黄连素靶向微管抑制表皮鳞癌A431细胞增殖的作用及机理研究

发布时间：2020-04-12 22:26

【摘要】：许多的药理研究和大量的临床研究证实,黄连素具有显著抗癌的作用。但是关于其抗癌的具体靶点以及机理却鲜有报道。黄连素的化学结构式与秋水仙碱结构类似,而秋水仙碱的抗癌机理与微管相关。所以,我们利用细胞模型实验以及移植性肿瘤动物模型实验来探究黄连素抗癌的具体机理是否与微管相关。首先进行分子对接模拟实验,探索黄连素和微管的结合位点。然后利用生物膜干涉仪器、等温滴定量热仪为研究手段,检测到黄连素和微管之间的相互作用。本实验进一步采用MTT法检测黄连素对8种肿瘤细胞系存活率的影响,筛选出合适的细胞系、药物浓度以及时间之后,我们通过电转染质粒α-tubulin实验,用10μg/ml黄连素处理细胞24h和48h之后,在倒置显微镜下观察肿瘤细胞中微管的状态。通过western blotting实验,观察乙酰化的α-tubulin的表达情况。根据体外实验的结果,又进行了移植性肿瘤动物模型实验,将6到8周龄的雄性裸鼠分为三组,对照组(生理盐水)、顺铂组(1mg/kg)、黄连素组(10mg/kg),每组6只,并对裸鼠的体重进行监测。在最终处死裸鼠后,对摘取的肝脏、脾脏、肿瘤进行称量,并对肿瘤进行拍照和对比。研究发现黄连素和微管能够在微管Gln8的位点结合;在8种肿瘤细胞系中,黄连素对表皮鳞癌细胞A431的抑制效果最好,黄连素的浓度在为2μg/ml时,处理48h之后,对A431细胞抑制率达到50%以上;黄连素能够打乱A431肿瘤细胞中微管的正常聚合和解聚的过程;黄连素促进乙酰化的α-tubulin的高表达,可能具有促进微管稳定的作用;黄连素处理组与对照组相比,裸鼠的体重、肝脏以及脾脏没有显著性的差异,肿瘤的重量以及肿瘤体积的大小具有减小的趋势,但是也都没有显著性差异。综上所述,我们得出黄连素通过靶向微管抑制表皮鳞癌A431细胞增殖,并且几乎没有毒副作用。本实验为黄连素这种中药的应用开辟更广的领域,也为相关的类似药物的抗癌机理研究提供理论参考。
【图文】：

内的其他的蛋白共同组装成纺锤体以及鞭毛等多种细胞器[19]。它的结构如图1-1所示。图1-1微管的结构Fig1-1the structure of the microtubule在正常情况之下，细胞内的微管聚合和解聚保持一种循环动态平衡，微管在正常的聚合和解聚的平衡动态的状态下，具有维持细胞形态、细胞有丝分裂的过程，以及细胞营养物质的运输等重要的调节功能。细胞的分裂是一种有秩序的和高度可以控制的过程。当细胞进入分裂期时，细胞内的微管以两种形式存在细胞内[20]，一种形式是胞质微管，另一种则是形成纺锤体的微管。在细胞分裂的前期，细胞内的微管会发生解聚，解聚的微管能够迅速的聚合成为纺锤体，在细胞有丝分裂过程中，纺锤体会牵引着染色体向细胞的两极移动，最终它们会进入至两个子细胞中，即完成了一次细

[20]，然后会在新的细胞内重复这样微管聚合和解聚循环的动态平衡。这个过程如图1-2所示。一旦细胞微管动态循环平衡遭到破坏，肿瘤细胞的有丝分裂过程就会被阻滞，进而使肿瘤细胞生长以及增殖受到抑制，进一步诱导其凋亡[21]。图1-2微管在细胞有丝分裂过程中的作用Fig1-2 The role of microtubules during mitosis很多的研究证实微管是目前医学领域的研究热点之一，，而且是目前开发抗癌药物的重要靶点之一。肿瘤细胞区别于正常细胞的一个非常重要的特点就是可以无限制的
【学位授予单位】：云南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 李春明;张颖鹏;刘志刚;;色素上皮衍生因子在A431细胞的表达及对其增殖的影响[J];江西医药;2013年11期

2 陈达民;结肠和上部直肠的鳞癌和腺鳞癌[J];国外医学(消化系疾病分册);2002年01期

3 董淑晓;訾力;亓健;;原发性胃鳞癌的临床病理特点[J];中国临床医生;2011年11期

4 赵镇清;张熙曾;刘亦庸;;贲门鳞癌[J];中国肿瘤临床;1987年04期

5 王怀娥,任德印,崔允峰;肺炎样鳞癌误诊原因探讨(附5例报告)[J];医学影像学杂志;1994年03期

6 刘建良,周鑫官,张勤;贲门鳞癌的外科治疗[J];江苏医药;1995年08期

7 ;中咽部鳞癌前壁型的治疗[J];国外医学(耳鼻咽喉科学分册);1998年01期

8 ;鳞癌中人类乳头状瘤病毒的表达及P~(53)突变[J];国外医学(耳鼻咽喉科学分册);1999年01期

9 张地君,许速,徐小珂;表皮内鳞癌2例报告[J];皮肤病与性病;1999年01期

10 钱伟明;原发性附睾鳞癌1例[J];诊断病理学杂志;2002年04期

相关会议论文 前5条

1 胡伟汉;徐韬;伍国号;郭朱明;高远红;王芳;蔡修宇;;151例下咽鳞癌的治疗与预后[A];2007第六届全国放射肿瘤学学术年会论文集[C];2007年

2 俞新民;;鳞癌1例[A];2009年浙江省皮肤病学术会议论文汇编[C];2009年

3 高明阳;;头部鳞癌伴嗜酸性粒细胞增多一例[A];2003中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2003年

4 徐致祥;谭家驹;陈风兰;司建华;韩建英;;农家肥料污染水源诱发大小鼠前胃鳞癌[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2007年

5 李梅娇;王鹏;符磊;吴伟伟;;伴有多脏器功能损害的老年鳞癌(翻花疮)患者的处理体会[A];2012全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2012年

相关重要报纸文章 前2条

1 上海龙华医院肿瘤科 王菊勇 副研究员;胃鳞癌的治疗[N];上海中医药报;2010年

2 记者 王丹 通讯员 高翠峰;食管鳞癌基因组研究告别“盲人摸象”[N];健康报;2014年

相关博士学位论文 前10条

1 任重;塑料微管气辅挤出成型理论及实验研究[D];南昌大学;2017年

2 范虹;TRPC6通道对食管鳞癌的增殖及放疗增敏作用的研究[D];复旦大学;2013年

3 王娜娜;RACK1在食管鳞癌预后及进展中的作用及与上皮间质转化的相关性研究[D];山东大学;2015年

4 孟慧;miR-330-3p和miR-26b在食管鳞癌中的功能及其调控机制探讨[D];第三军医大学;2015年

5 周韶梅;miR-100在食管鳞癌中的调控作用及机制研究[D];北京工业大学;2015年

6 曾薇;食管鳞癌中Survivin对NF-κB p65调控机制的研究[D];新疆医科大学;2015年

7 杨宏丽;PRKDC、XRCC4多态性与中国安阳地区食管鳞癌发生风险关联性研究[D];山东大学;2015年

8 崔瑶;STAT3对缺氧诱导食管鳞癌上皮间质转化的调控作用[D];郑州大学;2016年

9 杨璇;miR-1207-5p对食管鳞癌发生的影响[D];郑州大学;2016年

10 江亚南;T-LAK细胞来源的蛋白激酶(TOPK)在食管鳞癌增殖中的功能研究[D];郑州大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 刘菲菲;黄连素靶向微管抑制表皮鳞癌A431细胞增殖的作用及机理研究[D];云南农业大学;2017年

2 翟立广;姜黄素对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖和凋亡的影响[D];新乡医学院;2015年

3 刘建平;MTA1、VEGF-C在食管鳞癌中的表达及与临床病理、肿瘤淋巴管生成的关系[D];川北医学院;2015年

4 范玉宏;Caveolin-1在食管鳞癌浸润进展中的作用研究[D];河北医科大学;2015年

5 闻朋浩;同期放化疗联合DC-CIK对Ⅰ~Ⅱ期食管鳞癌的疗效分析[D];新乡医学院;2015年

6 王春丽;食管鳞癌高频扩增基因IGHMBP2的鉴定及其功能的初步研究[D];安徽医科大学;2015年

7 刘娇;GPRC5A和STAT3在食管鳞癌中的表达及意义[D];郑州大学;2015年

8 朱毓卉;江苏省泰兴地区食管癌时空分布特征分析及女性生殖因素研究[D];山东大学;2015年

9 孙智;黏蛋白1在食管鳞癌中的表达及其与临床病理及预后的关系[D];山东大学;2015年

10 杨蕾;热休克蛋白HSP32、HSP27在食管鳞癌转移中作用的研究[D];第四军医大学;2015年

本文编号：2625247