：

雪胆素,雪胆,对照品,定质

2雪胆素甲对照品(A)和制雪胆(B)的HP的制备精密称定雪胆素甲对照品适量素甲对照品溶液。制备取制雪胆（过 2 号筛）粉末 1 g，精甲醇 50 mL，密塞，称定质量，超声处理冷，，再称定质量，用甲醇补足减失的质量其续滤液作为供试品溶液，备用。察取“2.1.2”项对照品溶液，分别配制成.4、1 187.2、1 484.0 μg/mL 系列对照品溶 μL，以峰面积为坐标。（Y），质量浓度为性方程为 Y＝504.86 X-535 805，R2＝0.998.4～1 484.0 μg/mL 线性关系良好。6 8 10 12 14 16 18t/min

雪胆,淀粉粒

典》2015 年版四部通则 2001 显微鉴别法[39]，进行采用间苯三酚试液对木化细胞进行鉴别。黄色。淀粉粒众多，类圆形，多为单粒，少数状。石细胞较多，类圆形、方形、类三角形或长多为网纹，偶见环纹，管胞梭形。木栓细胞淡黄淡黄色。淀粉粒众多，类圆形，多为单粒，少数点状。石细胞较多，类圆形、方形、类三角形或管多为网纹，偶见环纹，管胞梭形。木栓细胞淡
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R283

【参考文献】